石海礬，李偉，陳益平，汪洪姣，張桂蓮，金勝鑫

(溫州醫(yī)學(xué)院附屬第二醫(yī)院，浙江 溫州 325027，1.兒科；2.檢驗(yàn)科)

白介素1β(IL-1β)與神經(jīng)元特異性烯醇酶(NSE)是敏感、特異性反映腦損傷的量化指標(biāo)，在腦損傷中反映病情嚴(yán)重程度、判斷預(yù)后的作用已越來越受到人們的關(guān)注[1-2]。但關(guān)于流行性乙型腦炎(乙腦)患兒腦脊液及血清IL-1β、NSE含量變化、與病情及預(yù)后的關(guān)系及兩者相關(guān)性，國內(nèi)外尚鮮見報(bào)道，我們對此進(jìn)行研究，報(bào)告如下。

1 材料和方法

1.1 對象 我院兒童感染科2005年6月-2007年10月住院乙腦患兒，男31例，女19例；年齡1～13歲，平均年齡5.6歲。均符合彭文偉主編的《傳染病學(xué)》（第六版）診斷標(biāo)準(zhǔn)[3]，血清乙腦病毒特異性IgM抗體均為陽性。根據(jù)患兒入院時(shí)神志情況，按Glasgow評分標(biāo)準(zhǔn)，15分為正常，共17例；14～12分為輕度，共20例；11～8分為重度，共13例。所有患兒均無乙腦疫苗接種史。對照組為兒外科20例非神經(jīng)系統(tǒng)疾病手術(shù)患兒，男13例，女7例；年齡2～11.5歲，平均年齡5.3歲。兩組性別、年齡差異無顯著性(P均>0.05)。

1.2 方法

1.2.1 標(biāo)本采集：50例患兒于極期（入院當(dāng)天）、47例（重度組有3例放棄治療）于恢復(fù)期（入院后2到3周）采集腦脊液（CSF）。腰穿采取CSF標(biāo)本后立即送檢常規(guī)、生化，另留取1 mL于無熱源和內(nèi)毒素試管中，-70 ℃冰箱內(nèi)保存待檢。同時(shí)采血2 mL置于無熱源和內(nèi)毒素的試管中，剔除溶血標(biāo)本，靜置5～10 min后，3000 r/min離心10 min，分離血清，置于Eppendorf管中，-20 ℃冰箱內(nèi)保存待檢。

1.2.2 標(biāo)本檢測：IL-1β采用雙抗體夾心ELISA法檢測，試劑由上海晶美公司提供。NSE采用電化學(xué)發(fā)光法，試劑盒購自羅氏公司，按說明書由專人負(fù)責(zé)統(tǒng)一檢測。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理方法 組間比較采用單因素方差分析，兩兩比較方差齊者采用LSD法，方差不齊采用Dunnett’s T3法，相關(guān)分析采用Pearson積差相關(guān)分析法。

2 結(jié)果

2.1 乙腦患兒極期和恢復(fù)期（不同分組）CSF、血清中IL-1β、NSE檢測結(jié)果，見表1。

表1 乙腦患兒極期和恢復(fù)期（不同分組）CSF、血清中IL-1β、NSE檢測結(jié)果±s，μg/L)

表1 乙腦患兒極期和恢復(fù)期（不同分組）CSF、血清中IL-1β、NSE檢測結(jié)果±s，μg/L)

任意兩組間兩兩比較：均P<0.01

?

CSF、血清中IL-1β、NSE各組含量極期>恢復(fù)期>對照組，均P<0.01。

2.2 各型乙腦患兒CSF、血清中IL-1β含量，見表2。

表2 各型乙腦患兒CSF、血清中IL-1β含量(±s，μg/L)

表2 各型乙腦患兒CSF、血清中IL-1β含量(±s，μg/L)

任意兩組間兩兩比較：均P<0.01

?

極期和恢復(fù)期CSF、血清中IL-1β含量隨病情的嚴(yán)重程度而增高，差異有顯著性（均P<0.01）。

2.3 各型乙腦患兒CSF、血清中NSE含量，見表3。

表3 各型乙腦患兒CSF、血清中NSE含量±s，μg/L)

表3 各型乙腦患兒CSF、血清中NSE含量±s，μg/L)

任意兩組間兩兩比較：均P<0.01

?

極期和恢復(fù)期CSF、血清中NSE含量隨病情的嚴(yán)重程度而增高，差異有顯著性（均P<0.01）。2.4 乙腦患兒腦脊液、血清中IL-1β、NSE含量相關(guān)性 乙腦極期患兒CSF IL-1β、NSE水平與血清IL-1β、NSE水平呈正相關(guān)(r=0.706，0.747，均P<0.01)，CSF、血清IL-1β水平與CSF、血清NSE水平呈正相關(guān)(r=0.611，0.708，均P<0.01)。

3 討論

流行性乙型腦炎是乙腦病毒引起的以腦實(shí)質(zhì)炎癥為主的急性中樞神經(jīng)系統(tǒng)傳染病，可引起神經(jīng)細(xì)胞變性、腫脹及壞死，嚴(yán)重者在腦實(shí)質(zhì)形成壞死軟化灶，留有嚴(yán)重的后遺癥。因此，早期判斷腦損傷程度，評估預(yù)后有重要作用。

近年來，白介素1（interleukin-1，IL-1）家族在顱腦損傷中的致炎作用越來越受關(guān)注。其中IL-1β為IL-1的主要分泌形式，與顱腦損傷關(guān)系最為密切。中樞神經(jīng)系統(tǒng)自身可產(chǎn)生IL-1β，正常情況下，腦組織中的IL-1β活性極低，但在顱腦創(chuàng)傷、顱內(nèi)感染等情況時(shí)，IL-1β水平及活性則明顯增高[4]，加重腦損傷。本研究發(fā)現(xiàn)乙腦極期患兒CSF中IL-1β含量比對照組明顯升高，與乙腦病變特征相一致。本研究乙腦患兒腦損傷程度根據(jù)Glasgow評分，分為正常組、輕度組和重度組（標(biāo)本采集時(shí)間段中未收治極重型乙腦），極期時(shí)CSF中IL-1β含量隨Glasgow評分分值減少而升高，說明CSF中IL-1β含量反映乙腦患兒的病情輕重及腦損傷程度。IL-1β加重腦損傷的機(jī)制可能為：IL-1β升高導(dǎo)致大腦脈管系統(tǒng)白細(xì)胞的聚集，增加黏附分子的表達(dá)，破壞血腦屏障，導(dǎo)致單核細(xì)胞、中性粒細(xì)胞的入侵，對腦實(shí)質(zhì)細(xì)胞造成損傷[5]。同時(shí)IL-1β增加鈣離子進(jìn)入細(xì)胞，直接導(dǎo)致神經(jīng)細(xì)胞死亡[6]，還可通過調(diào)節(jié)腦血流量，加重腦缺血損傷[7]。刪（敲）除鼠的IL-1β的編碼基因可顯著減輕腦的缺血損傷[8]，間接表明IL-1β具有加重腦損傷的作用。研究還發(fā)現(xiàn)，血中IL-1β含量亦隨病情的嚴(yán)重程度升高而增加，與CSF呈正相關(guān)。正常條件下，外周血中IL-1β含量極微。當(dāng)腦損傷時(shí)，血CSF屏障通透性升高，使IL-1β跨過血腦脊液屏障進(jìn)入血管內(nèi)，因此，檢測血中IL-1 β亦有助于判斷腦損傷的程度。

NSE是參與醣酵解的關(guān)鍵酶，存在于神經(jīng)元及神經(jīng)來源的細(xì)胞中。正常條件下，正常體液中含量甚微。在腦損傷情況下，神經(jīng)元細(xì)胞膜完整性被破壞，使NSE從細(xì)胞內(nèi)漏到細(xì)胞外，進(jìn)入CSF中，同時(shí)血腦脊液屏障通透性升高，NSE可跨過血腦脊液屏障進(jìn)入血管內(nèi)，從而進(jìn)入外周循環(huán)[9]。因此，CSF及血中NSE被認(rèn)為是膠質(zhì)細(xì)胞和神經(jīng)元損害時(shí)的標(biāo)志物。研究表明，腦損害患者膠質(zhì)細(xì)胞和神經(jīng)元的損害及其嚴(yán)重程度，可以通過NSE含量來反映[10]。本研究發(fā)現(xiàn)，乙腦患兒CSF、血中NSE含量極期大于恢復(fù)期，且乙腦重度組>輕度組>正常組，皆有顯著差異，并且CSF與血的NSE含量呈正相關(guān)，提示隨腦實(shí)質(zhì)損害加重，NSE升高。證明NSE能反映乙腦患兒腦實(shí)質(zhì)損害的嚴(yán)重程度，與文獻(xiàn)[11]報(bào)道一致。

根據(jù)研究，我們還發(fā)現(xiàn)，隨著IL-1β的升高，NSE亦升高，呈正相關(guān)，其機(jī)制可能是乙腦病毒侵害腦實(shí)質(zhì)時(shí)，IL-1β分泌增多，導(dǎo)致神經(jīng)細(xì)胞不同程度破壞，細(xì)胞內(nèi)NSE釋放增多。IL-1β變化提示腦實(shí)質(zhì)炎癥情況，而NSE反映了神經(jīng)細(xì)胞的損傷程度，兩者聯(lián)合檢測，從不同方面反映了腦損傷，但兩者是否有協(xié)同作用，國內(nèi)外文獻(xiàn)鮮見報(bào)道，尚待進(jìn)一步研究明確。

本研究發(fā)現(xiàn)，乙腦患兒病程2到3周，CSF常規(guī)恢復(fù)正常時(shí)，IL-1β及NSE雖然有所下降，但仍高于對照組患兒，是否提示乙腦患兒腦損傷持續(xù)時(shí)間較長，有待進(jìn)一步探討。

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