張鳳華,王婷婷,王大利

(1.大連醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院檢驗(yàn)科,遼寧大連116021;2.大連大學(xué)附屬新華醫(yī)院檢驗(yàn)科,遼寧大連116021;3.大連機(jī)車醫(yī)院,遼寧 大連116021)

銅綠假單胞菌(PAE)是醫(yī)院感染的常見病原菌,尤其在ICU病房,可引起機(jī)體多系統(tǒng)、多臟器或多部位的嚴(yán)重感染[1],是ICU內(nèi)醫(yī)院感染的首要病原菌[2]。由于多種廣譜抗菌素的大量使用,并且隨著亞胺培南等碳青霉烯類抗生素在臨床的廣泛使用,細(xì)菌也逐漸獲得對此類藥物的耐藥性且耐藥性逐年升高。為了解本院ICU分離銅綠假單胞菌對抗菌藥物的耐藥性及性及其產(chǎn)金屬β-內(nèi)酰胺酶的情況分析,我們進(jìn)行了相關(guān)研究。

1 材料與方法

1.1菌株來源 2008-2009年大連醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院ICU分離鑒定的1 478株銅綠假單胞菌,質(zhì)控菌株為銅綠假單胞菌ATCC 27853,購自衛(wèi)生部臨床檢驗(yàn)中心。

1.2鑒定與藥敏 采用德靈MicroscanWalkAway 96SI系統(tǒng)和與之配套的藥敏鑒定復(fù)合板鑒定細(xì)菌,用微量稀釋法讀取藥敏,按NCCLS2006年版標(biāo)準(zhǔn)判斷結(jié)果,分為敏感(S),中介(I),耐藥(R)。

1.3金屬β-內(nèi)酰胺酶檢測方法 根據(jù)付有榮等[3]報(bào)道,以0.1 mol/L EDTA及2-巰基丙酸為抑制劑,用雙紙片協(xié)同法篩檢金屬酶。

2 結(jié)果

2.1菌株分布 臨床標(biāo)本分布構(gòu)成比見表1。

2.2銅綠假單胞菌耐藥率 1 478株銅綠假單胞菌對12種抗菌藥物的耐藥率見表2。

2.3金屬β-內(nèi)酰胺酶篩查試驗(yàn)結(jié)果 135株對亞胺培南耐藥的多重耐藥菌株中,用EDTA紙片復(fù)合法篩選出45株產(chǎn)金屬酶的菌株,產(chǎn)生率為33.3%,占總檢出株數(shù)的3.0%。

表1 銅綠假單胞菌在臨床標(biāo)本中的分布構(gòu)成比(%)

表2 1 478株銅綠假單胞菌對12種抗菌藥物的耐藥率(%)

3 討論

本實(shí)驗(yàn)顯示,ICU病房中的銅綠假單胞菌主要分離自痰液,占所有分離標(biāo)本的58.7%,考慮主要與ICU患者大都不能自主呼吸,應(yīng)用呼吸機(jī)、氣管插管等侵入性操作較多有關(guān)。同時(shí),由于ICU患者大多病情危重、免疫力低下、大量應(yīng)用廣譜抗菌藥物等因素,ICU分離銅綠假單胞菌的耐藥率有逐年增長的趨勢,特別是多耐藥和泛耐藥株大量出現(xiàn)[4]。本實(shí)驗(yàn)中多數(shù)抗菌藥物的耐藥率都大于50%,耐亞胺培南的菌株達(dá)到63.7%,銅綠假單胞菌只對阿米卡星較為敏感。氨基糖甙類藥由于藥物的副作用大,臨床使用相對減少,阿米卡星優(yōu)于妥布霉素和慶大霉素,且腎毒性低,常是首選氨基糖甙類藥物。因?yàn)殂~綠假單胞菌的耐藥性強(qiáng)而復(fù)雜,若尚急需,可選氨基糖甙類或喹諾酮類藥物聯(lián)用加酶抑制劑藥物,同時(shí)應(yīng)及時(shí)進(jìn)行細(xì)菌培養(yǎng)和藥敏試驗(yàn)。

近年來隨著碳青酶烯類藥物的使用,臨床上銅綠假單胞菌對碳青酶烯類藥物的耐藥率不斷增加,特別是耐碳青酶烯類藥物菌株的感染,常使臨床醫(yī)師抗感染治療面臨諸多困難。銅綠假單胞菌的耐藥機(jī)制包括產(chǎn)碳青霉烯酶、外膜孔蛋白丟失和多藥外排泵出系統(tǒng)的過度表達(dá)等。目前在銅綠假單胞菌中發(fā)現(xiàn)的碳青霉烯酶主要是金屬酶。金屬酶可以是質(zhì)粒介導(dǎo)的或染色體介導(dǎo)的,已在全球范圍內(nèi)廣泛播散。產(chǎn)金屬酶的銅綠假單胞菌能水解包括第三、第四代頭孢菌素及碳青霉烯類等廣譜抗生素,導(dǎo)致臨床抗感染治療失敗。本實(shí)驗(yàn)中,135株對亞胺培南耐藥的菌株中,用EDTA紙片復(fù)合法篩選出45株產(chǎn)金屬酶的菌株,產(chǎn)生率為33.3%;金屬酶的總體產(chǎn)生率為3.0%,提示我院ICU病房有產(chǎn)金屬酶的銅綠假單胞流行,應(yīng)予隔離治療。微生物室工作人員需定期總結(jié)耐藥監(jiān)測結(jié)果并反饋給臨床醫(yī)師參考,以便采取控制措施[5],防止耐藥菌株進(jìn)一步的擴(kuò)散流行。

[1]王中新,魏艷艷,熊自忠.重癥監(jiān)護(hù)病房分離銅綠假單胞菌的耐藥性及分子流行病學(xué)檢測[J].中華醫(yī)院感染學(xué)雜志,2009,19(4):463.

[2]居 峰,顧 兵,盛 敏.343例 ICU病原菌分布與耐藥性分析[J].南京醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版),2009,29(2):267.

[3]付有榮,周俊英,常 江,等.一種細(xì)菌金屬β-內(nèi)酰胺酶篩查方法的建立[J].醫(yī)學(xué)新知雜志,2005,15(1):43.

[4]孫景勇,倪語星,汪 復(fù),等.2007年中國CHINET銅綠假單胞菌耐藥性監(jiān)測[J].中國感染與化療志,2009,9(3):192.

[5]朱德妹.進(jìn)一步加強(qiáng)細(xì)菌耐藥監(jiān)測[J].中華檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志,2006,29(10):865.