麥凱欣 朱 輝 崔永言

SVF-PLGA聯(lián)合脂肪移植體內(nèi)構(gòu)建組織工程化軟組織充填材料的初步研究

麥凱欣 朱 輝 崔永言

目的采用組織工程方法，探討生物可降解材料、自體脂肪作為細(xì)胞外基質(zhì)，脂肪組織基質(zhì)血管成分（SVF）作為種子細(xì)胞構(gòu)建復(fù)合移植物，即刻回植，體內(nèi)培養(yǎng)并用于軟組織充填的可行性及安全性。方法取雄性新西蘭大白兔40只，隨機(jī)分為4組：實(shí)驗(yàn)組A、B（各10只）以兩種混合方式構(gòu)建SVF-脂肪-PLGA復(fù)合移植物，實(shí)驗(yàn)組A將SVF先與脂肪混合再種植于支架上，實(shí)驗(yàn)組B將SVF與支架充分混合，再用脂肪組織包埋；對(duì)照組A（n=10）的移植物為預(yù)處理后的空白支架；對(duì)照組B（n=10）的移植物為SVF-PLGA復(fù)合物。各組均將植入物移植至實(shí)驗(yàn)兔背部皮下與肌肉淺筋膜之間，于術(shù)后2個(gè)月、4個(gè)月取材，進(jìn)行大體觀察、組織切片、HE染色和油紅染色，了解支架降解情況和組織工程化軟組織充填材料構(gòu)建情況，觀察期間記錄術(shù)后所出現(xiàn)的各種并發(fā)癥和不良反應(yīng)。結(jié)果術(shù)后4個(gè)月時(shí)，各組均未發(fā)生切口感染、硬結(jié)形成、移植物移位和排斥等并發(fā)癥。實(shí)驗(yàn)組B中有1例切口裂開(kāi)、2例脂肪液化。大體觀察和HE染色、油紅染色可見(jiàn)形成的組織工程化軟組織填充材料主要成分為血管化脂肪組織，未發(fā)現(xiàn)腫瘤樣細(xì)胞，外周形成纖維膜。4個(gè)月后PLGA支架完全降解，實(shí)驗(yàn)組B的脂肪存活率較實(shí)驗(yàn)組A和對(duì)照組B高。結(jié)論構(gòu)建SVF-脂肪-PLGA復(fù)合物軟組織充填材料是可行的，具有安全、可操作性強(qiáng)、耗時(shí)少、脂肪存活率高、塑形性好等優(yōu)點(diǎn)。

移植軟組織充填材料組織工程支架脂肪

軟組織充填已廣泛應(yīng)用于整形外科，可改善身體各部位，特別是面部脂肪缺損、塌陷及雙側(cè)不對(duì)稱等，尋找組織相容性好、易塑形、來(lái)源豐富的軟組織充填材料具有重要意義。自體充填材料存在取材有限、增加創(chuàng)傷等不足；異體及異種組織因移植后存在免疫排斥反應(yīng)，應(yīng)用較少。目前，雖已有不少人工合成材料，卻因組織相容性等問(wèn)題而無(wú)法廣泛應(yīng)用，需要進(jìn)一步研制、開(kāi)發(fā)新產(chǎn)品以適應(yīng)臨床需求[1]。本課題擬采用組織工程技術(shù)，探討生物可降解材料、自體脂肪復(fù)合細(xì)胞外基質(zhì)與SVF復(fù)合物即刻回植，體內(nèi)培養(yǎng)并進(jìn)行軟組織充填的可行性、安全性。

1 材料和方法

1.1 主要試劑和儀器

Ⅰ型膠原蛋白酶（美國(guó)Sigma公司），高糖DMEM培養(yǎng)液（美國(guó)GIBCO公司），5%小牛血清（美國(guó)GIBCO公司），PLGA支架（韓國(guó)REGEN生物技術(shù)公司），蘇木素伊紅（HE）染色試劑盒（上海碧云天生物技術(shù)有限公司），MPS 30倒置熒光顯微鏡（德國(guó)Leica公司），CM 1900低溫恒冷冰凍切片機(jī)（德國(guó)Leica公司）。

1.2 動(dòng)物與分組

選用新西蘭雄兔（2～3月齡，南方醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供）40只，體重2～2.5 kg，標(biāo)準(zhǔn)化飼養(yǎng)。隨機(jī)分為實(shí)驗(yàn)組A、B（各10只）以兩種混合方式構(gòu)建SVF-脂肪-PLGA復(fù)合移植物，實(shí)驗(yàn)組A將SVF先與脂肪混合再種植于支架上，實(shí)驗(yàn)組B將SVF與支架充分混合，再用脂肪組織包埋；對(duì)照組A（n=10）的移植物為預(yù)處理后的空白支架；對(duì)照組B（n=10）的移植物為SVF-PLGA復(fù)合物。每只實(shí)驗(yàn)兔回植2個(gè)相同移植物。

1.3 復(fù)合物構(gòu)建

1.3.1 SVF的提取

20%氨基甲酸乙酯溶液靜脈麻醉（5 mL/kg），于實(shí)驗(yàn)兔雙側(cè)腹股溝區(qū)取皮下脂肪，共約20 mL（每側(cè)約10 mL）。將脂肪組織剪成直徑約5 mm的碎塊，700 g離心3 min，0.1%膠原蛋白酶消化30 min，800 g離心10 min，取出成熟脂肪及纖維組織上懸液和上清液后加入緩沖液輕柔震蕩，移去上清液，加入小牛血清2 mL，吹打重懸，細(xì)胞計(jì)數(shù)。

1.3.2 PLGA支架的預(yù)處理

無(wú)菌操作下從產(chǎn)品原容器中取出支架，用無(wú)菌剪刀將其修剪成若干小塊（1.5 cm×2 cm×0.3 cm），50%乙醇浸泡，負(fù)壓抽吸至排盡空氣，低溫保存過(guò)夜后，無(wú)菌水浸泡清洗3次，抽吸至排盡空氣，PBS沖洗支架2次，低溫保存?zhèn)溆谩?/p>

1.3.3 移植物的構(gòu)建

SVF-脂肪-PLGA支架復(fù)合物：每10 mL脂肪組織中的5 mL用于提取SVF，另5 mL與PLGA和SVF混合構(gòu)建移植復(fù)合物。實(shí)驗(yàn)組A將SVF先與脂肪混合再種植于支架上；實(shí)驗(yàn)組B將SVF種植于支架上，再用脂肪組織包埋。

SVF-PLGA支架復(fù)合物：10 mL脂肪全部用于提取SVF，并將SVF均勻種植于支架上。

1.4 手術(shù)方法

20%氨基甲酸乙酯溶液靜脈麻醉（5 mL/kg），實(shí)驗(yàn)兔俯臥位，兔背部備皮，消毒、鋪巾。取背部垂直脊柱的長(zhǎng)約1.5 cm的切口，鈍性分離皮下組織與肌肉淺筋膜間的潛在間隙（約3 cm×2 cm×0.3 cm），將已制備好的復(fù)合物置入，3-0絲線全層縫合切口，留置切口標(biāo)記線。

1.5 觀察指標(biāo)

復(fù)合物植入前的SVF細(xì)胞計(jì)數(shù)，術(shù)后2個(gè)月、4個(gè)月分別對(duì)每只實(shí)驗(yàn)兔取1個(gè)移植物標(biāo)本，行大體觀察、體積測(cè)量，并計(jì)算復(fù)合物存活率，快速冰凍切片后HE染色和油紅染色，鏡下觀察。

1.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

應(yīng)用SPSS 1.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，數(shù)據(jù)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示；實(shí)驗(yàn)分組間的移植物體積比較采用單因素方差分析，P＜0.05為差異有顯著性。

2 結(jié)果

2.1 充填移植物植入前的SVF細(xì)胞計(jì)數(shù)及移植物在術(shù)前、術(shù)后2個(gè)月和術(shù)后4個(gè)月的體積

因部分移植物形狀不規(guī)則，全部均以排液量（磷酸鹽緩沖液）作為體積計(jì)量記錄。實(shí)驗(yàn)組A、B和對(duì)照組B的移植物植入前SVF細(xì)胞計(jì)數(shù)無(wú)顯著性差異（P＞0.05）。實(shí)驗(yàn)組A、B的移植物在術(shù)前的體積無(wú)顯著性差異（P＞0.05），術(shù)后2個(gè)月、4個(gè)月實(shí)驗(yàn)組B的移植物體積均比實(shí)驗(yàn)組A大，有顯著性差異（P＜0.05），其體積變化的標(biāo)準(zhǔn)差也比實(shí)驗(yàn)組A小。實(shí)驗(yàn)組A、B的移植物存活率平均值較對(duì)照組B高（表1）

表1 SVF細(xì)胞計(jì)數(shù)、移植物手術(shù)前后體積變化和存活率比較

2.2 大體觀察

術(shù)后2個(gè)月：實(shí)驗(yàn)組可見(jiàn)乳白色半透明脂肪組織內(nèi)有殘留PLGA支架，質(zhì)地柔軟，20個(gè)取出標(biāo)本的平均體積較植入前??；A、B兩組外觀基本相同，只存在體積差異。對(duì)照組A的殘留PLGA支架較實(shí)驗(yàn)組的殘留PLGA支架稍大，外周包繞完整纖維膜，質(zhì)硬如軟骨。對(duì)照組B可見(jiàn)鮮紅色類圓形團(tuán)塊狀物，外周有較致密纖維膜包裹，質(zhì)韌，切開(kāi)見(jiàn)殘留PLGA支架。

術(shù)后4個(gè)月：實(shí)驗(yàn)組可見(jiàn)乳白色不透明脂肪組織，質(zhì)地柔軟，切開(kāi)未見(jiàn)殘留PLGA支架。A、B兩組外觀基本相同，20個(gè)取出標(biāo)本的平均總體積與植入前基本一致，B組的平均體積稍大，但2個(gè)標(biāo)本發(fā)生完全或部分脂肪液化。對(duì)照組A的PLGA支架已完全降解，剖開(kāi)移植物未見(jiàn)支架成分殘留，原植入?yún)^(qū)可見(jiàn)少許纖維樣組織，與皮下組織緊密粘連。對(duì)照組B可見(jiàn)類矩形片狀脂肪組織，外周有纖維組織膜狀增生，質(zhì)較柔軟（圖1）。

圖1 術(shù)后4個(gè)月，各組大體觀察

對(duì)照組A、B和實(shí)驗(yàn)組A均未發(fā)生術(shù)后切口裂開(kāi)、感染和硬結(jié)形成、移植物移位等并發(fā)癥。實(shí)驗(yàn)組B中有1例發(fā)生移植區(qū)傷口裂開(kāi)，再次予以縫合；1例發(fā)生移植區(qū)完全脂肪液化；1例發(fā)生移植物部分脂肪液化。

圖2 術(shù)后2個(gè)月，實(shí)驗(yàn)組組織學(xué)觀察（100×）

圖3 術(shù)后2個(gè)月，對(duì)照組B組織學(xué)觀察（100×）

2.3 組織學(xué)觀察

術(shù)后2個(gè)月：實(shí)驗(yàn)組快速冰凍切片HE染色可見(jiàn)PLGA支架殘留量較大，外周有薄層纖維膜狀增生，脂肪細(xì)胞主要分布于殘留支架外周，脂肪細(xì)胞內(nèi)含大脂滴，脂滴外周為薄層胞質(zhì)，核被推擠到一側(cè)，多聚成群；脂肪組織內(nèi)可見(jiàn)少許毛細(xì)血管長(zhǎng)入。油紅染色可見(jiàn)支架外脂肪細(xì)胞橙紅染色。實(shí)驗(yàn)組A、B的鏡下觀察未見(jiàn)差異（圖2）。對(duì)照組A可見(jiàn)降解中的不規(guī)則網(wǎng)狀支架，其內(nèi)可見(jiàn)少許毛細(xì)血管長(zhǎng)入，外周有薄層纖維膜狀增生，未見(jiàn)脂肪細(xì)胞，油紅染色未見(jiàn)橙紅色細(xì)胞層。對(duì)照組B亦可見(jiàn)中央的不規(guī)則網(wǎng)狀支架，脂肪組織在支架空隙生長(zhǎng)，以支架外1/2較明顯，油紅染色呈多個(gè)橙紅色脂肪細(xì)胞層（圖3）。

術(shù)后4個(gè)月：實(shí)驗(yàn)組快速冰凍切片HE染色可見(jiàn)致密的脂肪細(xì)胞層，脂滴較術(shù)后2個(gè)月的大，內(nèi)未見(jiàn)PLGA支架殘留，脂肪組織間可見(jiàn)不規(guī)則纖維隔，外周未見(jiàn)明顯纖維膜狀增生；脂肪組織內(nèi)可見(jiàn)毛細(xì)血管長(zhǎng)入，管壁細(xì)胞層較前增多。油紅染色可見(jiàn)脂肪細(xì)胞橙紅染色。實(shí)驗(yàn)組A、B的鏡下觀察未見(jiàn)差異（圖4）。對(duì)照組A可見(jiàn)致密纖維組織，內(nèi)有淋巴細(xì)胞浸潤(rùn)，少許毛細(xì)血管長(zhǎng)入，油紅染色未見(jiàn)橙紅色細(xì)胞層（圖5）。對(duì)照組B原有的網(wǎng)狀支架基本消失并被脂肪組織取代，油紅染色呈多個(gè)橙紅色脂肪細(xì)胞層。

圖4 術(shù)后4個(gè)月，實(shí)驗(yàn)組組織學(xué)觀察（100×）

圖5 術(shù)后4個(gè)月，對(duì)照組A組織學(xué)觀察（100×）

討論

軟組織充填的材料分注射性和非注射性兩類，前者是指注射到皮膚或皮下組織內(nèi)，達(dá)到矯正缺陷的目的，因其操作簡(jiǎn)便，來(lái)源豐富，所以占有軟組織充填材料的絕大部分，但有時(shí)會(huì)出現(xiàn)全身及局部損害，如注射物移位、水腫、肉芽腫樣反應(yīng)、細(xì)胞毒性、遺傳毒性等[2]。因此，非注射性材料，如無(wú)細(xì)胞真皮基質(zhì)（Alloderm）、人發(fā)制備軟組織充填材料、生物可降解支架等[3－5]被嘗試用于臨床。

在注射性軟組織充填材料中，脂肪移植一直備受關(guān)注，尤其是抽脂術(shù)在臨床廣泛應(yīng)用后，自體脂肪顆粒移植被越來(lái)越多的醫(yī)生和患者所接受，并在獲取、純化、注射脂肪和提高其生存率等方面不斷得到提高。SVF是含有大量多向分化潛能的間充質(zhì)干細(xì)胞，取材方便，增殖能力強(qiáng)[6]，其富含的脂肪組織來(lái)源干細(xì)胞（ASCs），具有以下幾個(gè)特點(diǎn)[7]：①具備分化為脂肪細(xì)胞的潛能，并且促進(jìn)細(xì)胞更新?lián)Q代；②可分泌SDF-1、HGF等血管生長(zhǎng)因子，并使自身分化為血管內(nèi)皮細(xì)胞，促進(jìn)受區(qū)組織在損傷、缺氧的刺激下血管化；③ASCs在分化的同時(shí)，數(shù)目基本不變，增殖分化功能得以維持。此外，提取SVF能省卻提取ASCs的體外擴(kuò)增步驟，簡(jiǎn)化了實(shí)驗(yàn)過(guò)程，并節(jié)省了實(shí)驗(yàn)時(shí)間，所以選取SVF作為種子細(xì)胞是可行的，并具有耗時(shí)少的優(yōu)勢(shì)。

選擇合適的細(xì)胞載體作為細(xì)胞外基質(zhì)是使SVF中的ASCs得以增殖、分化的重要條件[8]。脂肪組織本身含有較豐富的膠原、纖維粘連蛋白、蛋白聚糖等，可提供良好的細(xì)胞外基質(zhì)。近年提出的細(xì)胞輔助脂肪轉(zhuǎn)移（Cell-Assisted Lipotransfer，CAL）技術(shù)[9]，同時(shí)解決了移植脂肪中ASCs含量低和移植SVF缺乏細(xì)胞外基質(zhì)兩個(gè)問(wèn)題，并簡(jiǎn)化了SVF提取的體外培養(yǎng)、多次離心重懸等步驟，但CAL技術(shù)提高移植脂肪存活率的具體數(shù)據(jù)并沒(méi)有準(zhǔn)確報(bào)道，且塑形性較差，充填效果僅在臨床體現(xiàn)，未有組織學(xué)證據(jù)。本實(shí)驗(yàn)選用的支架為PLGA，具備生物可降解性，其降解產(chǎn)物為H2O和CO2，組織相容性好，網(wǎng)格狀結(jié)構(gòu)使干細(xì)胞分布均勻，有利其生長(zhǎng)，可作為良好的細(xì)胞外基質(zhì)。Choi等[10]以裸鼠為實(shí)驗(yàn)對(duì)象，提出了ASCs復(fù)合PLGA用于軟組織充填的可能性，但是該方法需要7～10 d體外擴(kuò)增時(shí)間才能取得足夠量的ASCs，使臨床應(yīng)用受到限制。

根據(jù)本實(shí)驗(yàn)中的對(duì)照組B的結(jié)果，我們發(fā)現(xiàn)，直接以SVF作為種子細(xì)胞，簡(jiǎn)化了ASCs的提取步驟，但單純使用SVF、支架復(fù)合培養(yǎng)在手術(shù)后初期存在充填局部僵硬，手感差，且脂肪存活率低等缺點(diǎn)。若將脂肪組織和可降解材料兩者結(jié)合，作為含有生物組織和組織工程材料的復(fù)合細(xì)胞外基質(zhì)，構(gòu)建SVF-脂肪-PLGA充填移植物，不僅能保證有效的ASCs濃度，亦能為其提供膠原蛋白含量豐富、有利于ASCs爬行生長(zhǎng)和組織相容性好的細(xì)胞外基質(zhì)，有望互補(bǔ)不足，從而優(yōu)化軟組織充填效果。單純脂肪移植、CAL的平均存活率大約為40%～80%[7]，實(shí)驗(yàn)組A、B的存活率均在90%以上，大大提高了移植脂肪的存活率。

實(shí)驗(yàn)組A與實(shí)驗(yàn)組B的移植物存活率和并發(fā)癥發(fā)生情況存在差異，提示SVF與支架充分混合后再用脂肪組織包埋的移植物存活率較高，即以PLGA支架作為主要的細(xì)胞載體，脂肪作為SVF提供營(yíng)養(yǎng)的生物物質(zhì)，對(duì)ACSs的存活、增殖和分化是有利的。我們認(rèn)為，用脂肪組織來(lái)包埋SVF-PLGA復(fù)合物，能為種子細(xì)胞SVF創(chuàng)造一個(gè)相對(duì)封閉的、營(yíng)養(yǎng)充分的生存內(nèi)環(huán)境，從而減少了移植區(qū)局部環(huán)境對(duì)移植物的影響；存在于SVF的ASCs本身具有分泌血管生長(zhǎng)因子的作用，脂肪組織亦為血管化提供良好的條件，提高了ASCs的生命力和脂肪的存活率。要進(jìn)一步優(yōu)化生長(zhǎng)內(nèi)環(huán)境，可考慮添加合適的細(xì)胞因子或其他營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)等，有待于進(jìn)一步探索。另外，脂肪液化的發(fā)生，可能是因?yàn)槭中g(shù)時(shí)分離腔隙狹窄、脂肪組織與切口接觸緊密等因素。

實(shí)驗(yàn)中，4組均有充填移植物的外周纖維膜形成?？赡苁且?yàn)橐浦参锖Ъ芡鈦?lái)成分，機(jī)體產(chǎn)生異物反應(yīng)；實(shí)驗(yàn)兔手術(shù)應(yīng)激性反應(yīng)較大，導(dǎo)致發(fā)生無(wú)菌性炎癥；存活后的移植脂肪組織的旁分泌作用誘導(dǎo)成纖維細(xì)胞趨化，促進(jìn)了纖維膜形成[11]。

軟組織充填除了用于面部充填外，也應(yīng)用于陰莖增粗[12－13]。陰莖增粗主要依賴于軟組織充填的各種手段來(lái)實(shí)現(xiàn)，多種軟組織充填材料包括自體組織移植和皮瓣轉(zhuǎn)移、各種人工合成假體已應(yīng)用于陰莖增粗。但由于陰莖的特殊結(jié)構(gòu)、形態(tài)及因勃起而出現(xiàn)的體積變化等，使其對(duì)充填材料的要求更高，安全有效的陰莖增粗充填材料仍在研究中[14-22]。組織工程技術(shù)用于重建陰莖結(jié)構(gòu)與功能是近年來(lái)重建外科學(xué)研究的熱點(diǎn)之一[23]。Perovic等[22]利用成纖維細(xì)胞體外擴(kuò)增后復(fù)合可降解支架體內(nèi)回植，使陰莖增粗獲得成功，這是首次利用PLGA為支架的細(xì)胞自體移植用于軟組織充填的臨床應(yīng)用，但體外擴(kuò)增需要時(shí)間較長(zhǎng)，手術(shù)時(shí)機(jī)難以把握。吳意光等[24]從病理學(xué)角度證明了自體成纖維細(xì)胞種植PLGA支架的安全性，認(rèn)為是安全有效的組織工程細(xì)胞支架復(fù)合物。本實(shí)驗(yàn)嘗試?yán)肧VF提取簡(jiǎn)便的優(yōu)勢(shì)，省卻了體外擴(kuò)增的步驟，能縮短治療時(shí)間；同時(shí)構(gòu)建SVF-脂肪-PLGA復(fù)合充填材料，有效提高了移植脂肪的存活率，改善了單純SVF-PLGA移植在手術(shù)后初期充填局部僵硬、手感差、遠(yuǎn)期存活率低等缺點(diǎn)，為臨床應(yīng)用提供了理論和實(shí)踐依據(jù)。

[1]虞瑞堯.軟組織充填劑在美容皮膚科的應(yīng)用[J].中國(guó)美容醫(yī)學(xué), 2003,12(5):473-475.

[2]張華輝,程健.注射性軟組織填充劑的分類和評(píng)價(jià)[J].國(guó)外醫(yī)學(xué)皮膚性病學(xué)分冊(cè),2005,31(1):12-14.

[3]王瑩,張明利,邢新,等.無(wú)細(xì)胞真皮基質(zhì)與軟組織充填[J].實(shí)用美容整形外科雜志,2002,13(2):109-111.

[4]湯丁潔,張嬌,李德保,等.人發(fā)制備軟組織充填材料微觀結(jié)構(gòu)及皮內(nèi)充填效果觀察[J].中國(guó)美容整形外科雜志,2008,19(2):144-146.

[5]李濤,呂志前.生物可降解支架研究進(jìn)展[J].解剖科學(xué)進(jìn)展,2008, 14(4):436-440.

[6]李春明,劉毅.脂肪干細(xì)胞及其在脂肪組織工程中的應(yīng)用[J].中國(guó)美容醫(yī)學(xué),2006,15(4):466-468.

[7]Yoshimura K,Suga H,Eto H.Adipose-derived stem/progenitor cells:roles in adipose tissue remodeling and potential use for soft tissue augmentation[J].Regen Med,2009,4(2):265-273.

[8]原博,陸樹(shù)良.細(xì)胞外基質(zhì)對(duì)前脂肪細(xì)胞分化轉(zhuǎn)歸的影響[J].創(chuàng)傷外科雜志,2007,9(6):569-571.

[9]Matsumoto D,Sato K,Takaki Y,et al.Cell-assissted lipotransfer: supportive use of human adipose-derived cells for soft tissue augmentation with lipotransfer[J].Issure Eng,2006,12(12):3375-3382.

[10]Choi YS,Cha SM,Lee YY,et al.Adipogenic differenation of adipose tissue derived adult stem cells in nude mouse[J].Biochem Biophys Res Commun,2006,345(2):631-637.

[11]Tang YL,Zhao Q,Qin X,et a1.Paracrine action enhances theefects of autologous mesenchymal stem cell transplantation on vascular regeneration in rat model of myocardial infarction[J].Ann Thorac Surg,2005,80(1):229-236.

[12]麥凱欣,朱輝.陰莖增粗術(shù)的研究進(jìn)展[J].中國(guó)美容整形外科雜志,2009,20(9):558-561.

[13]Vardi Y.Is penile enlargement an ethical procedure for patients with a normal-sized penis[J]?Eur Urol,2006,49(4):729-733.

[14]Alter GJ,Jordan GH.Penile elongation and girth enhancement[J]. AUA Update Series,2007,26:229-237.

[15]Spyropoulos E,Christoforidis C,Borousas D,et al.Augmentation phalloplasty surgery for penile dysmorphophobia in young adults: considerations regarding patient selection,outcome evaluation and techniques applied[J].Eur Urol,2005,48:121-128.

[16]Sawhney CP,Banerjee TN,Chakravarti RN.Behaviour ofdermal fat transplants[J].Br J Plast Surg,1969,22:169-176.

[17]Shaeer O,Shaeer K.Penile girth augmentation using flaps.Shaeer's augmentation phalloplasty:a case report[J].J Sex Med,2006,3: 164-169.

[18]王松山,龍道疇,郭琴,等.帶蒂陰股溝真皮脂肪瓣轉(zhuǎn)移陰莖加粗術(shù)[J].中國(guó)美容整形外科雜志,2008,19(3):186-188.

[19]謝軍,劉繼紅,樊龍昌,等.陰莖體白膜兩側(cè)睪丸鞘膜移植陰莖增粗術(shù)實(shí)驗(yàn)研究[J].中華男科學(xué)雜志,2006,12(12):1091-1094.

[20]Austoni E,Guarneri A,Cazzaniga A.A new technique for augmentation phalloplasty:albugineal surgery with bilateral saphenous grafts three years of experience[J].Eur Urol,2002,42:245-253.

[21]楊斌,張金明,陳小萱,等.陰莖海綿體增粗并延長(zhǎng)同期整復(fù)術(shù)[J].中華醫(yī)學(xué)美學(xué)美容雜志,2003,9(2):84-86.

[22]Perovic SV,Byun JS,Scheplev P,et al.New perspectives of penile enhancement surgery:tissue engineering with biodegradable scaffolds [J].Eur Urol,2006,49:139-147.

[23]李慧,朱輝.陰莖海綿體組織工程的研究進(jìn)展[J].國(guó)際生物醫(yī)學(xué)工程雜志,2008,31(2):102-106.

[24]吳意光,金哲,鞏艷青,等.PLGA生物細(xì)胞支架種植自體成纖維細(xì)胞對(duì)陰莖增粗的安全性有效性研究[J].中國(guó)男科學(xué)雜志,2008, 22(9):5-9.

Preliminary Study of Co-Transplantation of SVF-PLGA with Fat Complex on the Construction of Tissue Engineering Implant

MAI Kaixin,ZHU Hui,CUI Yongyan.Department of Plastic Surgery,Peking University Shenzhen Hospital,Shenzhen 518036,China.Corresponding author:ZHU Hui.

ObjectiveTo evaluate the feasibility and safety of co-transplantation of SVF-PLGA with fat complex on the construction of tissue engineered implant.MethodsForty adult New Zealand male rabbits were randomly divided into four groups.In the experimental group A(n=10),implant was constructed by use of SVF-PLGA with fat complex and in the group B (n=10).SVF-PLGA complex buried by adipose tissue was used.In the control group C(n=10)only PLGA and group D(n=10), SVF-PLGA complex was used.All the complex were translated between skin and superficial fascia.Tissue samples obtained were analyzed with gross observation,HE stain and red oil stain at 4 months postoperatively.ResultsThe tissue engineered implant was mainly vascularized adipose tissue without tumor cell.PLGA scaffolds were degraded completely 4 months later. The survival rate of fat in experimental group B was higher than in the group A and in the control group B.Conclusion SVF-PLGA with fat complex on soft tissue with the advantage of high survival rate of fat.

Transplantation;Soft tissue;Implant;Tissue engineer;Scaffold;Fat

Q813.1+2

A

1673－0364（2010）01－0009－05

2009年11月22日；

2010年1月24日)

10.3969/j.issn.1673-0364.2010.01.003

518036廣東省深圳市北京大學(xué)深圳醫(yī)院整形美容外科（麥凱欣，朱輝，崔永言）；515031廣東省汕頭市汕頭大學(xué)醫(yī)學(xué)院（麥凱欣）。

朱輝。