朱玉梅

早期梅毒的TRUST和TPPA檢測對比臨床探討

朱玉梅

目的 應(yīng)用兩種不同的血清學(xué)檢測方法測定血清梅毒抗體，比較其檢測方法的特性。方法 對200例臨床確診的患者同時進行甲苯胺紅不加熱血清試驗(TRUST)和梅毒螺旋體明膠顆粒凝集試驗(TPPA)兩種方法進行檢測，分析和比較兩種方法的敏感性。結(jié)果 200例樣本中，186例為TPPA陽性，陽性率為93.1%；144例為TRUST陽性，陽性率為72.0%。結(jié)論 在梅毒診斷中，TPPA的敏感性高于TRUST。

梅毒；TPPA；TRUST；敏感性

梅毒螺旋體感染俗稱梅毒，是由蒼白密螺旋體(treponema pallidum)即梅毒螺旋體(treponema pallidum TP)所引起的一種慢性、系統(tǒng)性的傳播性疾病，是我國三大性傳播疾病之一[1]。當(dāng)人體感染梅毒后，螺旋體很快散播全身，可侵犯機體各組織與器官，臨床表現(xiàn)多樣，病程較長，且時隱時顯。近年來我國梅毒的發(fā)病率有逐年增加的趨勢、研究新的快速、價廉、簡便、敏感且特異的診斷方法是當(dāng)前主要研究熱點。

目前梅毒的實驗室篩查診斷方法有兩類：一類是非梅毒螺旋體抗原血清試驗(如VDRL、RPR、USR、TRUST)，這些試驗具有相同的標(biāo)準(zhǔn)化抗原(心磷脂、卵磷脂和膽固醇)，所以敏感性相同；另一類采用梅毒螺旋體抗原血清試驗(如TPHA、TPPA、FTAABS、TPELISA)，其特異性、靈敏度各異。免疫印跡法可作為確證試驗，但成本較高、操作復(fù)雜，尚不適用于臨床篩查[2]。本文采用TRUST、TPPA同時檢測200例標(biāo)本，現(xiàn)報道如下。

1 材料和方法

1.1 標(biāo)本來源 標(biāo)本來源于2008年1月～2009年7月間本院性病門診確診梅毒患者200例，年齡19～52歲，男性107例，女性93例，采用真空采血管一次性抽取靜脈血約3mL，靜置待凝，分離血清，-20℃冰箱內(nèi)保存?zhèn)溆谩?/p>

1.2 試劑和儀器 甲苯胺紅不加熱血清試驗(TRUST)試劑盒(上海榮盛生物技術(shù)有限公司提供)；梅毒螺旋體明膠顆粒凝集試驗(TPPA)試劑盒(日本富士瑞必歐公司提供)；加樣器(上海求精生化試劑儀器有限公司提供)。

1.3 方法 清晨空腹采集靜脈血3mL，所有標(biāo)本同時進行TRUST和TPPA檢測。兩項試驗均為陽性者為梅毒血清學(xué)陽性，TRUST定性試驗陽性者加檢TRUST血清滴度(血清作1∶2、1∶4、1∶8、1∶16、1∶32、1∶64稀釋)。按試劑盒說明書操作。

1.4 統(tǒng)計學(xué)處理 采用SPSS軟件檢驗各組間差異。

2 結(jié)果

200例血清均用TRUST和TPPA兩種方法檢測，結(jié)果見表1。

在144例TRUST陽性血清中做TPPA試驗，發(fā)現(xiàn)有10例陰性，均可見TRUST對梅毒診斷特異性為93%與文獻(xiàn)[3]中描述基本相符。

以TPPA為標(biāo)準(zhǔn)TRUST的特異性為82.4%和敏感度93.5%。見表2。

3 討論

梅毒螺旋體(TP)又稱蒼白密螺旋體，人體是其惟一宿主，主要是以性傳播為主，人體在感染蒼白螺旋體后可產(chǎn)生兩種抗體：一種是針對病原體表面物質(zhì)產(chǎn)生的特異性抗體IgG和IgM；另一種則是梅毒螺旋體在破壞人體組織時釋放的類脂類抗原性物質(zhì)刺激機體產(chǎn)生具有抗體性質(zhì)的反應(yīng)素。

中華人民共和國《國家標(biāo)準(zhǔn)梅毒診斷標(biāo)準(zhǔn)及處理原則》指出，梅毒診斷必須根據(jù)病史、臨床癥狀、體檢及實驗室檢查等進行綜合分析，慎重做出診斷。梅毒血清試驗是梅毒臨床診斷中重要的依據(jù)之一，但決不能認(rèn)為是可以替代一切的惟一的依據(jù)，因為任何一種試驗都不能做到100%的準(zhǔn)確，都會出現(xiàn)一些假陽性結(jié)果。所以，對其判斷應(yīng)該慎之又慎[5-6]。

梅毒的實驗室診斷在梅毒的診斷中有非常重要的意義，是診斷梅毒的重要依據(jù)。當(dāng)人體感染梅毒螺旋體后4～10周，血清中可產(chǎn)生抗梅毒螺旋體抗原的特異性抗體(主要是IgG、IgM)和一定數(shù)量的抗類脂質(zhì)抗原的非特異性反應(yīng)素抗體(主要是IgM和IgG)。梅毒的實驗室診斷就是運用各種免疫學(xué)及生物化學(xué)的方法來檢測此兩種抗體。這種診斷梅毒的方法已成為梅毒臨床診斷不可缺少的步驟。由于梅毒病理和臨床經(jīng)過的復(fù)雜性，以及病期長和時隱時現(xiàn)的特點，臨床上還存在生物學(xué)假陽性的情況，故將臨床血清試驗分為兩大類：一類為非梅毒螺旋體抗原血清試驗，常用性病研究實驗室試驗(VDRL)、不加熱血清反應(yīng)素試驗(USR)、血漿反應(yīng)素環(huán)狀卡片試驗(RPR、TRUST)，主要應(yīng)用于初篩試驗和療效觀察；另一類為梅毒螺旋體抗原血清試驗，常用有梅毒螺旋體血球凝集試驗(TPHA)、梅毒螺旋體明膠顆粒凝集試驗(TPPA)、熒光梅毒螺旋體抗體吸收試驗(FTA-ABS)、19sIgM梅毒螺旋體血球凝集試驗(19sIgM．TPHA)試驗，主要應(yīng)用于確證試驗，對療效觀察意義不大。

梅毒螺旋體明膠顆粒凝集試驗(TPPA)是針對梅毒特異性抗體的檢測。人體一旦感染梅毒螺旋體后，該抗體檢測終身為陽性。它采用雙抗體夾心法，具有很高的特異性和敏感度，且重復(fù)性好。TPPA具有快速、簡便、敏感和特異等特點。只要有血清通常用作1∶80以上稀釋微量的抗體就可使致敏明膠顆粒發(fā)生凝聚作用。試劑盒內(nèi)的血清吸收劑可消除試驗中的生物學(xué)假陽性反應(yīng)，提高實驗的特異性。本實驗通過對200例血清均用TRUST和TPPA兩種方法檢測，對比檢驗結(jié)果發(fā)現(xiàn)TRUST陽性率為72%，而TPPA實驗陽性率為93%。實驗結(jié)果表明TPPA實驗陽性檢測率較高，結(jié)合臨床資料200名患者臨床確診為早期梅毒，也與對梅毒診斷特異性為93.1%與文獻(xiàn)[3]中描述基本相符。

表1 TRUST和TPPA兩種方法檢測200例血清結(jié)果比較

表2 以TPPA為標(biāo)準(zhǔn)TRUST的特異性和敏感度

甲苯胺紅不加熱血清試驗(TRUST)則主要是測定血清中的心磷脂抗體。梅毒螺旋體內(nèi)部具有類脂質(zhì)抗原，在螺旋體屬中各群之間或同螺旋體以外均可出現(xiàn)交叉反應(yīng)，而且采用肉眼觀測，其漏檢率較高，故特異性、敏感度較低，但其價格低廉、操作簡便。本研究以TPPA為標(biāo)準(zhǔn)TRUST的特異性為82.4%和敏感度93.5%說明以TPPA實驗在特異性和敏感度等指標(biāo)均優(yōu)于TRUST實驗。

雖然TPPA具有更高的敏感性和特異性，但TRUST實驗具有快速簡便的特性，這兩種試驗都可用于梅毒的篩查和治療效果的檢測。試驗的優(yōu)點：方法簡易、快速、敏感性和特異性好。適用于大量人群的血清篩查。早期梅毒硬下疳出現(xiàn)一二周后可呈陽性，經(jīng)治療后血清滴度可下降并轉(zhuǎn)陰性，故可作為療效觀察、判愈、復(fù)發(fā)或再感染的指征。

TRUST滴度與疾病損害程度呈正相關(guān)，是疾病急性期出現(xiàn)較早的抗體，而本文所討論的TPPA是檢測IgG抗體，故當(dāng)急性期疾病未治愈或愈后患者都可能出現(xiàn)陽性。TRUST試驗在抗體含量過高時可出現(xiàn)前帶現(xiàn)象，生物學(xué)假陽性反應(yīng)可出現(xiàn)于孕婦、患上呼吸道感染、肺炎、活動性肺結(jié)核、風(fēng)濕性心臟病、亞急性細(xì)菌性心內(nèi)膜炎、傳染性肝炎、肝硬化、慢性腎炎、鉤端螺旋體病、麻風(fēng)、瘧疾、猩紅熱、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、系統(tǒng)性紅斑狼瘡及海洛因成癮等疾病，常導(dǎo)致過激治療。因此對疾病的診斷特異性要與TPPA診斷結(jié)合在一起。

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10.3969/j.issn.1009-4393.2010.20.073

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