郭 塹

(廣西醫(yī)科大學(xué)第四附屬醫(yī)院感染科,廣西柳州,545005)

乙型肝炎病毒(HBV)感染有很高的慢性化趨勢(shì),而肝纖維化是慢性肝病向肝硬化發(fā)展的必經(jīng)階段[1]。但是早期肝臟慢性損傷過(guò)程中細(xì)胞外基質(zhì)積累所形成的肝纖維化是可以逆轉(zhuǎn)的,而肝硬化時(shí)難以逆轉(zhuǎn)[2]。所以篩選有效的藥物阻斷或減輕肝纖維化的發(fā)生,一直是慢性肝病研究的重要課題。免疫系統(tǒng)在乙型肝炎的發(fā)病和病程中起到關(guān)鍵的作用,免疫應(yīng)答失衡是慢性乙型肝炎的重要發(fā)病機(jī)制之一。Th1/Th2的平衡在HBV感染人體后病情發(fā)展中起決定作用。而白細(xì)胞介素-4(IL-4)和干擾素-γ(IFN-γ)是維持Th1/Th2細(xì)胞比例的關(guān)鍵分子。因此研究HBV感染時(shí) Th1/Th2狀態(tài)對(duì)認(rèn)識(shí)乙型肝炎發(fā)病、發(fā)展、預(yù)后和觀察治療效果均有積極意義。本研究采用放射免疫法(RIA)檢測(cè)患者外周血中肝纖維化指標(biāo):血清玻璃酸酶(Hyaluronic acid,HA)、Ⅳ型膠原(TypeⅣcollagen,ⅣC)、Ⅲ型前膠原肽(Type Ⅲ procollagen,PCIII)、層 粘連 蛋白(Laminin,LN)的水平;采用雙抗體夾心酶免疫吸附試驗(yàn)(DAS.ELISA)測(cè)定,觀察阿德福韋酯治療30例慢性乙型肝炎患者對(duì)外周血清Th1/Th2型細(xì)胞因子的影響。進(jìn)一步探討 Th1/Th2型細(xì)胞因子水平對(duì)肝纖維化指標(biāo)的影響及其相關(guān)性,總結(jié)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取我院2006年6月～2008年9月收治的慢性乙型肝炎患者60例,其中,男38例,女22例;年齡24～66歲,平均32.3歲。所有患者均符合2000年全國(guó)病毒性肝炎會(huì)議修訂的慢性乙型肝炎診斷標(biāo)準(zhǔn)[3]。入選標(biāo)準(zhǔn):HBSAg,HBeAg及抗HBc均陽(yáng)性;HBV-DNA≥105 copica/ml;腎功能正常;排除合并甲型、丙型或戊型肝炎病毒感染;排除合并HIV感染及PTA≤20%,TBIL≥50 μ mol/L的患者。將60例患者隨機(jī)分為治療組和對(duì)照組,各30例。兩組患者在年齡、性別、病程、肝功能及病毒指標(biāo)方面差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05),具有可比性。

1.2 研究方法

1.2.1 治療方法:治療組給予阿德福韋酯(天津藥物研究院藥業(yè)有限公司)10 mg/次/d,連續(xù)48周;對(duì)照組采用常規(guī)治療方法(甘草酸二銨、降酶靈等)。治療組與對(duì)照組均給予扶正化瘀膠囊(3粒/次/d,連續(xù)48周)抗纖維化治療。

1.2.2 觀察指標(biāo):所有患者治療前常規(guī)檢查血、尿、大便常規(guī),B型超聲檢查。用ELISA法檢查肝功能,乙肝血清學(xué)指標(biāo),PCR法查HBV-DNA。治療組共30例,患者應(yīng)用阿德福韋酯治療48周后與對(duì)照組患者30例比較,分別用放射免疫法(RIA)檢測(cè)肝纖維化指標(biāo):血清玻璃酸酶(Hyaluronic acid,HA)、Ⅳ型膠原(TypeⅣ collagen,ⅣC)、Ⅲ型前膠原肽(TypeⅢ procollagen,PCIII)、層粘連蛋白(Laminin,LN);采用 DAS ELISA法檢測(cè)患者血清中細(xì)胞因子IFN-γ、IL-4水平。具體操作嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)進(jìn)行。治療后每2周復(fù)查1次肝功能,治療前后復(fù)查1次B超及肝纖維化指標(biāo),每12周查HBV-DNA定量1次。

1.2.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法:采用SPSS 11.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析,計(jì)量資料比較采用t檢驗(yàn),計(jì)數(shù)資料比較用χ2檢驗(yàn)。

2 結(jié) 果

2.1 治療前、后肝纖維化指標(biāo)檢測(cè)

由表1、表2可知,治療組與對(duì)照組治療前各項(xiàng)血清肝纖維化指標(biāo)差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05),治療后各項(xiàng)血清肝纖維化指標(biāo)差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。

表1 治療前2組血清HA、LN、PCⅢ、ⅣC測(cè)定結(jié)果( ±s)

表1 治療前2組血清HA、LN、PCⅢ、ⅣC測(cè)定結(jié)果( ±s)

組別 例數(shù) HA(ng/mL)LN(μ g/L)PCⅢ(μ g/L)ⅣC(μ g/L)治療組 30 268.3±101.4 162.8±67.2 171.3±78.2 139.1±58.2對(duì)照組 30 266.5±110.5 159.2±65.1 172.6±77.5 137.6±56.5

表2 治療后2組血清HA、LN、PCⅢ、ⅣC測(cè)定結(jié)果( ±s)

表2 治療后2組血清HA、LN、PCⅢ、ⅣC測(cè)定結(jié)果( ±s)

＊＊PP<0.01

組別 例數(shù) HA(ng/mL)LN(μ g/L)PCⅢ(μ g/L)ⅣC(μ g/L)治療組 30 98.4±33.4 87.5±38.6 97.1±34.9 84.1±31.6對(duì)照組 30 226.2±74.3＊＊ 137.2±49.4＊＊ 151.6±40.7＊＊ 123.5±46.4＊＊

2.2 治療前、后血清中細(xì)胞因子IFN-γ、IL-4水平檢測(cè)

由表3可知,治療組與對(duì)照組治療前血清中細(xì)胞因子IFN-γ、IL-4水平差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05),治療后IFN-γ、IL-4水平差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。

表3 2組治療前后血清中細(xì)胞因子IFN-γ、IL-4水平( ±s)

表3 2組治療前后血清中細(xì)胞因子IFN-γ、IL-4水平( ±s)

治療后兩組比較,＊＊P<0.01

組別 例數(shù) IFN-γ(pg/mL)IL-4(pg/mL)治療組 30 治療前 166.2±19.4 56.5±12.6治療后 247.3±23.2 37.7±11.9對(duì)照組 30 治療前 160.3±21.1 58.9±13.4治療后 170.8±17.4＊＊ 53.2±12.5＊＊

3 討 論

肝纖維化是慢性肝炎發(fā)展為肝硬化的主要病理基礎(chǔ)。肝組織活檢仍是目前主要診斷手段,但難以重復(fù),且有一定的局限性。國(guó)內(nèi)外不少研究已證明,在慢性肝病患者血清中檢測(cè)HA、PCIII、ⅣC、LN能可靠地反應(yīng)肝纖維化的程度和活動(dòng)度,是目前觀察抗纖維化藥物較為公認(rèn)的血清學(xué)指標(biāo)。由于這4項(xiàng)指標(biāo)的機(jī)制不同,故聯(lián)合檢測(cè)觀察對(duì)肝纖維化診斷具有較大意義。一般認(rèn)為,HBV感染人體后引起的肝臟和其它臟器病變,以及疾病的發(fā)生發(fā)展,并非病毒本身所致,而與人體的免疫狀態(tài)有關(guān)。乙型肝炎病毒感染人體后,Th1/Th2比例是否平衡是機(jī)體能否有效清除病毒和病毒感染細(xì)胞的主要因素。在乙肝病毒感染的過(guò)程中如果Th1細(xì)胞亞群占優(yōu)勢(shì),將促進(jìn)細(xì)胞免疫反應(yīng),有利于清除細(xì)胞內(nèi)病毒,同時(shí)加重肝細(xì)胞的損傷;如果Th2細(xì)胞亞群占優(yōu)勢(shì),將促進(jìn)體液免疫反應(yīng),抑制細(xì)胞免疫,肝細(xì)胞損傷減輕,感染慢性化[4]。慢性乙型肝炎患者體內(nèi)存在Th1/Th2細(xì)胞因子失衡可能是導(dǎo)致其慢性化的原因之一[5]。

本研究通過(guò)檢測(cè)治療前后 2組血清HA、PCIII、IVC及LN的水平變化可以看出,治療前2組血清肝纖維化指標(biāo)差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。經(jīng)過(guò)48周阿德福韋酯治療后,治療組血清HA、PCIII、IVC及 LN指標(biāo)與對(duì)照組治療后比較,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。說(shuō)明阿德福韋酯具有抗纖維化的作用。在本研究中,慢性乙型肝炎患者血清中Th1型細(xì)胞因子IFN-γ水平普遍較低,提示患者細(xì)胞免疫功能低下,不能有效清除體內(nèi)的HBV,使HBV持續(xù)感染形成慢性化。通過(guò)檢測(cè)2組治療前后血清中IFN-γ、IL-4水平變化可以看出,治療組與對(duì)照組治療前血清中細(xì)胞因子IFN-γ、IL-4水平差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05),治療后IFN-γ、IL-4水平差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。

IFN-γ、IL-4等細(xì)胞因子水平在阿德福韋酯療程中的變化及其與肝纖維化的關(guān)系提示他們可以作為阿德福韋酯治療療效預(yù)測(cè)指標(biāo)和療效評(píng)價(jià)指標(biāo),從而了解機(jī)體抗HBV免疫功能恢復(fù)情況,在免疫學(xué)指標(biāo)方面對(duì)阿德福韋酯療效做出預(yù)測(cè)并評(píng)價(jià)治療效果。這將有利于加深對(duì)慢性乙型肝炎的認(rèn)識(shí),對(duì)臨床治療有一定的指導(dǎo)作用。

[1]王健,江水清,項(xiàng)水清,等.慢性乙肝患者HBVX-DNA表達(dá)與M11-2R相關(guān)性[J].中國(guó)公共衛(wèi)生,2006,22(10):118.

[2]李素珍,尚佳,鄧予暉.肝硬化及血小板活化指標(biāo)檢測(cè)分析[J].中國(guó)公共衛(wèi)生,2006,22(8):949.

[3]中華醫(yī)學(xué)會(huì)病毒性肝炎防治組.慢性乙型肝炎防治指南[J].中華傳染病雜志,2005,23(1):425.

[4]Minoru Ayada,Tetsuya Ishikawa,Akihiko Okumura,et al.Alteration of serum cytokine balances among different phases of chronic hepatitis B virus infection[J].Hepatology Research,2006,34(4):214.

[5]Yong Xie,Hong-Xiang Sun,Duo Li.Platycodin D is a potent adjuvant of specific cellular and humoral immune responses against recombinant hepatitis B antigen[J].Vaccine,2009,27(5):757.