郭留城

（漯河醫(yī)學高等專科學校，河南漯河 462002）

女貞子是我國傳統(tǒng)的扶正固本藥物，早在《神農本草經》中就有記載。女貞子多糖是女貞子具有多重功效的物質基礎之一，現(xiàn)代藥理研究表明多糖具有抗氧化、抗衰老、增強免疫等功效。利用溶劑法進行女貞子多糖的提取分離已有文獻報道[1]，但存在提取時間長，效率低、溶劑用量大等缺點，而超聲波提取具有設備簡單、提取方便、效率高、節(jié)能環(huán)保等優(yōu)點，已經廣泛應用于中草藥有效成分的提取[2]。本文利用超聲波對女貞子進行有效成分提取，用分光光度法測定多糖的含量，并對提取條件進行了正交試驗的研究。

1 儀器與試藥

KQ5OODE型醫(yī)用超聲波 (昆山市超聲儀器有限公司)；752型紫外可見分光光度計（上海精密科學儀器有限公司）；RE3000型旋轉蒸發(fā)器（上海亞榮生化儀器廠）；DZF-6020型真空干燥箱 （上?；|試驗儀器有限公司）；LDZ4-0.8型醫(yī)用離心機(北京醫(yī)用離心機廠)；女貞子(藥用，購于漯河市廣惠和醫(yī)藥有限公司)，其他試劑均為國產分析純。

2 方法與結果

2.1 多糖含量測定

采用硫酸-蒽酮法[3]測定所提取的女貞子多糖中多糖含量，經驗證葡聚糖的線性范圍為0.5～90.0 mg/L。然后根據(jù)所用女貞子的質量（2 g）計算出女貞子中多糖得率。

2.2 回收率試驗

精密量取上述已知含量的女貞子提取液，準確加入葡聚糖對照品1.00 mg，后按樣品含量測定方法進行測定，得到葡聚糖的回收率為97.9%。

2.3 提取工藝流程及方法

女貞子 (40目)→稱量→加雙蒸水調配→超聲提取多糖→離心除去雜質→濃縮→乙醇沉淀→干燥→粗多糖。

2.4 超聲波樣品提取液的制備

2.4.1 工藝設計 利用四因素三水平正交設計L9(34)正交實驗，選取超聲功率(A)、溶媒用量 (B)、提取時間(C)和提取次數(shù)(D)四因素，以多糖含量為測定指標。設計試驗因素和水平見表1。

表1 正交試驗設計

2.4.2 制備工藝 取女貞子2.0 g，精密稱定9份，分別按正交實驗法進行實驗，用雙蒸水浸泡30 min后，超聲提取，合并提取液，離心除雜，濃縮，醇沉，濾過，真空干燥，得到1～9號超聲樣品。

2.5 樣品含量測定

將超聲波提取液按“2.1”項下含量測定法進行測定。結果見表2。

2.6 驗證實驗

取女貞子2.0 g，精密稱定6份，分別用溶劑提取法和優(yōu)化后的超聲提取法，提取女貞子中的多糖。結果見表3。

3 討論

由表2可知，超聲波的功率和溶媒的用量是影響超聲提取的主要因素，而超聲提取時間和超聲提取次數(shù)的影響較小。方案最佳：A2B2C2D1，即在功率80%條件下，用5倍的溶媒，超聲25 min，提取1次為最佳工藝條件。

表2 正交試驗結果

表3 不同提取方法提取結果

由表3可知，采用優(yōu)化后的超聲提取法提取女貞子中的多糖與傳統(tǒng)的溶劑提取法比較，提取效率提高了約1.4倍，耗時短，且實驗方法簡單易行，操作穩(wěn)定性好。

女貞子主要含有多糖、萜類、黃酮等化合物。女貞子多糖的成分為鼠李糖、阿拉伯糖、葡萄糖及巖藻糖等[4]。由于雙蒸水能廣泛地溶解多糖，故本試驗以雙蒸水為溶媒，采用超聲提取和溶劑提取兩種方法，通過對多糖提取含量的比較得出，超聲提取多糖含量明顯高于溶劑提取法，這可能是聲波破壞了女貞子細胞結構的緣故，而且超聲提取法操作簡易，無污染，成本低，是一種理想的多糖提取方法。

目前報道的測定中草藥中多糖含量的方法中，苯酚-濃硫酸法和蒽酮-濃硫酸兩種方法應用最廣[5]，用其測定女貞子多糖含量的方法亦有報道[1]。苯酚-濃硫酸比色法的顯色不穩(wěn)定，測定誤差較大；而蒽酮-濃硫酸比色法的顯色穩(wěn)定，線性關系比較好。因此，蒽酮-濃硫酸比色法為檢測女貞子多糖的一種理想方法[6]。

[1]邱榮麗,李璘.女貞子多糖的提取工藝[J].中成藥,2008,30(4):612-614.

[2]董嘉德.超聲波在中藥提取中的應用[J].中國藥業(yè),2002,11(11):55.

[3]李淑梅,揚帆,湯波,等.太行山黃芪多糖的提取工藝[J].光譜實驗室,2008,25(3):335-337.

[4]張振明,葛斌,許愛霞,等.女貞子多糖的抗衰老作用[J].中國藥理學與毒理學雜志,2006,20(2):108.

[5]黃瑞松.中草藥多糖含量測定方法概述[J].中國藥師,2005,8(1):68.

[6]楊莉,王志華,陶健生.黃芪中黃芪多糖含量測定方法的比較[J].中國醫(yī)藥工業(yè)雜志,2005,36(9):562-563.