劉淑華 于穎新 袁 紅 (杭州市余杭區(qū)第三人民醫(yī)院 35; 寧波市天一職業(yè)技術學校)
為了更好地預防和治療假絲酵母菌病,我們對杭州郊區(qū)農村地區(qū)305例陰道假絲酵母菌病患者的陰道分泌物進行培養(yǎng)鑒定和抗真菌藥物敏感性試驗,現報道如下:
1.1 標本來源 選取2005年1月至2007年12月來我院婦產科就診的農村地區(qū)可疑陰道假絲酵母菌病非妊娠婦女共620例。取無菌棉拭子經陰道窺器取后穹隆分泌物,置無菌管中,立即送檢。
1.2 培養(yǎng)基 沙保弱培養(yǎng)基(杭州天和微生物有限公司)及假絲酵母菌顯色培養(yǎng)基(科瑪嘉,鄭州博賽科技有限公司)。
1.3 抗真菌藥物 兩性霉素B、制霉菌素、氟康唑、酮康唑、伊曲康唑5種藥敏紙片(Rosco公司)。
1.4 質控菌株 白假絲酵母菌(ATCC 64548)。
1.5 方法
1.5.1 培養(yǎng)鑒定 接種于改良沙保弱培養(yǎng)基及科瑪嘉假絲酵母菌顯色培養(yǎng)基,置35℃ 48h進行初篩,如不顯色,純化后用Vitek60全自動微生物鑒定儀(法國生物梅里埃公司)YBC卡鑒定。
1.5.2 藥敏試驗 為Rosco NEO-SENSITAB酵母菌紙片擴散法藥敏試驗,采用Rosco公司的兩性霉素B、制霉菌素、氟康唑、酮康唑、伊曲康唑5種藥敏紙片和改良Shadomy瓊脂平板。①檢測方法:挑取新鮮具有活力的純化酵母菌落于無菌0.9%氯化鈉注射液(生理鹽水),調整至5×103cfu/ml(配制成0.5麥氏濁度后再以生理鹽水1∶1稀釋,克柔假絲酵母菌則1∶10稀釋)。將菌液均勻涂布至平板表面,35℃干燥15min后, 貼上藥敏紙片,置35℃ 18~24h,判讀結果。②判讀標準:兩性霉素B、伊曲康唑抑菌圈直徑≥15mm為敏感,10~14mm為中介,<10mm為耐藥;酮康唑、氟康唑抑菌圈直徑≥20mm為敏感,12~19mm為中介,≤11mm為耐藥;制霉菌素抑菌圈直徑≥15mm為敏感,10~14mm為中介,無抑菌圈為耐藥。
2.1 標本分離情況 從620份標本中分離出305株假絲酵母菌,以白色假絲酵母菌為主,2005-2007年構成比始終在50%以上,但有逐年下降趨勢;而非白色假絲酵母菌則有上升趨勢(表1)。
2.2 對常用抗真菌藥物的耐藥情況(表2)不同假絲酵母菌耐藥情況不同,其中白色假絲酵母菌、熱帶假絲酵母菌對兩性霉素B、制霉菌素較敏感。
由于廣譜抗生素和免疫抑制藥的應用、器官移植、免疫缺陷,以及不良生活習慣患者增多等原因,真菌感染逐漸增多。假絲酵母菌尤其是白色假絲酵母菌是人體最常見的共生菌。外陰陰道假絲酵母菌病,也稱外陰陰道念珠菌病,是婦女常見的一種傳染性疾病,可以引起白帶異常增多和瘙癢等癥狀[1],臨床治愈率低,易復發(fā)。近年來,由于大量廣譜抗菌藥物、激素的濫用,以及免疫抑制藥的使用,導致機體菌群失調時容易發(fā)病。白色假絲酵母菌是假絲酵母菌性陰道炎最常見的病原菌,占80%~90%[2]。本研究結果顯示,杭州市郊區(qū)婦女陰道假絲酵母菌病的病原體仍以白假絲酵母菌為主,但是白色假絲酵母菌構成比有下降的趨勢,而其他假絲酵母菌感染率有上升趨勢,與文獻[3-4]報道一致。但在非白假絲酵母菌的菌種構成上存在一定差異,這可能與不同地域、人群構成以及時段等因素有關。杭州市郊區(qū)農民生活條件較好,對生殖健康較重視,但由于衛(wèi)生知識有限,不良的生活習慣等導致易感。頻繁的陰道沖洗導致陰道酸堿度改變,氣候潮濕致使內衣未完全晾干,局部濕度增加,改變了陰道內病原體相互之間的制約關系,局部免疫力下降,假絲酵母菌易于繁殖引起感染。
表1 2005-2007年各年度分離出假絲酵母菌屬的情況 [株(%)]
表2 5種假絲酵母菌對5種抗真菌藥物的耐藥情況 [株(%)]
本觀察結果還顯示,白色假絲酵母菌對兩性霉素B和制霉菌素比較敏感,有個別菌株產生耐藥性,與孔慶玲等[4]研究結果相似;而對酮康唑和伊曲康唑產生了較大的耐藥性。本次熱帶假絲酵母菌對酮康唑耐藥率為31.6%,與孔慶玲報道的67.4%[4]有較大差異,可能與不同地區(qū)用藥習慣不同有關。兩性霉素毒副作用大,臨床用量少,而酮康唑和伊曲康唑由于長期反復、大劑量應用,造成了假絲酵母菌產生耐藥性。
綜上,筆者認為臨床醫(yī)生應該重視對假絲酵母菌的培養(yǎng)和藥敏試驗,及時采取針對性強的藥物進行有效的治療。
[1]崔吉蘇.238例假絲酵母菌性外陰陰道炎臨床分析[J].新醫(yī)學學刊, 2008, 5 (5):733-734.
[2]趙勇.也談白帶標本中假絲酵母菌帶菌狀態(tài)與致病狀態(tài)的形態(tài)差別[J]. 臨床檢驗雜志, 2002, 20(2): 95.
[3]沈云華.206株假絲酵母菌的臨床分布及藥物敏感試驗[J].抗感染藥學, 2008, 5 (1): 45-48.
[4]孔慶玲, 高潔, 蘇兆花,等.238株假絲酵母菌分離鑒定及耐藥性分析[J].醫(yī)學檢驗與臨床. 2008,19(1): 42-43.