(山東大學附屬省立醫(yī)院，濟南 250021)

風寒感冒片由十一味中藥材組成，具有辛溫解表和宣肺止咳之功效，對風寒感冒引起的頭痛、畏寒、發(fā)熱、流涕和咳嗽等具有良好的療效。方中君藥麻黃具有發(fā)汗散寒、宣肺平喘和利尿消腫等功能，其主要有效成分為麻黃堿和偽麻黃堿。2008年 1月 ～ 2009年 1月，本文建立了用高效液相色譜測定風寒感冒片中鹽酸麻黃堿含量的方法，用于控制風寒感冒片的質量。

儀器和藥物:高效液相色譜儀、LC2002色譜工作站、鹽酸麻黃堿(中國藥品生物制品檢定所，批號:200303)、風寒感冒片(0.50 g/片，自制)、色譜醇、超純水、分析純，酸性甲醇為 0.3%鹽酸甲醇液。

方法與結果:①色譜條件:Diamonsil C 18色譜柱(4.6 mm×200 mm，5μm)，流動相為甲醇 0.01mol/L、KH2PO4(8∶92，磷酸調 pH 3.0);流速為 1ml/min、檢測波長 210 nm、柱溫 25℃。理論塔板數(shù)按鹽酸麻黃堿峰計算不得低于3 000。②鹽酸麻黃堿對照品溶液的制備:精密稱取鹽酸麻黃堿對照品 11.45mg，置 100ml量瓶中，加酸性甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，0.45μm微孔濾膜過濾，得 0.114 5mg/ml的鹽酸麻黃堿對照品貯備液。取貯備液 5ml加酸性甲醇液溶于25ml量瓶，搖勻，0.45μm微孔濾膜濾過即得對照品稀釋液(22.90μg/ml)。③供試品溶液的制備:取本品適量，研細后取細粉約 0.5g，精密稱量，置 100ml容量瓶中，加入酸性甲醇至刻度，密塞，超聲處理 30min，放冷，用酸性甲醇補足至刻度，搖勻，普通濾紙濾過，取續(xù)濾液 5ml，用酸性甲醇定容至 25ml，搖勻，0.45μm微孔濾膜濾過，取續(xù)濾液作為供試品溶液。④線性關系考察:精密吸取對照品貯備液 10μl，對照品稀釋液 5.0、7.5、10.0、12.5μl，依上述色譜條件分別注入液相色譜儀，以鹽酸麻黃堿的質量(M)為橫坐標，峰面積積分值(A)為縱坐標，繪制標準曲線，回歸方程為 A=4.244×106M+3.164×104，r=0.9999，鹽酸麻黃堿在 0.1145～1.1450μg范圍內呈良好的線性關系。⑤方法專屬性:按同樣工藝制備缺麻黃藥材的陰性對照，再按供試品溶液的制備方法制備陰性對照品溶液。分別精密吸取鹽酸麻黃堿對照品溶液，供試品溶液和陰性對照品溶液各 10μl，注入液相色譜儀，結果表明陰性對照無干擾。⑥精密度試驗:精密吸取鹽酸麻黃堿貯備液 10μl注入液相色譜儀，連續(xù)進樣6次，其峰面積的 RSD=0.85%，表明進樣精密度良好。⑦重復性試驗:取本品(批號:030601)細粉約 0.5g共 6份，按下面的樣品測定方法測定，6份樣品中鹽酸麻黃堿含量的 RSD=1.70%。⑧加樣回收率試驗:取本品(批號:030601)，研細，按高、中、低 3個濃度每個濃度精密稱定 3份。分別加入定量的鹽酸麻黃堿對照品，按下面的樣品測定方法測定，平均回收率為 99.73%，RSD=1.50%。結果見表 1。⑨樣品測定方法與結果:取本品 3批，按以上方法制備供試品溶液，精密吸取供試品溶液和對照品稀釋液，按上述色譜條件進樣各 10 μl，以峰面積按外標法計算含量，結果 3批片劑麻黃堿含量(mg/片 )分別為 1.79、1.78、1.79。

表1 加樣回收率結果

討論:麻黃堿是麻黃藥材的主要有效成分，故選用麻黃堿作為指標成分控制本品的質量。選擇流動相時，篩選了甲醇—水、乙腈—水等流動相系統(tǒng)，試用了三乙胺、磷酸、冰醋酸等對色譜峰分離有影響的試劑，最后確定采用文中所述流動相系統(tǒng)，分離效果較好。用甲醇超聲提取樣品，進樣后色譜峰拖尾，柱效為 2500，而采用 3‰鹽酸甲醇液超聲提取樣品可使色譜峰的拖尾情況得到改善，柱效可達 4000。