譚志鑫,肖本見,廖艷華

1.湖北民族學(xué)院醫(yī)學(xué)院(湖北 恩施 445000)

肢體創(chuàng)傷、斷肢再植及腹主動脈瘤手術(shù)等可引起肢體缺血/再灌注 (1imb ischemia reperfusion，LIR)損傷，常累及肺、腎、腦、心等遠(yuǎn)位器官(remote organ)[1-3]，是骨外科手術(shù)引發(fā)多器官功能障礙綜合征(multiple organ dysfunction syndrome，MODS)的常見原因。因此，探討急性LIR后心臟的保護(hù)途徑有很重要的臨床意義。湖北恩施板黨(因產(chǎn)于恩施板橋鎮(zhèn))，1981年7月被全國中藥材品種質(zhì)量鑒定會議命名為“中國板黨”， 簡稱“板黨”。板黨中含有豐富的硒，可形成天然結(jié)合產(chǎn)物——硒多糖，經(jīng)原子吸收法測定板黨含硒量達(dá)0.886 mg/kg[4]。目前國內(nèi)外對板黨硒多糖的研究報(bào)道還很少，本研究通過觀察板黨硒多糖對大鼠LIR后左心室功能、心肌酶和抗氧化酶的影響，探討其對大鼠LIR后心臟功能的保護(hù)作用。

1 材料與方法

1.1動物及分組健康SD大鼠，由華中科技大學(xué)同濟(jì)醫(yī)學(xué)院實(shí)驗(yàn)動物中心提供，♀♂各半，體重206±19.1 g，隨機(jī)分為3組(n=10)：(1)對照組，用生理鹽水灌胃4周；(2)模型組，用生理鹽水灌胃4周；(3)治療組，用2%板黨硒多糖灌胃4周。三組劑量都是每只10 ml/kg，每天一次，并常規(guī)飲食。

1.2儀器與藥品BL-420生物信號處理系統(tǒng)，UV-756MC型紫外可見分光光度計(jì)，TL-16G型高速冷凍離心機(jī)；LDH、α-HBDH和CK試劑盒均為山東濰坊3 V生物工程集團(tuán)有限公司提供；SOD測定試劑盒、GSH-PX測定試劑盒、MDA測定試劑盒均為南京建成生物研究所產(chǎn)品。

板黨由湖北恩施峰嵐板橋黨參有限公司提供。板黨硒多糖的提取參考文獻(xiàn)[2]，由本院中藥實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行：精密稱取藥材100 g，置索氏提取器中，依次用石油醚(60～90℃)、乙醚和85%乙醇回流提取4 h，殘?jiān)鼡]干溶劑后，再繼續(xù)以水回流4 h，減壓濃縮至一半體積，加入0.1%活性碳，脫色，濾過。濾液加入95%乙醇，使溶液含醇85%，靜置過夜，濾過。殘?jiān)靡颐选o水乙醇反復(fù)洗滌得多糖，60℃烘干。用時配制成2%的液體。

1.3實(shí)驗(yàn)方法三組動物于末次灌胃后，參照趙利軍等[5]的方法，復(fù)制肢體缺血再灌注模型，觀察各指標(biāo)的變化。在再灌注3 h時，用20%氨基甲酸乙脂溶液對大鼠行腹腔注射麻醉，劑量為1.0 g/kg，仰臥位固定于鼠臺，分離右側(cè)頸外靜脈并插管(便于再灌注4 h時取血測GSH-Px、SOD、MDA、LDH、α-HBDH和CK)，分離左側(cè)頸總動脈，行左心室插管，用BL-420系統(tǒng)在再灌注4 h時描記左心室功能參數(shù) (LVSP、LVEDP和±dp/dtmax)。

2 結(jié)果

2.1左心室功能參數(shù)的變化模型組與對照組比較：LVSP和±dp/dtmax降低、LVEDP升高(P<0.01、P<0.05)；板黨硒多糖治療組與模型組比較：LVSP和±dp/dtmax升高(P<0.01、P<0.05)，LVEDP變化不明顯(表1)。

表1 左心室功能參數(shù)的變化

2.2血清LDH、α-HBDH和CK變化模型組與對照組比較：LDH、α-HBDH和CK均升高(P<0.01)；板黨硒多糖治療組與模型組比較：LDH、a-HBDH和CK均降低(P<0.01、P<0.05),表2。

2.3血清SOD、GSH-Px活性和MDA含量的變化模型組與對照組比較：SOD和GSH-Px活性明顯降低、MDA含量明顯增加(P<0.01)；板黨硒多糖治療組與模型組比較：SOD和GSH-Px活性增高、MDA含量減少(P<0.01,見表3。

表2 血清LDH、α-HBDH和CK的變化

表3 血清SOD、GSH-Px活性和MDA含量的變化

3 討論

板黨為桔梗科屬植物的干燥根，其味甘性平，藥食兼用。黨參功效為補(bǔ)脾、益氣、生津、養(yǎng)血，現(xiàn)代研究表明黨參不但保護(hù)心肌收縮功能，而且對急性心肌缺血動物還具有相對增加心肌供血灌注壓力的作用[6]，能明顯降低小鼠低氧腦組織中興奮性氨基酸含量，從而發(fā)揮對腦損傷的保護(hù)作用[7]，能減弱氟哌啶醇致大鼠的學(xué)習(xí)記憶障礙，維持實(shí)驗(yàn)大鼠學(xué)習(xí)記憶能力[8]。但目前對板黨中硒多糖的研究還很少，本實(shí)驗(yàn)主要是觀察大鼠肢體缺血再灌注后，板黨硒多糖對較遠(yuǎn)器官心臟的保護(hù)作用。

本實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，LIR 4 h后，模型組與對照組比較：LVSP和±dp/dtmax降低、LVEDP增高；SOD和GSH-Px活性明顯降低、MDA含量明顯增加；LDH、α-HBDH和CK均明顯增高，說明模型復(fù)制很成功，LIR造成了心臟的嚴(yán)重?fù)p傷。板黨硒多糖治療組與模型組比較：LVSP和±dp/dtmax增高；SOD和GSH-Px活性增高、MDA含量減少；LDH、α-HBDH和CK均降低。實(shí)驗(yàn)顯示板黨硒多糖對LIR損傷有明顯的保護(hù)作用，這種作用可能是硒與多糖都能提高抗氧化酶的活性，從而減少了自由基對細(xì)胞膜的攻擊，因此血清中MDA含量減少和心肌酶活性下降。但硒在其中的存在形態(tài)、價態(tài)及硒與多糖的結(jié)合方式還不清楚，具體機(jī)制還有待進(jìn)一步研究。

恩施富硒板黨營養(yǎng)豐富，清香味美，食藥兼用，倍受大眾喜愛，是一種很好的保健品。黨參硒多糖的開發(fā)，可成為新的一類硒補(bǔ)劑產(chǎn)品。本研究以求為含有機(jī)硒藥物或保健食品的開發(fā)提供理論依據(jù)，以拓寬黨參的應(yīng)用范圍，豐富黨參的產(chǎn)品類型，為進(jìn)一步拓展其藥用及保健方面的應(yīng)用開發(fā)奠定理論基礎(chǔ)。

[參考文獻(xiàn)]

[1] Yassin MM, Harkin DW,Barros D，et al.Lower limb ischemia reperfusion injury triggers a systemic inflammatory response and multiple organ dysfunction[J].World J Surg，2002，26(1)：115-121.

[2] 趙利軍，門秀麗，董淑云，等.骨骼肌缺血預(yù)適應(yīng)對肢體缺血再灌注后心肌的遠(yuǎn)端保護(hù)作用[J].中國醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)，2008，37(2)：168-170.

[3] 翟東升.肝缺血再灌注損傷及其PPARV研究進(jìn)展[J].湖北民族學(xué)院學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版)，2009，26(1)：73-75.

[4] 張馳，劉信平，周大寨，等.中國板黨中硒多糖提取分離技術(shù)研究[J].食品科學(xué)，2006，27(10)：314-318.

[5] 趙利軍，門秀麗，董淑云,等.L-精氨酸對大鼠肢體缺血/再灌注后心肌損傷的影響[J]．中國藥理學(xué)通報(bào),2008,24(6):827-830.

[6] 周晶亞，李玉山，肖本見.恩施板黨對家兔心肌缺血再灌注損傷保護(hù)作用的研究[J]．湖北民族學(xué)院學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版)，2008，25(2)：22-24.

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[8] 艾明仙，黃麗亞.富硒板黨對大鼠學(xué)習(xí)記憶及抗氧化酶影響[J]．中國公共衛(wèi)生，2007，23(6)：736-737.