張 麗

（西山煤電集團(tuán)公司職工總院杜兒坪分院藥劑科，山西 太原 030022）

高血壓是人類常見病，血壓升高可引起血小板聚集率增高。一氧化氮（NO）是體內(nèi)重要的抗血栓因子，由一氧化氮合酶（NOS）催化L-精氨酸生成，其水平高低可影響血小板聚集率（platelets aggregation rate，Pt-Ag）的高低［1］。?；撬幔╰aurine）是人體內(nèi)半必需氨基酸，可舒張血管、降低血壓，其作用機(jī)制可能與影響NO生成有關(guān)［2］。本研究以自發(fā)性高血壓大鼠為動(dòng)物模型，探討?；撬釋ρ“寰奂挠绊憽?/p>

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)材料

1.1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 健康12 w齡雄性Wistar大鼠（WKY）8只 、自發(fā)性高血壓大鼠（SHR）16只均購于上海斯萊克實(shí)驗(yàn)動(dòng)物有限公司。

1.1.2 藥品與試劑 牛磺酸為南京制藥廠生產(chǎn)；NO和NOS試劑盒均購自南京聚力生物醫(yī)學(xué)工程研究所；ADP購自美國Sigma公司。

1.1.3 實(shí)驗(yàn)儀器 DL 25M低速大容量冷凍離心機(jī)（湖南星科科學(xué)儀器有限公司）；LBY2NJ4血小板聚集儀（北京普利生公司）；722分光光度計(jì)（上海精密科學(xué)儀器有限公司）。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

1.2.1 分組與給藥 8只Wistar大鼠為空白對照組，將16只SHR隨機(jī)分為模型組與?；撬峤M，每組各 8只。牛磺酸組以?；撬?2 g/（kg·d）灌胃，其余兩組均以等容積生理鹽水灌胃。均連續(xù)給藥2 w。

1.2.2 標(biāo)本采集與指標(biāo)檢測 連續(xù)給藥2 w后，用10%水合氯醛（300 mg/kg）腹腔麻醉大鼠，腹主動(dòng)脈插管取血加入3.8%枸櫞酸鈉抗凝，離心15 min（3000 r/min，4℃），收集血漿，置于-20℃冰箱保存?zhèn)溆?。采用硝酸還原酶法，按NO檢測試劑盒說明進(jìn)行操作檢測血漿NO濃度；采用化學(xué)比色法原理，按NOS檢測試劑盒說明進(jìn)行操作檢測血漿NOS活性。采血后500 r/min離心5 min，取上清液得到富血小板血漿（RPP），再以 3000 r/min 速度離心 10 min，得貧血小板血漿（PPP），用 PPP 將 RPP 調(diào)到（40±5）×104/μm3范圍，分別收集貧血小板血漿和血小板沉淀，臺氏液洗滌血小板沉淀并混勻，用于血小板聚集率的測定。血小板聚集率的測定按LBY2NJ4血小板聚集儀操作規(guī)程，加入 5 μL ADP（20 μmol/L）誘導(dǎo)血小板聚集，記錄最大聚集率。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

2 結(jié) 果

牛磺酸對自發(fā)性高血壓大鼠Pt-Ag、血漿NO水平和NOS活性的影響，結(jié)果見表1。

表1 ?；撬釋ψ园l(fā)性高血壓大鼠Pt-Ag、血漿NO濃度及NOS活性的影響 （±s）

表1 ?；撬釋ψ园l(fā)性高血壓大鼠Pt-Ag、血漿NO濃度及NOS活性的影響 （±s）

注：與空白對照組比較，1）P<0.05；與模型組比較，2）P<0.05

組別 n N O濃度（μ m o l/L）N O S活性（U/L） P t-A g（%）空白對照組 8 81.23±11.32 1.65±0.02 38.35±4.45模型組 8 50.38±7.85 1） 0.94±0.03 1） 87.23±10.21 1）?；撬峤M 8 78.25±8.93 1）2） 1.59±0.11 1）2） 56.11±7.43 1）2）

由表1可以看出，與空白對照組比較，模型組及?；撬峤MPt-Ag均明顯升高（P<0.05）；與模型組比較，?；撬峤MPt-Ag顯著降低（P<0.05）。模型組血漿NO濃度、NOS活性均低于空白對照組（P<0.05）；?；撬峤MNO濃度、NOS活性均顯著高于模型組（P<0.05）。

3 討 論

高血壓是由于血管內(nèi)皮損傷、血小板自身活化物質(zhì)釋放，或血液中促聚因素增多導(dǎo)致體內(nèi)血小板的激活，通過不斷放大的效應(yīng)引起更多血小板黏附、聚集，造成血管栓塞。血小板聚集主要存在ADP、血栓素 A2（TXA2）與血小板激活因子（PAF）三條途徑。其中ADP促進(jìn)TXA2生成，而TXA2與PAF可進(jìn)一步促進(jìn)ADP的釋放，因此ADP途徑居于重要地位。本研究表明，模型組大鼠血小板聚集率顯著高于空白對照組，而?；撬嶂委熀罂梢悦黠@減輕ADP誘導(dǎo)的SHR的血小板聚集率。

NO的持續(xù)合成與釋放對血小板聚集起到強(qiáng)有力的抑制作用。內(nèi)皮NO以精氨酸為底物、內(nèi)皮eNOS為限速酶而合成。以往的研究表明高血壓狀態(tài)下NOS表達(dá)水平降低，導(dǎo)致NO合成減少［3］，本實(shí)驗(yàn)結(jié)果與以往的實(shí)驗(yàn)結(jié)果相符。?；撬釓V泛存在于動(dòng)物組織細(xì)胞內(nèi)，海洋動(dòng)物中含量尤豐。它是人體內(nèi)含量最豐富的含磺酸基氨基酸 （但不參與蛋白質(zhì)的合成）。?；撬嵩诮档透哐獕夯颊哐獕旱耐瑫r(shí)，可以改善血管內(nèi)皮的舒張效應(yīng)，促進(jìn)NO合成［4］。而本實(shí)驗(yàn)表明，?；撬釋ψ园l(fā)性高血壓大鼠血小板聚集率的抑制作用，與其促進(jìn)NO合成，增加NOS活性有關(guān)。

［1］De Graaf J C，Banga J D，Moncada S，et al.Nitric oxide functions as an inhibitor of platelet adhesion under flow conditions［J］.Circulation，1992，85（6）：2284-2290.

［2］杜景民，卞金陵，章建梁.?；撬釋?dòng)脈粥樣硬化大鼠NO、AngⅡ含量和 ACE 活性的影響［J］.中國老年學(xué)雜志，2006，26（2）：235-237.

［3］陳華衛(wèi)，竇麗，張鈞.血小板L-Arg/NO系統(tǒng)與高血壓研究進(jìn)展［J］.中國康復(fù)醫(yī)學(xué)雜志，2006，21（1）：92-94.

［4］Abebe W.Effects of taurine on the reactivity of aortas from diabetic rats ［J］.Life Sci，2008，82（5/6）：279-289.