張麗華，王振征，趙志文

2001～2007年收集經(jīng)血清學(xué)證實(shí)為HBV感染50例原發(fā)性肝細(xì)胞癌（HCC），男47例，女3例；年齡31～69，平均52歲。腫瘤直徑2.5～11 cm；35例伴肝硬化；40例AFP>30 μg/L；組織學(xué)檢查示高、中、低分化HCC分別為9、31、10例；TNM Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ期分別為20、21、9例。采用免疫組化SP法檢測(cè)上皮鈣粘著蛋白（E-cadherin）的表達(dá)。常規(guī)DAB顯色，蘇木精復(fù)染及中性樹(shù)膠封固，其中抗原修復(fù)采用高溫高壓方法。對(duì)照設(shè)置：正常小鼠血清代替一抗作替代對(duì)照，TBS作空白對(duì)照。顯微鏡下觀察，在良好的組織結(jié)構(gòu)及清晰的背景上細(xì)胞膜棕黃色顆粒為陽(yáng)性。對(duì)樣本進(jìn)行陽(yáng)性細(xì)胞百分比和染色強(qiáng)度綜合評(píng)分，10個(gè)隨機(jī)高倍視野陽(yáng)性細(xì)胞平均百分?jǐn)?shù)<1%為0分，1%～10%為1分，11%～50%為2分，>50%為3分；染色強(qiáng)度計(jì)分：未著色為0分，淡黃色為1分，棕黃色為2分，棕褐色為3分。兩者之積0～4分為弱陽(yáng)性，>4分為強(qiáng)陽(yáng)性。E-cadherin在正常膽管上皮的染色定為強(qiáng)陽(yáng)性表達(dá)，為內(nèi)參正常對(duì)照，膜陽(yáng)性為E-cadherin正常的表達(dá)方式。

結(jié)果顯示E-cadherin的陽(yáng)性信號(hào)主要定位于非腫瘤組織的肝細(xì)胞和膽管的胞膜，呈棕黃色線狀著色。對(duì)比癌旁組織的膜線性表達(dá)，80%（40/50）HCC的癌組織出現(xiàn)胞膜的E-cadherin下降表達(dá)，胞質(zhì)表達(dá)未見(jiàn)明顯變化。癌組織中E-cadherin膜的低表達(dá)相關(guān)于高的腫瘤分期。

E-cadherin基因是一種腫瘤轉(zhuǎn)移抑制基因，其表達(dá)的E-cadherin蛋白是一種依賴鈣的粘附分子，在上皮細(xì)胞間起著介導(dǎo)同質(zhì)性粘附及維持組織結(jié)構(gòu)完整性的作用。抑癌基因的失活導(dǎo)致蛋白表達(dá)下調(diào)從而促使腫瘤的發(fā)生發(fā)展。本文結(jié)果顯示，對(duì)比正常和癌旁組織中胞膜線狀表達(dá)，HCC癌組織中E-cadherin顯示明顯的膜缺失表達(dá)。分析原因，一方面在于E-cadherin膜下調(diào)表達(dá)使細(xì)胞間連接解體，同時(shí)也導(dǎo)致Wnt途徑的關(guān)鍵蛋白β-catenin游離于胞漿，參與下游基因的轉(zhuǎn)錄激活，致使肝癌細(xì)胞增殖加速和易于轉(zhuǎn)移；另一方面，新近研究顯示乙肝病毒X基因具有下調(diào)E-cadherin表達(dá)的作用，這既是HBV感染相關(guān)HCC的特點(diǎn)，同時(shí)又加速了腫瘤進(jìn)程。本文通過(guò)對(duì)50例HCC癌旁組織和癌組織進(jìn)行了E-cadherin的免疫組化檢測(cè)，提示肝癌組織中E-cadherin胞膜的下調(diào)表達(dá)在HCC發(fā)生發(fā)展及轉(zhuǎn)移中可能發(fā)揮重要作用，并可能是肝細(xì)胞癌預(yù)后差的重要因素之一。