張慧漲 方強(qiáng)

(復(fù)旦大學(xué)附屬金山醫(yī)院檢驗(yàn)科 ,上海 200540)

我國(guó)是世界上乙型肝炎病毒(HBV)感染最為嚴(yán)重的國(guó)家之一,根據(jù)1992年全國(guó)病毒性肝炎血清流行病學(xué)調(diào)查顯示,我國(guó)HBV流行率為57.6%,乙肝病毒表面抗原(HBsAg)攜帶率為9.75%,推算全國(guó)有6.9億人曾感染過(guò)HBV,其中約1.2億人為HBsAg攜帶者[1]。乙肝嚴(yán)重威脅我國(guó)人民的身體健康,是許多家庭因病致貧、因病返貧的一個(gè)重要原因,是我國(guó)突出的公共衛(wèi)生問(wèn)題。為了解金山石化地區(qū)人群乙肝流行狀況,本研究對(duì)2009年在金山醫(yī)院就診人群和健康體檢人群共8 071例進(jìn)行乙肝感染情況分析,作出客觀的評(píng)價(jià),為制定相應(yīng)的防制策略提供依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 標(biāo)本來(lái)源 2009年1月—6月來(lái)復(fù)旦大學(xué)附屬金山醫(yī)院就診的各類(lèi)人群6 507例,最大年齡96

歲;健康體檢人群1 564例,年齡15～74歲,采取靜脈血4 mL。使用特定的PCR管抽取靜脈血2 mL用于測(cè)HBV DNA。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法 ELISA法檢測(cè)乙肝6項(xiàng)指標(biāo),包括乙肝病毒表面抗原(HBsAg)、乙肝病毒表面抗體(抗-HBs)、乙肝病毒 e抗原(HBeAg)、乙肝病毒 e抗體(抗-HBe)、乙肝病毒核心抗體(抗-HBc)和抗-HBc-IgM。儀器為T(mén)ECAN全自動(dòng)酶免儀,檢測(cè)試劑為上海科華實(shí)業(yè)有限公司提供。HBV DNA熒光定量,采用深圳匹基生產(chǎn)的HBV DNA熒光定量試劑盒,儀器為羅氏Lightcycle擴(kuò)增儀。血清肝功能指標(biāo),包括丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶(ALT)、天門(mén)冬氨酸轉(zhuǎn)氨酶(AST)和γ谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶(GGT)用羅氏P800全自動(dòng)生化分析儀檢測(cè)。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用χ2檢驗(yàn)和t檢驗(yàn),P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 性別和年齡分布 2009年1月—6月,共調(diào)查8 071例,研究人群的性別和年齡分布見(jiàn)表1。

2.2 乙肝血清學(xué)指標(biāo) 就診人群和體檢人群的乙肝標(biāo)志物血清模式分布情況基本一致,乙肝感染血清模式分析(表 2和表 3)。360例進(jìn)行了 HBV DNA的檢測(cè),乙肝感染血清模式與HBV DNA之間的關(guān)系見(jiàn)表 3。HBeAg陽(yáng)性組與其他組模式HBV DNA載量有顯著差異(P＜0.05)。

表1 8 071例調(diào)查對(duì)象的性別和年齡分布[n(%)]

表2 不同乙肝感染血清模式分布[n(%)]

表3 不同人群的乙肝感染血清模式及與HBV DNA病毒載量的關(guān)系

2.3 血清肝功能指標(biāo) 969例同時(shí)進(jìn)行了生化指標(biāo)(ALT、AST、GGT)的檢測(cè),經(jīng)統(tǒng)計(jì)分析顯示,HBsAg陽(yáng)性和HBsAg陰性模式之間的各生化指標(biāo)差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(表4)。

表4 乙肝不同感染血清模式的各生化指標(biāo)例數(shù)

3 討 論

乙肝在不同病程時(shí)期,血清學(xué)指標(biāo)有不同的模式,其中HBeAg陽(yáng)性的HBV DNA拷貝數(shù)值最高,明顯高于HBeAg陰性的HBV DNA拷貝數(shù)值,說(shuō)明HBeAg是 HBV復(fù)制指標(biāo),陽(yáng)性時(shí)血清 HBV DNA呈高水平,具有傳染性[2]。本研究中84例HBeAg陽(yáng)性者中有16例HBV DNA陰性,其原因可能是:在 HBV復(fù)制處于靜止期,血循環(huán)中HBeAg雖然持續(xù)陽(yáng)性,但含量卻在逐步下降,此時(shí)血清中的HBV DNA水平隨之下降或陰性;HBV DNA整合到人類(lèi)染色體與宿主基因共同表達(dá),血清中能檢測(cè)相應(yīng)標(biāo)記物,但無(wú)法檢測(cè)HBV DNA;各種抗病毒藥物的應(yīng)用,外周血中的HBV DNA含量低于試劑檢測(cè)下限。53例HBeAg陰性而HBV DNA陽(yáng)性的患者中可能部分伴有HBV前C區(qū)基因和C區(qū)啟動(dòng)子發(fā)生變異,變異導(dǎo)致不能產(chǎn)生HBeAg,但不影響HBV復(fù)制和傳播[3]。在HBsAg和抗-HBc陽(yáng)性的人群中HBV DNA的拷貝數(shù)有2例達(dá)107,4例達(dá)106,由于乙肝病毒的前C區(qū)變異和近年抗病毒治療的普遍實(shí)施,新近研究發(fā)現(xiàn)有較高比例的HBeAg陰性肝炎的存在。國(guó)內(nèi)有文獻(xiàn)[4]報(bào)道HBeAg陰性肝炎是一種免疫逃避株的感染,為長(zhǎng)期受機(jī)體免疫壓力的結(jié)果。HBsAg、抗-HBs同時(shí)陽(yáng)性有16例,其原因可能是:乙肝病毒容易發(fā)生變異,變異后的病毒,其生物特性有了新的變化,可使乙肝疫苗無(wú)法發(fā)揮作用;一些乙肝病毒感染者,乙肝病毒表面抗原的亞型有所不同,亞型種類(lèi)有多種,乙肝疫苗是針對(duì)主要的病毒亞型而設(shè),所以難免有顧及不到的亞型,如果是較為罕見(jiàn)的病毒亞型,乙肝疫苗也不會(huì)有保護(hù)作用。在其他模式HBsAg陰性血清中,有 1例 HBV DNA陽(yáng)性,9例抗-HBc-IgM 陽(yáng)性,5例HBeAg陽(yáng)性,其原因可能是:機(jī)體急性感染HBV窗口期,而 HBV DNA的檢出時(shí)間可提前;HBsAg的水平過(guò)低,無(wú)法檢出;HBsAg的水平過(guò)高,出現(xiàn)前帶現(xiàn)象,產(chǎn)生構(gòu)狀效應(yīng);暴發(fā)性乙肝時(shí)肝細(xì)胞中以合成HBcAg為主,很少或不合成 HB-sAg;S基因發(fā)生逃避免疫的變異造成 HBsAg陰性;血清亞型的存在。

本研究的檢測(cè)人群中全陰性者 3 144例,占39%;單獨(dú)抗-HBs陽(yáng)性(抗-HBs+)2 409例,占30%。

本研究發(fā)現(xiàn),HBsAg陽(yáng)性患者的乙肝病毒血清標(biāo)志物模式中,以HBsAg、抗-HBe和抗-HBc陽(yáng)性最多見(jiàn)占 64.6%(535/828);HBsAg、HBeAg和抗-HBc陽(yáng)性占 20.4%(169/828);一般而言HB-sAg和抗-HBc同時(shí)存在(97.8%);本研究中有5例HBsAg單獨(dú)存在(0.6%);5例 HBsAg陰性而HBeAg陽(yáng)性的模式(0.6%);16例 HBsAg和抗-HBs同時(shí)陽(yáng)性(1.9%)。因此,建議在做HBsAg檢測(cè)的同時(shí),能夠同時(shí)檢測(cè)相關(guān)的乙肝病毒其他指標(biāo),這對(duì)保證輸血安全和控制院內(nèi)感染有重大意義。本研究中還發(fā)現(xiàn)＜50歲的患者HBsAg陽(yáng)性11.4%(696/6 060)、抗-HBs陽(yáng)性率 47.0%(2 852/6 060),＞50歲的患者HBsAg陽(yáng)性率6.6%(132/2 011)、抗-HBs陽(yáng)性率44.9%(903/2 011),與文獻(xiàn)[1]報(bào)道的我國(guó)正常人群中抗-HBs陽(yáng)性率可達(dá)40%左右相一致。人群對(duì)乙肝的易感性與年齡有關(guān),新生兒和嬰幼兒是主要的易感人群,其次是學(xué)齡兒童和青少年。老年人HBsAg檢出率低,由于其處于HBV低感染和高免疫狀態(tài),老年人HBV感染引起的慢性肝病,血清學(xué)表現(xiàn)不典型,病毒發(fā)生變異較多。同時(shí)＜50歲者HBsAg陽(yáng)性率比＞50歲者高,可能與中年人的社會(huì)、家庭責(zé)任加重,HBV感染機(jī)會(huì)加大有關(guān)。

PCR對(duì)HBV DNA的檢測(cè)是直接檢測(cè)HBV DNA本身,故可直接反映 HBV的存在情況,為HBV感染提供直接證據(jù)。但是,當(dāng)樣本中HBV DNA含量低于試劑檢測(cè)限,HBVDNA檢測(cè)結(jié)果為陰性時(shí),也不能完全排除無(wú)HBV感染。金山石化地處上海工業(yè)區(qū),就診人群和體檢人群是化工區(qū)人員的典型代表,對(duì)這一人群的乙肝情況分析,有助于了解該人群HBV感染情況,以便采取相應(yīng)對(duì)策進(jìn)行干預(yù),有利于預(yù)防和控制乙肝病毒在該人群中的傳染和疾病的發(fā)生,同時(shí)對(duì)乙肝的的診斷與治療提供全面的實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

1 陳紫榕.病毒性肝炎[M].北京:人民軍醫(yī)出版社,2002:120-193.

2 苑妹,王青.不同乙肝五項(xiàng)模式乙型肝炎患者血清 HBV-DNA檢驗(yàn)結(jié)果及其意義[J].醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)與臨床,2008,19(5):63.

3 雷春亮,彭曉謀,顧琳,等.HBeAg陰性慢性乙型肝炎患者出現(xiàn)前C基本核啟動(dòng)子聯(lián)合突變的意義[J].中華傳染病雜志,2005,23(1):10.

4 王貴強(qiáng).應(yīng)重視HBeAg陰性慢性乙型肝炎的診斷和治療[J].中華內(nèi)科雜志,2005,44(9):643-644.