林 鶯,王恩,張小華 ,李 芳

（濱州醫(yī)學(xué)院,山東 煙臺(tái) 264003）

中藥平車前不同部位總黃酮含量測(cè)定

林 鶯,王恩,張小華 ,李 芳

（濱州醫(yī)學(xué)院,山東 煙臺(tái) 264003）

目的提取平車前不同部位總黃酮并測(cè)定其含量。方法用索式提取器乙醇抽提平車前不同部位總黃酮,獲得乙醇提取液,利用減壓濃縮法蒸去乙醇獲得總黃酮提取液,并用蘆丁標(biāo)準(zhǔn)曲線法計(jì)算平車前不同部位的總黃酮含量。結(jié)果平車前穗、葉、根中總黃酮含量分別為4.04%、2.48%、2.05%。結(jié)論 平車前全草均含有黃酮類成分,其中穗中含量最高,含有較高的鎮(zhèn)咳有效成分。因此,平車前全草均可用于總黃酮類藥用資源開發(fā)。

平車前;總黃酮;微波提取

車前是車前科車前屬植物,又稱車前菜、牛舌草、車輪菜、豬耳草等。車前全身是寶,嫩可食用,成可入藥。車前作為一味常用中藥,始載于《神農(nóng)本草經(jīng)》,列為上品,被國(guó)家衛(wèi)生部列入可用于保健品生產(chǎn)的原料名單[1-2]。車前科植物有3屬約260種。而我國(guó)僅有車前屬1屬,13種[3]。目前開發(fā)用于藥用的主要是大車前（Plantago major L.）、車前（plantago asiatical L.）和平車前（Plantago depresaa Willd.）[4]。車前味甘、寒,無毒,具有清熱解毒、祛痰、止咳、利尿等作用[5],主氣癃止痛,利水通小便,除濕痹,久服輕身耐老[4,6-7]?，F(xiàn)代藥理研究表明,車前全草中主要有效成分為烏蘇酸、車前苷、環(huán)烯醚苷類、黃酮類成分[8]。其中黃酮類化合物為鎮(zhèn)咳主要成分,車前草中的黃酮及其苷類對(duì)呼吸系統(tǒng)有著明顯的作用。車前苷作用于呼吸中樞,具有明顯的鎮(zhèn)咳作用,通過興奮分泌神經(jīng)可促進(jìn)氣管、支氣管液及消化液的分泌,且無溶血作用。苯乙酰咖啡酰糖酯類化合物能夠抑制環(huán)腺苷酸磷酸二酯酶與5-脂氧合酶,說明總黃酮類物質(zhì)是車前鎮(zhèn)咳抗炎活性的主要物質(zhì)基礎(chǔ)[3,9-10]。但是在不同植物的不同部位,總黃酮的含量可能不同,這對(duì)于藥材的采集及中藥有效成分的提取都具有至關(guān)重要的關(guān)系?，F(xiàn)在對(duì)車前總黃酮含量的研究多集中在對(duì)大車前的研究,而對(duì)平車前的研究較少。為了充分利用中藥資源,了解不同植物來源的中藥有效成分,本文選取平車前（Plantago depresaa Willd.）為供試材料,通過對(duì)平車前不同部位總黃酮含量的研究,探索平車前體內(nèi)總黃酮的分布,為中藥有效成分提取提供基礎(chǔ)理論依據(jù)。

1 材料與儀器

722型分光光度計(jì)（上海分析儀器廠）。試劑標(biāo)準(zhǔn)品蘆丁為國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司生產(chǎn)。所用試劑均為分析純,所用水為蒸餾水。所用平車前,7月采集于本地,自然晾干,待用。

2 方法與結(jié)果

2.1 總黃酮的提取[7,11]精密稱取平車前穗、葉、根各1 g于索氏提取器中,加入70%的乙醇100 mL及少許CaCO3,提取8 h,提取液減壓濃縮蒸去乙醇。濃縮液于分液漏斗中用相同體積的乙醚洗2～3次,以除葉綠素及臘質(zhì)等,然后用 70%的乙醇定容至100 mL,待測(cè)。

2.2 繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線[11]精密稱取蘆丁10 mg,用70%的乙醇溶解并定容至100 mL,使其濃度為100 μ g/mL。將蘆丁溶液用70%的乙醇稀釋成0,5,10,15,20,25,30,35,40,45,50,55,60,65,70,75,80,85,90,95,100 μ g/mL,各取 1 mL 于試管中 ,加 70%的乙醇 1 mL,加入300 μ L 5%的NaNO2,6 min后加入300 μ L 10%的 Al（NO3）3 溶液 ,6 min 后再加入 2 mL 4%NaOH,10 min后于分光光度計(jì)波長(zhǎng)510 nm處測(cè)定A值。繪制濃度CA標(biāo)準(zhǔn)曲線。

2.3 總黃酮含量的測(cè)定[11]取經(jīng)稀釋過的樣品溶液各1 mL,按上述同樣的步驟和方法測(cè)定得A值,從標(biāo)準(zhǔn)曲線查得樣品中總黃酮的含量（μ g/mL）,測(cè)得中藥車前不同部位的總黃酮含量,以蘆丁計(jì)分別為:穗4.04%,葉 2.48%,根 2.05%。

2.4 回收率試驗(yàn) 精密稱取車前草適量,加入蘆丁對(duì)照品適量,按樣品液制備和樣品測(cè)定方法操作,測(cè)得平均回收率為98.7%,RSD=1.63%（n=6）。

2.5 精密度試驗(yàn) 精密吸取蘆丁對(duì)照品溶液2.0 mL,按2.2項(xiàng)下方法連續(xù)測(cè)定6次,測(cè)定其吸收度后RSD=0.32%（n=6）。表明儀器精密度良好。

3 討論

黃酮類化合物具有降脂、抗血栓、抗氧化、降糖、鎮(zhèn)咳抗炎等多種生理活性。分析結(jié)果顯示,平車前各部位均含黃酮類成分,其含量穗＞葉＞根,可見,車前草的穗、葉、根中均含有鎮(zhèn)咳活性,有效成分含量以平車前穗最多。

本試驗(yàn)證明平車前全體均含有鎮(zhèn)咳抗炎成分總黃酮類化合物,因此,平車前全草均可用于總黃酮類藥用資源開發(fā)。

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R284.2

A

1007-4813（2010）01-0129-02

林 鶯（1980-）,女,碩士研究生,講師。研究方向:藥用植物學(xué)。

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2009-07-26）