王照華 楊 靖 趙建立 劉書芹

灰化助劑與稱樣器皿對氫化物發(fā)生-原子吸收分光光度法測定飼料中總砷結(jié)果的影響

王照華 楊 靖 趙建立 劉書芹

文章研究了灰化助劑與稱樣器皿對氫化物發(fā)生－原子吸收分光光度法測定飼料中總砷結(jié)果的影響。結(jié)果表明：添加灰化助劑測定總砷結(jié)果與回收率顯著高于不添加灰化助劑的結(jié)果（P≤0.05）；但灰化樣品時使用石英坩堝和硬質(zhì)瓷坩堝對測定結(jié)果與回收率無明顯影響（P≥0.05）。

灰化助劑；稱樣器皿；氫化物發(fā)生－原子吸收分光光度法；飼料；總砷

砷在動物體內(nèi)的蓄積、對人體的危害以及對環(huán)境的污染已被證實，而且也得到了社會的普遍關(guān)注。目前，飼料衛(wèi)生指標(biāo)——總砷，已成為衡量飼料質(zhì)量安全與否的指標(biāo)之一。中國飼料衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)對各類飼料及原料中總砷的允許含量上限做了明確規(guī)定：雞配合飼料，豬配合、混合飼料中總砷的含量不得高于2mg/kg；產(chǎn)蛋雞、肉用仔雞、仔豬和生長豬微量元素預(yù)混料、維生素預(yù)混料、復(fù)合預(yù)混料、魚粉、磷酸鹽和石粉中的砷(即總砷)含量不得高于10mg/kg。

因為飼料中砷的相對含量低（mg/kg），在檢測過程中任一環(huán)節(jié)的疏忽都可能會給檢測結(jié)果帶來較大的偏差，這一方面會影響結(jié)果的準(zhǔn)確性，另一方面可能會使一些砷超標(biāo)樣品流入市場，使不法者逃脫了法律制裁，而給養(yǎng)殖戶帶來危害，又造成環(huán)境污染。因此，在開展一項檢測工作前都要根據(jù)各自的儀器性能或?qū)嶒灄l件對該方法進行優(yōu)化以能保證結(jié)果的準(zhǔn)確性。本文主要研究灰化助劑的添加與否及不同稱樣器皿對飼料中總砷測定結(jié)果的影響。為檢測工作中優(yōu)化試驗方法提供參考。

1 材料與方法

1.1 儀器與試劑

6820原子吸收分光光度計，WHG－102A2流動注射氫化物發(fā)生器（北京瀚時），T型電熱石英管，純化水儀。鹽酸及不同濃度的鹽酸溶液：濃鹽酸，優(yōu)級純；3mol/l鹽酸溶液；10%鹽酸溶液（介質(zhì)）；1%鹽酸溶液（載液）；硼氫化鉀（KBH4）：溶液濃度 1.5%（含 0.3%的NaOH）。還原劑：碘化鉀（2%）溶液和抗壞血酸（1.25%）溶液。

1.2 試驗方法（參照國標(biāo)）

1.2.1 樣品處理（試驗一）

1.2.1.1 試驗Ⅰ組：稱取試樣2.00 g左右（精確到0.0001 g）于潔凈的60ml瓷坩堝中，加0.15 g/ml的硝酸鎂溶液5ml，充分混勻，低溫蒸干，小火炭化至無煙后轉(zhuǎn)入（550±20）℃高溫爐中灰化6 h，取出冷卻，緩慢加入3 mol/l的鹽酸溶液10ml，待激烈反應(yīng)過后，煮沸至近干（剩約1 ml）后加去離子水轉(zhuǎn)移到50ml容量瓶中，用去離子水洗滌坩堝3～5次，洗液并入容量瓶中，向容量瓶中加入碘化鉀溶液1 ml，加熱煮沸再冷卻后加1 ml抗壞血酸溶液，將Ⅴ價砷還原為Ⅲ價砷，用去離子水定容。做3個平行樣。還原1 h后上機。1.2.1.2 試驗Ⅱ組：稱取試樣2.00 g（精確到0.0001 g）置于潔凈的60ml瓷坩堝中，小火炭化至無煙后轉(zhuǎn)入550℃高溫爐中灰化6 h，取出冷卻，緩慢加入3mol/l的鹽酸溶液10ml，待激烈反應(yīng)過后，煮沸至近干（剩約1ml）后加去離子水轉(zhuǎn)移到50ml容量瓶中，用去離子水洗滌坩堝3～5次，洗液并入容量瓶中，向容量瓶中加入碘化鉀1 ml，加熱煮沸再冷卻后加1 m l抗壞血酸，將Ⅴ價砷還原為Ⅲ價砷。還原1 h后上機。做3個平行樣。此組為對照組。

1.2.1.3 回收率添加：按試Ⅰ組和試Ⅱ組各稱取3份樣品，分別向其中加入2μg/ml的砷標(biāo)準(zhǔn)溶液1 m l，充分混勻。試驗一組添加按上述方法“加入硝酸鎂......用去離子水定容”。試驗二添加先混勻低溫蒸干，再“小火碳化......用去離子水定容”。

試驗二中試驗Ⅰ組取6個硬質(zhì)瓷坩堝，試驗Ⅱ組取6個石英坩堝，分別做樣品與樣品添加處理。稱樣步驟、樣品處理過程與回收率添加處理與試驗一中的試驗Ⅰ組步驟完全相同。

1.2.2 標(biāo)準(zhǔn)母液配制與標(biāo)準(zhǔn)曲線

1.2.2.1 標(biāo)準(zhǔn)母液配制

將1 ml 100μg/ml的砷標(biāo)準(zhǔn)液放入100ml容量瓶中，加0.8 g碘化鉀，以10%鹽酸定容，加熱至微沸后放冷，加0.5 g抗壞血酸。此為1μg/ml的Ⅲ價砷母液。

1.2.2.2 工作曲線與樣品測定

以 1 μg/ml的Ⅲ價砷母液配制 2、5、8、10、12、16、20 ng/ml的標(biāo)準(zhǔn)系列溶液，以10%鹽酸定容。用此組溶液做標(biāo)準(zhǔn)曲線。

1.2.3 測定條件

燈電流：6 mA；光譜通帶：0.4 nm；檢測波長：193.7 nm；載氣及流速：氮氣，流速120ml/min；載液：1%的鹽酸溶液；硼氫化鉀（KBH4）：溶液濃度 1.5%（含0.3%的NaOH）（現(xiàn)配現(xiàn)用）。

2 結(jié)果與討論

2.1 灰化助劑對飼料中總砷檢測結(jié)果的影響（見表1）

表1 灰化助劑添加與否對飼料中總砷檢測結(jié)果的影響

由表1可見，同一樣品，添加灰化助劑的樣品總砷測定結(jié)果明顯高于不添加灰化助劑的樣品結(jié)果（P≤0.05）。從回收率來看，添加灰化助劑的樣品回收率明顯高于不添加灰化助劑的樣品回收率（P≤0.05）?？梢娫陲暳蠘悠坊一幚磉^程時，添加與不添加灰化助劑對氫化物發(fā)生器-原子吸收分光光度法測定飼料總砷的結(jié)果有直接影響。其原因可能是樣品砷與灰化助劑——硝酸鎂反應(yīng)生成焦砷酸鎂（Mg2As2O7）而被固定下來，較有效地阻止了砷的揮發(fā)作用。該結(jié)果與前人報道溫度對有機物中砷的影響結(jié)果相一致。

2.2 稱樣器皿對飼料中總砷檢測結(jié)果的影響（見表2）

由表2結(jié)果可以看出，測定飼料中總砷含量-樣品前處理時，使用硬質(zhì)瓷坩堝和石英坩堝測定結(jié)果表觀值來看，石英坩堝測定砷的結(jié)果略高于瓷坩堝的測定值。這可能是因為瓷坩堝的導(dǎo)熱性較石英坩堝更好一些，因此在灰化時瓷坩堝升溫較快而使砷略有損失所致，但從統(tǒng)計分析結(jié)果看，差異不顯著（P≥0.05），而且使用兩種稱樣器皿的回收率差異也不顯著（P≥0.05）。

在飼料中總砷的國標(biāo)測定方法中樣品灰化處理法中使用的是瓷坩堝。從本試驗的結(jié)果來看，在測定飼料總砷時，可以根據(jù)實驗室的現(xiàn)有條件，選擇不同材質(zhì)的坩堝做試樣灰化處理。特別是對檢測結(jié)果進行回收率校正的情況下，可選擇石英坩堝和硬質(zhì)瓷坩堝中的任何一種。但對于砷含量特別低的樣品或?qū)Y(jié)果不做校準(zhǔn)的樣品，最好用石英坩堝的測定，這樣結(jié)果更接近于真實值。對于砷含量高且不對測定結(jié)果做回收率校準(zhǔn)的樣品，也最好用石英坩堝以免超標(biāo)樣品被遺漏。另外，對測定結(jié)果做校準(zhǔn)的樣品而言，使用硬質(zhì)瓷坩堝，無論是炭化速度還是趕酸速度均大于石英坩堝，而且瓷坩堝的價格遠遠低于石英坩堝的價格，因此使用瓷坩堝可以提高工作效率，還可以節(jié)約試驗成本。

表2 不同盛樣器皿對飼料中總砷檢測結(jié)果的影響

3 小結(jié)

3.1 干灰化法測定飼料中的總砷時，加灰化助劑與否對測定結(jié)果影響顯著（P≤0.05）。加灰化助劑的測定結(jié)果與回收率明顯高于后者。

3.2 干灰化法測定飼料中的總砷時，樣品灰化階段用硬質(zhì)瓷坩堝和石英坩堝對檢測結(jié)果影響不大（P≥0.05），回收率差異不顯著（P≥0.05）。因此，對于一般性試驗或?qū)z測結(jié)果進行校準(zhǔn)的試驗，在做砷的灰化處理時，可以根據(jù)本實驗室的現(xiàn)有條件選擇其中的任何一種稱樣器皿。但對于精確度要求較高的試驗，建議使用石英坩堝進行樣品灰化處理，這樣測定的結(jié)果更接近真值。

若干篇，刊略，需者可函索）

（編輯：張學(xué)智，mengzai007@163.com）

S816.17

A

1001-991X（2010）13-0048-02

王照華，河北省廊坊市農(nóng)業(yè)局，065000，河北省廊坊市農(nóng)業(yè)局B區(qū)畜檢中心（金光道43號）。

楊靖（通訊作者）、趙建立、劉書芹，單位及通訊地址同第一作者。

2010-04-14