劉 敏，黃 玨，葉小萍

(江西省南昌市洪都中醫(yī)院檢驗科，江西 南昌 330008)

人類白細(xì)胞抗原 (Human Leucocyte Antigen，簡稱HLA)復(fù)合體，是人類的主要組織相容性復(fù)合體(MHC)，位于6號染色體上(6p21，31)，包括一系列緊密連鎖的基因座，與人類的免疫系統(tǒng)功能密切相關(guān)。其中部分基因編碼細(xì)胞表面抗原，成為每個人的細(xì)胞不可混淆的“特征”，是免疫系統(tǒng)區(qū)分本身和異體物質(zhì)的基礎(chǔ)。

1 材料與方法

1.1 對象 選擇我院2009年2月至2010年7月各類確診為關(guān)節(jié)炎的門診、住院患者107例，男68例，女39例，年齡18～75歲，平均年齡35.2歲。107名患者包括：細(xì)菌性關(guān)節(jié)炎患者24例、反應(yīng)性關(guān)節(jié)炎患者19例、強直性脊柱患者54例、銀屑病關(guān)節(jié)炎患者10例。

1.2 入選標(biāo)準(zhǔn) 反應(yīng)性關(guān)節(jié)炎(Reactive arthritis，ReA)按第三次國際會議提出的診斷標(biāo)準(zhǔn)。銀屑病關(guān)節(jié)炎(Psoriatic arthritis，PsA)采用 CASPAR(Classification criteria for the study of psoriatic arthritis study)診斷分類標(biāo)準(zhǔn)[1]。強直性脊柱炎(Ankylosing spondylitis，AS)按1997年汕頭會議提出的診斷方案[2]系協(xié)作組商定作為國內(nèi)流行病學(xué)研究用的分類標(biāo)準(zhǔn)，比較符合我國實際。

1.3 儀器與試劑 儀器使用美國BD公司生產(chǎn)的FACS Calibur流式細(xì)胞儀。試劑由美國BD公司生產(chǎn)。包括 A：HLA－B27fitc/cd3pe雙熒光標(biāo)記抗體。 B：10×溶血素。 C：標(biāo)準(zhǔn)微球。

1.4 檢測方法 所有受試對象均空腹過夜8h以上，次日晨取抗凝靜脈血2m l，先調(diào)整白細(xì)胞濃度，取40μl全血加HLA－B27FIFC/CD3PE熒光標(biāo)記抗體10μl，混勻，室溫避光靜置15～20min，再加入2ml 10×的溶血素，混勻，室溫避光靜置5～10min，離心 5min，棄去上清液，用 2m l Pbs洗滌 2遍，再用1%的多聚甲醛0.25m l固定30min，然后把經(jīng)過處理的標(biāo)本上機進行人類白細(xì)胞抗原HLA-B27的測定。

2 結(jié)果

強直性脊柱炎、反應(yīng)性關(guān)節(jié)炎、銀屑病關(guān)節(jié)炎、細(xì)菌性關(guān)節(jié)炎疾病患者HLA-B27檢測都呈陽性反應(yīng)，但強直性脊柱炎患者的陽性率最高。

3 討論

HLA抗原是人類主要組織相容性復(fù)合體 (Major Histo-compatibility Complex，MHC)的表達(dá)產(chǎn)物，為 HLA-I類抗原。在免疫系統(tǒng)中主要負(fù)責(zé)細(xì)胞之間的相互識別和誘導(dǎo)免疫反應(yīng)，調(diào)節(jié)免疫應(yīng)答的功能。近年來研究發(fā)現(xiàn)一些特殊類型的HLA抗原與某些疾病的發(fā)生率有關(guān)，而這些疾病大多數(shù)是發(fā)病機理不明并伴有免疫功能異常和有遺傳傾向性的疾病[3]。因此，分析HLA抗原表達(dá)情況不僅有助于了解發(fā)病機理，對于疾病的診斷、預(yù)防和預(yù)后判斷有重要意義。

表1 各類關(guān)節(jié)炎HLA-B27檢測陽性率比較

本研究中HLA-B27檢測結(jié)果為強直性脊柱炎患者的陽性率為87%；反應(yīng)性關(guān)節(jié)炎患者的陽性率為31%；銀屑病關(guān)節(jié)炎患者的陽性率為20%；細(xì)菌性關(guān)節(jié)炎患者的陽性率為8%，以上結(jié)果說明強直性脊柱炎、反應(yīng)性關(guān)節(jié)炎、銀屑病關(guān)節(jié)炎等與HLA-B27基因具有強相關(guān)性。

中國人的HLA-B27頻率為3.4%[4]具有HLA-B27抗原者患強直性脊柱炎的機率為7.3%[4]。在我們的研究中強直性脊柱炎患者的HLA-B27抗原陽性率也最高。早在1973年Hrewerton等和Schlosstein等提出了HLA－B27抗原的表達(dá)與強直性脊椎炎有著高度相關(guān)性。將近90%的強直性脊椎炎患者其HLA-B27抗原表達(dá)為陽性。強直性脊柱炎是以骶髂關(guān)節(jié)和脊柱關(guān)節(jié)慢性、進行性炎性病變?yōu)橹鞯淖陨砻庖呒膊　１静』疾÷瘦^高，國內(nèi)報道約為0.3%[5]，多發(fā)于青壯年，主要以中軸關(guān)節(jié)受累為主的慢性進行性病變，病理學(xué)上以韌帶附著點炎為特征,上行性炎性下腰痛是多數(shù)病例的早期臨床表現(xiàn)[6]。因此，有上述癥狀的患者應(yīng)做HLA-B27抗原的檢測，以便盡快對疾病作出診斷，及早進行治療。

綜上所述，強直性脊椎炎、反應(yīng)性關(guān)節(jié)炎及銀屑病關(guān)節(jié)炎患者的人類白細(xì)胞抗原HLA-B27均有不同程度的增高，但強直性脊柱炎患者的陽性率最高，由此可見HLA-B27的檢測對強直性脊柱炎的診斷有著極其重要的作用。

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[3]李彥博,郭斯啟,奚永志.人類白細(xì)胞抗原B-27與強直性脊柱炎關(guān)聯(lián)的研究新進展[J].中華風(fēng)濕病學(xué)雜志,2005,9(5):306-308.

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[5]蔣 明,AVID YU,林孝義,朱立平主編.中華風(fēng)濕病學(xué)[M].北京:華夏出版社,2004:1010.

[6]蔣 明,余得恩,林孝義.風(fēng)濕病學(xué)[M].第二版,北京:科學(xué)技術(shù)出版社,2004:1038.