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        自制正常值質(zhì)控血漿應(yīng)用于凝血項目檢查的探討

        2010-03-28 02:11:16肖作淼張友三
        實驗與檢驗醫(yī)學(xué) 2010年1期
        關(guān)鍵詞:凝血因子定值試劑

        肖作淼,張友三

        (1、江西省贛州市人民醫(yī)院血液科;2、檢驗科,江西 贛州 341000)

        許多疾病會引起機體止凝血功能紊亂,故凝血檢查廣泛應(yīng)用于臨床,尤其在手術(shù)前、出凝血性疾病等的診療,凝血檢查成了必不可少的實驗項目。凝血項目檢測過程受儀器狀態(tài)、試劑穩(wěn)定性及環(huán)境溫度等因素影響,所以室內(nèi)質(zhì)控是日常工作的重要內(nèi)容之一。目前在市場銷售的凝血項目質(zhì)控品大多為進口,價格太貴,也成了科室負(fù)擔(dān),讓科室難于堅持每日做室內(nèi)質(zhì)控。如何保證檢驗質(zhì)量的同時又不增加成本,使室內(nèi)質(zhì)控工作持續(xù)性地開展,是現(xiàn)代檢驗追求目標(biāo)之一。我們嘗試自制質(zhì)控血漿用于凝血項目檢查,此方法簡單,經(jīng)濟,并取得較好的質(zhì)控效果,有較強的可操作性,現(xiàn)總結(jié)與同行探討。

        1 材料與方法

        1.1 材料

        1.1 .1儀器 北京世帝產(chǎn)LG-PABER-I血小板聚集凝血因子分析儀(半自動)。

        1.1 .2 試劑 廠家配套試劑(注PT:ISI 1.52),試劑配制后在有效期內(nèi)使用。

        1.1 .3器材 一次性真空定量采血器。用109mmol/L枸椽酸鈉抗凝劑0.2ml,定量采血至2ml。

        1.2 方法

        1.2 .1質(zhì)控血漿收集 收集同一天凝血項目檢查正常的69例住院病人剩余血漿標(biāo)本,且無脂血、黃疸、溶血和渾濁,其中男36例,女33例,年齡在4-76歲(平均45.4歲)。將標(biāo)本置于無菌燒瓶中充分混勻5分鐘后于無菌試管內(nèi)離心(RCF 2500g,10min),吸取上清液(將試管底部 0.5m l棄之)移到另一無菌燒瓶內(nèi),再次充分混勻后,分裝于密閉的子彈頭內(nèi)(0.3ml/支),保存于-20℃冰箱。整個過程4小時內(nèi)完成。

        1.2 .2血漿定值 血漿定值所用試劑當(dāng)天配制。制取當(dāng)日檢測 6份質(zhì)控血漿之 PT、APTT、TT、FIB,隨后連續(xù) 3日,每天取6支質(zhì)控血漿,如此每個項目可獲得24個數(shù)據(jù),計算平均值與標(biāo)準(zhǔn)差,去除離群值(x±3SD),將剩余數(shù)據(jù)重新計算。將第二次所得平均值與標(biāo)準(zhǔn)差作為該批質(zhì)控血漿的定值,并以此為質(zhì)控圖的中心線。(注:本批次質(zhì)控品定值過程中未發(fā)現(xiàn)離群值)

        1.2 .3檢測 所用試劑在有效期內(nèi)使用。每天從冷凍室取1支質(zhì)控血漿室溫解凍10分鐘,并于半小時內(nèi)隨當(dāng)日臨床標(biāo)本同樣檢測PT、APTT、TT、Fg。收集滿20個測量值作為該月的質(zhì)控數(shù)據(jù),計算出該月數(shù)據(jù)的平均數(shù)、標(biāo)準(zhǔn)差和變異系數(shù)并繪制質(zhì)控圖(Levey-Jenning曲線);四個月的質(zhì)控過程(80個測量值)實際共用時110天。

        1.2 .4統(tǒng)計方法 t檢驗。

        2 結(jié)果 見表1。

        表1 每月測量均值與血漿之定值作比較(n=20,x±s)

        3 討論

        3.1 從表1得知:將不同月份的質(zhì)控結(jié)果分別與血漿的定值用t檢驗作比較,發(fā)現(xiàn)APTT和TT在2個月內(nèi)無顯著性差異(P>0.05),PT在 3個月內(nèi)無顯著性差異,F(xiàn)g在4個月內(nèi)均無顯著性差異(P>0.05),而APTT和 TT保存至 3個月,PT至4個月有顯著性差異(P<0.05)。但這明顯更長于毛和香等[1]和劉玲等[2]報道質(zhì)控血漿穩(wěn)定性為20天,而葛學(xué)順[3]報道的穩(wěn)定長達(dá)4個月,我室之Fg與其相似,而APTT、PT、TT三個項目則更短,可能是葛學(xué)順在血漿中加了疊氮鈉(5g/L)防腐有關(guān),而他們在冰凍血漿融化時主張在37℃,但我們在室溫 (26±2℃)解凍,讓凝血因子逐步恢復(fù)活性后測量,并未發(fā)現(xiàn)影響結(jié)果。PT、TT測量值隨貯存時間延長而逐漸增大,并呈階段性、比例性下降,這與凝血因子活性逐漸減低相關(guān),APTT理論上也應(yīng)如此,但第三月比第四月反而更高,可能與半自動儀器操作隨機誤差相關(guān)。

        3.2 由于凝血檢驗在臨床上廣泛應(yīng)用于手術(shù)前、出凝血疾病的診斷,其結(jié)果準(zhǔn)確性關(guān)系到疾病的診治,而凝血檢查準(zhǔn)確性受諸多因素影響。進行室內(nèi)質(zhì)控是保證其凝血功能結(jié)果的準(zhǔn)確性的重要舉措。我們從臨床標(biāo)本中按一定要求篩查后收集標(biāo)本來制備凝血質(zhì)控血漿:選擇凝血功能檢查正常的標(biāo)本即可排除疾病和藥物等因素所致凝血因子活性改變,而在無菌瓶內(nèi)混勻分裝于密閉的子彈頭后保存于-20℃目的是為了減少細(xì)菌污染有利于凝血因子活性的穩(wěn)定。本方法制取質(zhì)控品直接從臨床標(biāo)本中收集無需特意抽健康人群的血液,使質(zhì)控血漿更簡單易得,且每20個測量值即繪制1張Levey-Jenning質(zhì)控圖更符合臨床上室內(nèi)質(zhì)控習(xí)慣。

        3.3 因質(zhì)控血漿來源多人標(biāo)本,且未測傳染性標(biāo)志物如HbsAg、抗-HIV等,應(yīng)視為傳染性標(biāo)本對待,操作者應(yīng)注意生物危害,注意防護。

        3.4 目前市場上所售凝血檢查質(zhì)控品大多為進口,價格太貴,讓許多科室尤其在基層醫(yī)院難于承受,使凝血項目室內(nèi)質(zhì)控難于開展,沒有室內(nèi)質(zhì)控的實驗檢查是醫(yī)院安全隱患之一。筆者認(rèn)為:無論出于保護患者利益還是醫(yī)院利益,開展凝血項目室內(nèi)質(zhì)控都非常重要。我們所用的凝血項目室內(nèi)質(zhì)控方法,具有簡單,經(jīng)濟、實用,適合全自動和半自動血凝儀,尤其適合基層醫(yī)療單位使用。

        [1]毛和香,李良瓊,等.PT、TT、APTT自制質(zhì)控血漿穩(wěn)定性的探討.現(xiàn)代檢驗醫(yī)學(xué)雜志,2005,3(20):81.

        [2]劉 玲,葉 勇,等.用混合血漿作PT和APTT與TT質(zhì)控物探討.中華新醫(yī)學(xué),2002,3(4):376~377.

        [3]葛學(xué)順.常規(guī)凝血檢查室內(nèi)質(zhì)控血漿的制備與評價.檢驗醫(yī)學(xué)與臨床,2007,3(4):184.

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