沈曉君,蔡廣知,齊晉楠,孫全樂,貢濟宇

(長春中醫(yī)藥大學,吉林長春130117)

近年來,人們越來越關注中藥的安全性,由于環(huán)境的影響,動物及植物可能對重金屬富集,中藥中重金屬普遍存在。據(jù)報道,鉛(Pb)、鎘(Cd)、砷(As)、銀(Ag)、汞(Hg)、錫(Sn)等重金屬會引起身體各部分的病變,神經(jīng)系統(tǒng)、血液系統(tǒng)、皮膚病,甚至引起肺病的發(fā)生,因而嚴格控制中藥中重金屬的含量已成為中藥走向世界的一個亟待解決的問題[1-3]。人參、細辛、五味子、黃芪等作為吉林省的主要道地藥材,在國內(nèi)外都有較大影響,因此測定其中的重金屬含量,對于更好地利用吉林省藥材資源,具有重要的現(xiàn)實意義。實驗選擇人參、龍膽草等7種吉林省道地藥材,試圖建立一個簡單可靠的檢測方法,為中藥中重金屬的監(jiān)控提供參考[4-7]。

1 實驗材料

1.1 儀器與藥品 TU-1810紫外分光光度計(北京普析通用公司);萬分之一電子天平(梅特勒-托利多上海公司);ZDJ-4A型自動電位滴定儀;箱式馬福爐(上海錦屏儀器儀表有限公司);所用試劑均為優(yōu)級純(北京化工儀器廠);各種藥材均購自長春市中藥材股份有限公司;硝酸鉛對照品由天津市福晨化學試劑廠提供。

1.2 試液的配制 標準鉛溶液:取硝酸鉛0.159 8 g,置1 L容量瓶中,加稀硝酸10 mL溶解后,加水至刻度,搖勻,作為貯備液;臨用前,精密量取貯備液10 mL,加水稀釋至100 mL,搖勻得標準鉛溶液(相當于10 μ g/mL)。硫化鈉:取5 g硫化鈉,加水10 mL,再加甘油30 mL,溶解后保存在棕色容量瓶中。pH 3.2溶液:用氨試液和稀鹽酸調(diào)節(jié)。實驗用水為二次蒸餾水,其他試劑的配制均參考《中華人民共和國藥典》(2005年版一部附錄)。

2 實驗方法

2.1 標準品溶液和樣品溶液的制備

2.1.1 標準品溶液的制備 取5個10 mL容量瓶,編號為1～5號,分別加入標準鉛溶液0,0.5,1.0, 1.5,2.0 mL,用pH 3.2溶液稀釋至刻度,使pH 3.0～3.5。

2.1.2 空白溶液的制備 取空坩堝,550℃灰化2 h,冷卻后加王水1 mL,水浴蒸干,加3滴HCl及10 mL沸水,水浴加熱2 min,冷卻后加酚酞指示劑1滴,用氨試液調(diào)至微紅色,加稀醋酸2 mL,調(diào)pH 3.0～3.5,定量轉(zhuǎn)移至已備好的50 mL容量瓶中,并稀釋至刻度。

2.1.3 樣品溶液的制備 將藥材粉碎干燥至恒重后,取0.5 g,精密稱定,加硝酸鎂0.5 g置坩堝內(nèi)先炭化30 min,再550℃灰化至完全,冷卻后各加王水1 mL,水浴蒸干,其后同“空白溶液的制備”制作得樣品溶液。

2.2 最大吸收波長的選擇 取標準品液1號和5號及樣品液各2.5 mL,置3個瓶中各加入10 μ L硫化5 min后,以1號作為空白溶液,分別取1號空白溶液,5號為標準品及樣品液在紫外分光光度計上掃描,結果標準品和樣品均在220 nm處出現(xiàn)最大吸收峰,故確定220 nm為最大測定波長。

2.3 方法學考察

2.3.1 標準曲線繪制 將1～5號標準品溶液各加入10 μ L硫化鈉溶液,搖勻,在220 nm波長處測定吸光度,以吸光度為縱坐標,質(zhì)量濃度為橫坐標繪制標準曲線,標準曲線的回歸方程為:A=1.154 6C+ 0.344 3,相關系數(shù)r=0.999 3,表明檢測濃度在0.00～2.00 μ g/mL范圍內(nèi)吸收度線性關系良好。

2.3.2 精密度試驗 分別取上述標準溶液在220 nm處重復測定5次,RSD=0.66%。試驗表明,儀器的精密度良好。

2.3.3 重現(xiàn)性試驗 同一樣品精稱6份,同法制備成樣品溶液進行測定,結果RSD=2.09%,表明該方法具有較高的重現(xiàn)性。

2.3.4 穩(wěn)定性試驗 將制備好的標準溶液和樣品溶液經(jīng)顯色后進行分析,每隔15 min測定吸光度,觀察120 min。結果表明,顯色后120 min內(nèi)吸光度值較為穩(wěn)定。

2.3.5 加樣回收率試驗 取已知重金屬含量的樣品6份,加入適量標準鉛,按上述樣品制備方法和條件進行測定,測得回收率為100.7%(n=5),RSD為1.92%(見表1)。

表1 加樣回收實驗結果

3 實驗結果

樣品中重金屬的測定:取樣品液0.5 mL用 pH3.2的水溶液稀釋至50 mL,加10 μ L硫化鈉溶液,搖勻靜置5 min,220 nm處測定吸光度,平行測定3次計算重金屬的含量(見表2)。

表2 樣品中重金屬含量測定結果(n=3)

4 討論

4.1 硫化鈉最佳用量的影響 硫化鈉的用量直接影響重金屬的測定,且對測定體系的pH也有一定影響。實驗中發(fā)現(xiàn)硫化鈉的用量在5～15 μ L時,吸光度最大且穩(wěn)定,當硫化鈉用量超過15 μ L時,吸光度基本保持不變,說明反應進行完全。故實驗選用10 μ L。

4.2 實驗結果顯示,中藥材中都含有一定量的重金屬,某些藥材中重金屬含量很高,可能和用藥部位和植物對金屬元素的生物富集能力不同有關,另外,中藥材中的重金屬含量和藥材的種類也相關,如:七味吉林省道地藥材的重金屬含量差異均較大。

4.3 與傳統(tǒng)的比色法判斷重金屬的限度相比,紫外分光光度法具有快速、簡便、準確、重現(xiàn)性好等優(yōu)點,大量的實驗結果表明,在同一實驗室操作條件,不同的被測樣品,保持相同的溶液pH值,最大吸收峰的位置和吸光度都非常穩(wěn)定,重現(xiàn)性良好。從加樣回收實驗結果上看(回收率為100.7%,n=6),RSD為1.92%),方法的準確性良好,可用于中藥材實際生產(chǎn)中重金屬的檢測。

[1]何躍華.紫外分光光度法測定中成藥中重金屬的含量[J].中草藥,1998,29(6):387.

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[3]陳穎,陳德峰,汪樹理,等.擬黑多刺蟻氨基酸和營養(yǎng)元素的分析[J].長春中醫(yī)藥大學學報,2008,24(3):257-258.

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