戴軍 陳興年 劉杰

三氯乙烯中毒患者免疫球蛋白及T細(xì)胞亞群的臨床分析

戴軍 陳興年 劉杰

目的了解免疫球蛋白和T細(xì)胞免疫在三氯乙烯中毒發(fā)病中的作用，探討三氯乙烯中毒發(fā)生的免疫學(xué)機(jī)制。方法用免疫球蛋白測(cè)定試劑盒和流式細(xì)胞儀技術(shù)分別對(duì)病例組與對(duì)照組的免疫球蛋白(IgA、IgG和IgM)、T細(xì)胞亞群表面標(biāo)志CD3、CD4和CD8的表達(dá)情況進(jìn)行分析。結(jié)果三氯乙烯中毒患者免疫球蛋白IgM明顯降低(P＜0.01)，CD4和CD8比例明顯升高(P＜0.01)。結(jié)論三氯乙烯中毒患者體內(nèi)存在免疫功能失調(diào)，觀察免疫球蛋白IgM和T細(xì)胞亞群變化有助于判斷病情程度和指導(dǎo)治療。

三氯乙烯中毒；免疫球蛋白；T細(xì)胞亞群

三氯乙烯(trichloroethylene,TCE)為無色易揮發(fā)的液體,在工業(yè)生產(chǎn)中常用作脫脂去污劑、萃取劑、有機(jī)溶劑,廣泛應(yīng)用于金屬部件及電子元件去油污、紡織物的干洗、有機(jī)合成等。職業(yè)接觸三氯乙烯部分人可引起藥疹樣皮炎，伴心、肝、腎等多臟器功能損害,病情兇險(xiǎn),病死率高[1]。我國(guó)三氯乙烯中毒病例數(shù)量大，起病急，易誤診,后果嚴(yán)重,發(fā)病機(jī)制尚未完全清楚，危害極大,已成為職業(yè)危害的新問題。根據(jù)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)結(jié)果及TCE中毒的臨床特點(diǎn),有報(bào)道認(rèn)為TCE中毒與免疫損害密切相關(guān)[2-3]，但目前關(guān)于TCE中毒與免疫損害的報(bào)道很少。本文對(duì)10例TCE中毒患者免疫球蛋白和T細(xì)胞亞群進(jìn)行了測(cè)定和分析，現(xiàn)將結(jié)果報(bào)道如下。

1 對(duì)象與方法

1.1 研究對(duì)象

TCE中毒組10例，均為住院病人，其中男6例，女4例，年齡18～32歲，平均(24.1±4.7)歲，接觸TCE工齡0.5～5個(gè)月。10例患者的診斷均參照《職業(yè)性急性三氯乙烯中毒診斷標(biāo)準(zhǔn)》(GBZ38-2002)確診。健康對(duì)照組為不接觸TCE及其他毒物的健康體檢者，其中男性6例，女性4例，年齡18～31歲，平均(24.7±4.9)歲，與TCE中毒組年齡差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

1.2 標(biāo)本處理

免疫球蛋白分析分別抽取TCE中毒組和健康對(duì)照組靜脈血各5ml,靜置24h后收集血清，-20℃保存。流式細(xì)胞儀分析應(yīng)用靜脈采集外周血(肝素抗凝)2ml，分離淋巴細(xì)胞，調(diào)細(xì)胞濃度為5×105～1×106個(gè)/mL。

1.3 測(cè)定方法

采用免疫比濁法測(cè)定IgA、IgG和IgM；用流式細(xì)胞術(shù)測(cè)定CD3、CD4、CD8及CD4/CD8。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

2 結(jié)果

2.1 TCE中毒組和健康對(duì)照組血清免疫球蛋白的比較

由表1可見，TCE中毒組和健康對(duì)照組IgA和IgG水平無明顯改變，但TCE中毒組血清免疫球蛋白IgM水平明顯低于健康對(duì)照組，差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)。

2.2 TCE中毒組和健康對(duì)照組T細(xì)胞亞群的比較

由表2可見，與健康對(duì)照組相比，TCE中毒組T淋巴細(xì)胞亞群CD4+和CD8+明顯升高(P＜0.01)，而CD3+和CD4+/CD8+雖然有差異，但差異無顯著性(P＞0.05)。

表1 TCE中毒組與對(duì)照組血清免疫球蛋白檢測(cè)

表2 TCE中毒組與對(duì)照組T細(xì)胞亞群檢測(cè)

3 討論

變態(tài)反應(yīng)性疾病是一種與多基因相關(guān)的疾病,其病因?qū)W至今尚不完全清楚。變態(tài)反應(yīng)分為Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ型。Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型屬于體液免疫型變態(tài)反應(yīng), Ⅳ型屬于細(xì)胞免疫型變態(tài)反應(yīng),也稱為遲發(fā)型變態(tài)反應(yīng)。許多學(xué)者認(rèn)為TCE中毒中有Ⅳ型變態(tài)反應(yīng)發(fā)生，如皮膚的急性損害。研究結(jié)果表明，Ⅳ型變態(tài)反應(yīng)性疾病與T淋巴細(xì)胞激活、細(xì)胞因子分泌、其他因素的共同參與密切相關(guān)[4]。本文通過對(duì)10例TCE中毒患者免疫球蛋白IgA、IgM和IgG的檢測(cè)發(fā)現(xiàn)，與對(duì)照組相比，TCE中毒組的IgM水平明顯降低，提示IgM參與了TCE中毒的免疫調(diào)節(jié)，這可能與IgM的早期免疫性有關(guān)。

既往研究表明，免疫調(diào)節(jié)參與了TCE中毒反應(yīng)，如Griffin等[5]用TCE飲水給MRL+/+小鼠染毒時(shí)發(fā)現(xiàn)TCE引起的自身免疫反應(yīng)與T輔助細(xì)胞非特異性活化有關(guān),且長(zhǎng)期接觸TCE可導(dǎo)致TCE免疫反應(yīng)的發(fā)生。但是這些研究許多都是以小鼠等動(dòng)物進(jìn)行研究的，臨床資料比較少見。我們對(duì)10例TCE中毒患者T淋巴細(xì)胞亞群的變化進(jìn)行了觀察，發(fā)現(xiàn)TCE中毒T淋巴細(xì)胞亞群CD4+和CD8+明顯升高，這與Griffin等[5]報(bào)道的結(jié)果一致,提示TCE可通過激活CD4+細(xì)胞的活性增殖，引起TCE接觸者細(xì)胞功能亢進(jìn)，不同淋巴細(xì)胞亞群的數(shù)量和功能異常，可導(dǎo)致機(jī)體免疫紊亂產(chǎn)生病理變化。

綜上所述，三氯乙烯中毒患者體內(nèi)存在免疫功能失調(diào)，觀察免疫球蛋白IgM和T細(xì)胞亞群變化有助于判斷病情程度和指導(dǎo)治療。

[1]劉杰,周良瑤,戴軍,等.三氯乙烯中毒6例的臨床分析[J].職業(yè)與健康,2008,24(19):2026-2027.

[2]蘇素花,翟日洪,農(nóng)康,等.3例三氯乙烯中毒患者免疫損害指標(biāo)的觀察[J].廣西預(yù)防醫(yī)學(xué),2005,11(4):239-241.

[3]張勝,王玉良.三氯乙烯對(duì)接觸者免疫球蛋白水平和脂質(zhì)過氧化作用[J].職業(yè)與健康,2009,25(7):673-675.

[4]Sarah J B,Jason C D,Leah J H,et al.Developmental exposure to trichloroethylene promotes CD4+T cell differentiation and hyperactivity in association with oxidative stress and neurobehavioral deficits in MRL+/+mice[J].Toxicology and Applied Pharmacology,2008,231(3):344-353.

[5]Griffin J M,Blossom S J,Jackson S K,et a1.Trichloroethylene accelerates an autoimmune response by Th1 T cell activation in MRL+/+mice[J].Immunopharmacology,2000,46(2):123-137.

Objective To explore the effects of immunoglobulin and T-lymphocyte subsets on trichloroethylene poisoning, and to investigate the immune mechanisms of pathogenesis of trichloroethylene poisoning. Methods The expression of immunoglobulins (IgA, IgG and IgM) and the expression of CD3, CD4 and CD8 on the T cell surface in patients group and control group were detected by immune globins detection kit andfiow cytometry, respectively. Results The level of IgM significantly decreased in patients with trichloroethylene poisoning(P＜0.01), however, the CD4+T cells and CD8+T cells of patients increased dramatically compared with that of control group(P＜0.01). Conclusion The immune in patients with trichloroethylene poisoning become dysfunction, and the detection of IgM and T-lymphocyte subsets may help to the diagnosis and therapy of trichloroethylene poisoning.

trichloroethylene poisoning; immunoglobulin; T-lymphocyte subsets

10.3969/j.issn.1009-4393.2010.12.026

215007 江蘇省蘇州市第五人民醫(yī)院 (戴軍 陳興年 劉杰)