陳景云

黑龍江省牡丹江市第二人民醫(yī)院檢驗科（157000）

梅毒是由梅毒螺旋體所致的慢性性傳播疾病，是性傳播疾病中危害最嚴重的一種，其主要通過性交、接吻、哺乳等方式進行傳播。臨床上對于梅毒螺旋體的確診主要通過實驗室檢測，目前實驗室常用的檢測方法為不加熱血清反應素實驗（USR）、快速血漿反應素環(huán)狀卡片實驗（RPR）、梅毒螺旋體抗體被動顆粒凝集實驗（TPPA）3種，本文選取牡丹江市第二人民醫(yī)院2009年收集的126份梅毒血清標本進行實驗對比，現(xiàn)報道如下。

1 材料與方法

1.1 材料

對牡丹江市第二人民醫(yī)院2009年1月至12月間收治的126例梅毒患者的血清標本分別進行不加熱血清反應素實驗（USR）、快速血漿反應素環(huán)狀卡片實驗（RPR）、梅毒螺旋體抗體被動顆粒凝集實驗（TPPA）平行檢測。

1.2 試劑

USR試劑由廈門新創(chuàng)提供，PRP試劑由上海榮盛提供，TPPA試劑由日本富士瑞比歐株式會社提供。

1.3 檢測方法

1.3.1 USR法

取待檢血清0.05mL，加于玻片上的圓圈中，并分散到整個圓圈。用1mL注射器上專用針頭吸取抗原，每份待檢標本上滴加1滴，搖動玻片，4min后觀察結果。

結果判定：陽性（4+～3+）：肉眼可看到大的或較大的塊狀物；陽性（2+）：肉眼可見小塊狀物，在顯微鏡下可見較大的塊狀物，懸液清亮；陽性（1+）；在顯微鏡下可見小塊狀物，均勻分布，為弱陽性；可疑（±）：顆粒分布不規(guī)則，或為細小的粗糙物；陰性（－）：顆粒細小，分布均勻。

1.3.2 RPR法

取待檢血清0.05mL，加入卡片上圓圈內(nèi)，并分散到整個圓圈。在每份血清上滴加一滴RPR抗原。旋轉搖動器皿8min，立即用肉眼觀察結果。

結果判定：陽性：可見明顯黑色凝集顆?；蛐跗?。

1.3.3 TPPA法

①在微量反應板的第1孔加入標本稀釋液100μL，從第2～4孔每孔加25μL。②用微量加樣器取標本25μL至第1孔中，然后以2n的方式從第1孔稀釋至第4孔。③用滴管在第3孔中滴入1滴（25μL）未致敏粒子，在第4孔中滴入1滴（25μL）致敏粒子。④用微量振蕩器混合30s，加蓋后于室溫（15～30℃）下水平靜置。2h后觀察結果。

結果判定：陰性：粒子成紐扣狀聚集，呈現(xiàn)出外周邊緣均勻且平滑的圓形；弱陽性：粒子形成小環(huán)狀，呈現(xiàn)出外周邊緣均勻且平滑的圓形；陽性：粒子環(huán)明顯變大，其外周邊緣不均勻且雜亂地凝集在周圍。

2 結 果

經(jīng)3種不同檢測方法平行檢測126份梅毒血清，檢測陽性率分別為：USR法73.8%（93/126），RPR法76.2%（96/126），TPPA法100%（126/126）。前二者之間比較差異不大（P＞0.05），前二者與后者比較差異均顯著（P＜0.05），具有統(tǒng)計學意義。

3 討 論

故近年來推出換代產(chǎn)品TPPA試驗。TPPA以純化的梅毒螺旋體抗原致敏惰性的人工明膠顆粒替代TPHA試驗中的致敏紅細胞，使結果更為穩(wěn)定，敏感性和特異性也得到進一步提高[1]。TPPA檢測的是梅毒螺旋體特異性抗體，包括IgM型和IgG型，可作為梅毒的確證試驗，但不適合用作治療效果的監(jiān)測。RPR其反應效價與病變活動有關，據(jù)有關文獻報道[2]。RPR抗原是吸附于活性炭的類脂質抗原。試驗在特制的白色紙卡上進行。陽性反應時，在白色底板上出現(xiàn)黑色的凝集顆粒或絮片，結果容易判斷。肉眼觀察，不需用顯微鏡，更易掌握和推廣。USR法采用的是改良的VDRL抗原。將該抗原用稀釋液稀釋后離心沉淀，于沉淀中加入EDTA、氯化膽堿和防腐劑。EDTA可使抗原在半年內(nèi)不變性，氯化膽堿可起化學“滅活”作用（滅活補體）。后兩者實驗方法簡單、方便、經(jīng)濟，對于梅毒的普查十分適合，但遇可疑病例仍須經(jīng)TPPA檢測確定。

[1] 王育瑛,趙文波.TPPA和RPR聯(lián)合檢測梅毒抗體的實驗研究[J].浙江中醫(yī)藥大學學報,2009,33(4):488-489.

[2] 楊建蘭,郎亦波.不同血清學診斷方法檢測梅毒螺旋體的結果分析[J].臨床和實驗醫(yī)學雜志,2009,8(5):90-91.