劉 軍 孫淑杰 馬吉芳

遼寧省遼陽(yáng)市中心醫(yī)院檢驗(yàn)科（111000）

近年來(lái)隨著廣譜抗菌藥物、免疫抑制劑和抗腫瘤藥物的廣泛應(yīng)用，臨床深部真菌感染增多且復(fù)雜，在醫(yī)院感染中占重要地位，引起臨床極大重視。對(duì)深部真菌感染治療成敗的關(guān)鍵在于早期診斷。傳統(tǒng)的微生物分離、培養(yǎng)與鑒定需要時(shí)間較長(zhǎng)。有關(guān)研究表明，除結(jié)核菌外，所有真菌的細(xì)胞膜上都含有（1-3）-β-D葡聚糖，而其它微生物、動(dòng)物及人的細(xì)胞成分和細(xì)胞外液都不含這種成分，因此在機(jī)體的體液中檢測(cè)到（1-3）-β-D葡聚糖是診斷深部真菌感染的有效依據(jù)[1]。本研究應(yīng)用MB-80微生物快速動(dòng)態(tài)檢測(cè)系統(tǒng)，檢測(cè)了正常健康人群及深部真菌感染患者的血漿（1-3）-β-D葡聚糖含量，探討其臨床意義。

1 材料與方法

1.1 病例選擇

深部真菌感染患者120例，年齡8～70歲，來(lái)自遼陽(yáng)市中心醫(yī)院2009年1月至2009年11月住院患者，均經(jīng)培養(yǎng)證實(shí)存在深部真菌感染，感染部位包括呼吸道、泌尿道、血液及靜脈插管引起的系統(tǒng)性感染。正常健康對(duì)照組50人，來(lái)自遼陽(yáng)市中心醫(yī)院體檢中心。

1.2 儀器與試劑

MB-80微生物快速動(dòng)態(tài)檢測(cè)系統(tǒng)、T01智能恒溫儀、冰浴槽以及真菌（1-3）-β-D檢測(cè)試劑盒均由北京金山川科技發(fā)展有限公司提供。

1.3 血漿（1-3）-β-D葡聚糖檢測(cè)方法

1.3.1 血漿樣品制備

用含有少許無(wú)菌抗凝劑（肝素鈉）的一次性采血管采取靜脈血1～2mL，緩慢放入無(wú)熱原離心管中，用滅菌鋁箔封閉管口以防污染，然后進(jìn)行3000rpm/min離心60s，分離得富血小板血漿，取出后立即放入冰水浴中，取上述富血小板血漿0.05mL，加入裝有0.45mL樣品處理液中，混勻后70℃保溫10min，取出后立刻放入冰水浴中，即為待測(cè)血漿樣品。

1.3.2 測(cè)定分析

取待測(cè)血漿0.2mL直接加入反應(yīng)主劑中，溶解后使用微量加樣器轉(zhuǎn)移至10ram×75mm標(biāo)準(zhǔn)玻璃反應(yīng)管中，插入MB-80微生物快速動(dòng)態(tài)檢測(cè)系統(tǒng)中進(jìn)行反應(yīng)，反應(yīng)結(jié)束后由標(biāo)準(zhǔn)曲線自動(dòng)計(jì)算出待測(cè)血漿中（1-3）-β-D葡聚糖含量。操作過程中注意避免微生物及細(xì)菌污染。

1.4 統(tǒng)計(jì)分析

測(cè)定結(jié)果用t檢驗(yàn)進(jìn)行分析。

2 結(jié) 果

正常對(duì)照組血漿（1-3）-β-D葡聚糖含量最高為7.18pg/mL，最低為0.38pg/mL，平均值為（2.79±2.46）pg/mL；深部真菌感染組血漿（1-3）-β-D葡聚糖含量最高159.8pg/mL，最低為13.85pg/mL，平均值為（49.05±31.13）pg/mL。經(jīng)t檢驗(yàn)分析，對(duì)照組與深部真菌感染組（1-3）-β-D葡聚糖平均值差異非常顯著（t=7.536，P＜0.001）。

3 討 論

近年來(lái)，深部真菌感染的發(fā)病率隨著廣譜抗生素和免疫抑制劑的應(yīng)用呈逐年上升趨勢(shì)，由于缺少有效的早期診斷手段，其病死率也居高不下。真菌培養(yǎng)的確可為臨床提供最為直接的診斷依據(jù)，但培養(yǎng)方法耗時(shí)長(zhǎng)，不適宜用作早期診斷。葡聚糖廣泛存在于真菌細(xì)胞壁中，占其干燥重量的80%～90%。由于（1-3）-β-D葡聚糖廣泛存在于真菌的細(xì)胞壁中，當(dāng)真菌進(jìn)入人體血液或深部組織后，經(jīng)吞噬細(xì)胞的吞噬、消化等處理后，（1-3）-β-D葡聚糖可從細(xì)胞壁中釋放出來(lái)，從而使血液及其他體液（如尿、腦脊液、腹水、胸水等）中（1-3）-β-D葡聚糖含量增高。當(dāng)真菌在體內(nèi)含量減少時(shí)，機(jī)體免疫可迅速清除（1-3）-β-D葡聚糖。而在淺部真菌感染中，（1-3）-β-D葡聚糖未被釋放出來(lái)，故其在體液中的量不增高[2,3]。血清葡聚糖檢測(cè)可在擬診早期為臨床醫(yī)師提供機(jī)體是否感染真菌的可靠信息，因此血清葡聚糖含量檢測(cè)不失為一種實(shí)用的真菌感染早期診斷方法。

[1]廖軍,郝飛.深部真菌感染血清真菌成分檢測(cè)方法研究進(jìn)展[J].國(guó)外醫(yī)學(xué)·臨床生物化學(xué)與檢驗(yàn)學(xué)分冊(cè),2002,23(2):85-86.

[2]張建芳,徐修禮,樊新等.深部真菌感染患者血漿(1-3)-β-D葡聚糖檢測(cè)的臨床意義[J].中華醫(yī)院感染學(xué)雜志,2005,15(3):354-355.

[3]聞平,郭月芳.深部真菌感染患者血清葡聚糖檢測(cè)的臨床意義[J].中國(guó)誤診學(xué)雜志,2003,3(1):10-11.