赫曉燕，劉丹丹，曹 靖，郝歡慶，邢海權(quán)

（山西農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科技學(xué)院，太谷 030801）

哺乳動(dòng)物的胎盤是胎兒和母體之間進(jìn)行物質(zhì)交換的臨時(shí)性器官，因其特殊的屏障功能與內(nèi)分泌功能，自古以來(lái)就為人們所重視，中醫(yī)將經(jīng)過(guò)簡(jiǎn)單加工和炮制后的人胎盤稱為“紫河車”，被認(rèn)為有養(yǎng)血、益氣、補(bǔ)精、滋腎、助孕之功效，具有藥用價(jià)值。近年來(lái)，人們對(duì)胎盤的研究逐步深入，已由過(guò)去單一的人胎盤研究擴(kuò)展到羊、鹿、牛、豬等動(dòng)物的胎盤［1］，研究各種動(dòng)物的胎盤在畜牧業(yè)生產(chǎn)中具有重要意義。羊駝是我國(guó)近年來(lái)新引進(jìn)的一種經(jīng)濟(jì)和生態(tài)價(jià)值很高的經(jīng)濟(jì)動(dòng)物，它們對(duì)不良環(huán)境和疾病有強(qiáng)大的抵抗力，羊駝胎盤中所含的有益成分值得關(guān)注，到目前為止，國(guó)外僅部分學(xué)者對(duì)羊駝胎盤的結(jié)構(gòu)有過(guò)研究［2-4］，但其中有很多問(wèn)題未涉及到。本實(shí)驗(yàn)擬對(duì)羊駝胎盤的大體結(jié)構(gòu)和組織結(jié)構(gòu)進(jìn)行系統(tǒng)研究，旨在為研究羊駝胎盤的功能和再利用提供形態(tài)學(xué)基礎(chǔ)。

1 材料和方法

1.1 材料 來(lái)自山西農(nóng)業(yè)大學(xué)中華羊駝養(yǎng)殖基地的足月正常分娩、產(chǎn)后自然排出的胎盤，共4只。

1.2 方法 羊駝生產(chǎn)后，一方面觀察產(chǎn)下的胎盤的顏色、厚度、質(zhì)地，同時(shí)立即取小塊組織固定于10%甲醛溶液中，按常規(guī)方法制成石蠟切片，片厚5 μm，HE染色，光學(xué)顯微鏡下觀察。

2 結(jié)果

2.1 羊駝胎盤外觀 肉眼觀察，羊駝胎盤呈彎曲的鉤狀囊，絨毛散布于胎盤表面，排出的尿囊中充滿尿液，羊膜隨胎盤排出，為白色的薄膜，卵黃囊退化，只留少量痕跡，除此之外，剛產(chǎn)下的新生兒羊駝的軀干、頭部、頸部和四肢表面覆蓋著一種不透明的白色膜，稱表皮膜或上皮膜（epidermal membrane，EM），厚度為1～2 mm。表皮膜緊貼于新生兒羊駝皮膚與黏膜交界處，如嘴唇、鼻孔、肛門、陰門、陰莖、包皮等處，也緊貼于皮膚與足墊連接處、蹄冠及臍帶等處，并且在這些部位EM明顯增厚。新生兒羊駝產(chǎn)出后，迅速?gòu)奶罕砻鎸M剝離，足月胎兒的EM是纖維性的，很容易從新生兒表面脫落，甚至輕輕地動(dòng)作或摩擦，EM會(huì)很快干燥并且脫落。

2.2 羊駝胎盤的顯微結(jié)構(gòu)

2.2.1 表皮膜（EM） 光鏡下可見(jiàn)，EM屬?gòu)?fù)層扁平上皮，表層和中間層細(xì)胞均呈扁平鱗片狀。正面觀，上皮細(xì)胞為多邊形，體積較大，細(xì)胞界限清晰，邊緣為鋸齒狀，很多細(xì)胞中央有核，核為圓形，淡染，有些核中央可見(jiàn)到明顯的核仁，細(xì)胞質(zhì)淡染，呈空網(wǎng)狀（圖1）。側(cè)面觀，表皮膜由多層扁平細(xì)胞構(gòu)成，很多細(xì)胞中央可見(jiàn)扁平的核。

2.2.2 羊膜和尿囊 光鏡下觀察，羊駝羊膜為一很薄的膜，表層有一層排列較緊密的扁平細(xì)胞，深層為結(jié)締組織，淺層為較薄的致密結(jié)締組織，可見(jiàn)長(zhǎng)梭形的成纖維細(xì)胞，深層為疏松的結(jié)締組織膜（圖2）。

圖1 羊駝表皮膜正面觀（HE）40×

圖2 羊駝羊膜光鏡結(jié)構(gòu)（HE）400×

羊駝的羊膜和尿囊膜的結(jié)構(gòu)類似于其他哺乳動(dòng)物。沒(méi)有“自由”的膜，整個(gè)胎盤被絨毛和滋養(yǎng)層覆蓋著。通常在尿囊會(huì)發(fā)現(xiàn)尿囊小體。

2.2.3 絨毛膜 光鏡下可見(jiàn)許多大小不等、形態(tài)不一的絨毛斷面，有些部位的絨毛呈塊狀，絨毛表面的滋養(yǎng)層細(xì)胞大部分呈柱狀或立方形，但有些部位為扁平細(xì)胞，大量的毛細(xì)血管侵入滋養(yǎng)層上皮（圖3A、B、C）。在一些絨毛的頂端可見(jiàn)體積較大的、多核的巨大細(xì)胞，這些細(xì)胞形態(tài)不規(guī)則，內(nèi)有3～5個(gè)大細(xì)胞核（圖4A、B）。

圖3 羊駝絨毛膜的絨毛及滋養(yǎng)層上皮細(xì)胞

圖4 羊駝絨毛頂端的巨大細(xì)胞

3 討論

3.1 羊駝胎盤的結(jié)構(gòu)特征 經(jīng)學(xué)者對(duì)單峰駝、雙峰駝、美洲駝（llama）和羊駝等的研究認(rèn)為，駱駝科動(dòng)物的胎盤與豬和馬相似，屬上皮絨毛膜胎盤，胎膜包括絨毛膜、卵黃囊、尿囊、羊膜及特有的表皮膜［2－5］，我們對(duì)羊駝胎盤的肉眼和組織學(xué)觀察結(jié)果與此相符。

羊駝所特有的胎膜是上皮膜，它由鱗狀上皮構(gòu)成，這種膜被認(rèn)為是來(lái)自于胎兒表皮，其功能不清［6］。表皮膜（epidermal membrane，EM）是駱駝科動(dòng)物所特有的，一般易與羊膜混淆［7－8］。因?yàn)镋M沒(méi)有覆蓋鼻孔或嘴，所以即使出生后沒(méi)有立即移走新生兒的EM，也很少造成新生兒的產(chǎn)后窒息，這與羊膜形成對(duì)照。在大多數(shù)哺乳動(dòng)物羊膜可能完全覆蓋住鼻子和嘴，使其窒息幾乎不能掙扎。Steven等（1980）描述羊駝羊膜上皮由成層的鱗狀上皮組成，有6～8層［2］。Fowler觀察到EM由很厚的一層復(fù)層鱗狀上皮細(xì)胞構(gòu)成，外層為角化層，細(xì)胞界限清晰，但沒(méi)有細(xì)胞核，膜上沒(méi)有彈性纖維，組織化學(xué)技術(shù)顯示，二硫化物和巰基是很豐富的［3］，但本實(shí)驗(yàn)所觀察的EM切片中的很多細(xì)胞有細(xì)胞核，這些有核細(xì)胞與無(wú)核細(xì)胞在功能上是否有別還有待于研究。

神經(jīng)胚形成之后，覆蓋胚胎表面的細(xì)胞構(gòu)成預(yù)定表皮。開(kāi)始，表皮只由一層細(xì)胞組成，但在多數(shù)脊椎動(dòng)物中，表皮很快成為兩層結(jié)構(gòu)，外面一層形成胚皮（periderm），胚皮是臨時(shí)性結(jié)構(gòu)，一旦底層細(xì)胞分化成表皮，胚皮便脫落［8］，羊駝的EM是否是未脫落的胚皮及其功能有待于進(jìn)一步研究。

絨毛膜滋養(yǎng)層細(xì)胞大部分是單核細(xì)胞，它們可能參與母—胎物質(zhì)交換的大部分過(guò)程，另外從妊娠后2個(gè)月直到分娩可見(jiàn)許多形狀不規(guī)則的多核滋養(yǎng)層細(xì)胞［4－5］。我們的研究顯示在娩出的羊駝胎盤的絨毛頂端也有許多滋養(yǎng)層多核巨大細(xì)胞。Gorkhovskii等認(rèn)為這些巨大細(xì)胞是由于核內(nèi)有絲分裂形成的多倍體，并推測(cè)它們有內(nèi)分泌功能［9］。Skidmore等發(fā)現(xiàn)在小的、著床的樣本中，這些巨大細(xì)胞位于腺體的頂部，但認(rèn)為其功能不清［5］。Wooding等則認(rèn)為這些巨大細(xì)胞可表達(dá)類固醇生成酶［10］。Klisch等用光鏡、電鏡觀察和Feulgen染色等方法研究了妊娠150 d、264 d、347 d和足月的羊駝胎盤的滋養(yǎng)層多核巨大細(xì)胞，認(rèn)為羊駝滋養(yǎng)層多核巨大細(xì)胞有絲分裂時(shí)DNA含量的增加是由于染色體多倍體化而不是核內(nèi)復(fù)制，羊駝滋養(yǎng)層多核巨大細(xì)胞中的染色體增殖具有高水平的多倍體化性質(zhì)而不同于其他物種的動(dòng)物，但他并沒(méi)有研究這種細(xì)胞的功能［11］。本實(shí)驗(yàn)中我們只觀察了這種多核巨大細(xì)胞，在以TGF－β1、GH、PRL作為一抗，以胎盤為組織進(jìn)行免疫組織化學(xué)染色時(shí)，這種多核巨大細(xì)胞沒(méi)有陽(yáng)性細(xì)胞出現(xiàn)，提示了與其他滋養(yǎng)層細(xì)胞相比，這種細(xì)胞內(nèi)分泌功能的有限性。但有關(guān)羊駝滋養(yǎng)層多核巨大細(xì)胞的功能有待于進(jìn)一步研究。

羊駝絨毛膜滋養(yǎng)層的另一個(gè)特點(diǎn)是滋養(yǎng)層上皮有豐富的毛細(xì)血管，血管深陷在兩層上皮之間。據(jù)Steven等的觀察、測(cè)量，兩個(gè)血管之間的距離降至2 μm［2］。有學(xué)者評(píng)論這種現(xiàn)象并且推測(cè)這對(duì)于高海拔地區(qū)胎兒的發(fā)育是很有益的。然而，這種情況也發(fā)生在海平面或單、雙峰駝，因此推測(cè)這種情況并不是由于低氧壓所引起的。

4 結(jié)論

利用肉眼、光學(xué)顯微鏡觀察羊駝胎盤，羊駝胎盤的類型同其他駱駝科動(dòng)物的胎盤，屬上皮絨毛膜胎盤，胎膜包括絨毛膜、卵黃囊、尿囊、羊膜及特有的表皮膜。絨毛膜細(xì)胞的頂端也有巨型多核細(xì)胞；表皮膜由多層扁平細(xì)胞構(gòu)成，與其他學(xué)者研究不同的是，我們發(fā)現(xiàn)很多外層細(xì)胞中央有扁平的細(xì)胞核，但其功能不清。

［1］張淑二，陶勇，張運(yùn)海，等.胎盤的有效成分及其應(yīng)用［J］.動(dòng)物醫(yī)學(xué)進(jìn)展，2007，28（9）.

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