張春復(fù) 申野 段大航
虎杖中游離蒽醌類化合物提取工藝條件優(yōu)化研究
張春復(fù) 申野 段大航
目的 通過實(shí)驗(yàn)研究提取虎杖游離蒽醌的最佳工藝條件。方法 選用提取時間、提取溫度、提取次數(shù)和加水倍數(shù)作為考察因素,采用工藝流程從虎杖中提取游離蒽醌類物質(zhì),通過正交表試驗(yàn),篩選虎杖游離蒽醌的提取工藝條件。結(jié)果 虎杖游離蒽醌提取最佳條件為乙醇濃度70%,提取溫度為90℃,提取時間為2.0 h,料液比為1:20。結(jié)論 通過正交試驗(yàn)優(yōu)化提取虎杖游離蒽醌的工藝條件能夠得到最佳效果。
虎杖;蒽醌類化合物;正交實(shí)驗(yàn)
虎杖又名酸湯桿,為蓼科植物虎杖(Polygonum cuspidatuSieb.et Zucc)的根莖和根[1]?;⒄戎泻坞x蒽醌及蒽醌苷,主要包括大黃酸、大黃酚、大黃素、大黃素甲醚等,具有抗菌、消炎、致瀉、利尿以及抗腫瘤、抗病毒等作用,臨床上用于治療高血脂癥、肝炎、燒傷、燙傷等疾病[2]。對虎杖中有效成分藥理作用的研究是目前中藥研究的熱點(diǎn),有較多有效成分含量和總蒽醌提取研究的報(bào)道,但很少有系統(tǒng)的優(yōu)化提取虎杖中游離蒽醌類化學(xué)成分的工藝研究。故本文通過系統(tǒng)的優(yōu)化虎杖中游離蒽醌的提取條件,為進(jìn)一步研究虎杖提取物的藥理活性奠定基礎(chǔ)。
1.1 儀器 UV分光光度計(jì)(Varian Cary 100),自動平衡微型離心機(jī)(Beckman coulter Allegra X-22),凍干機(jī)(SIM ALPHA 1-4/LD-2)。
1.2 藥品 干躁虎杖,購于吉林市。
將虎杖粉碎,過30目分樣篩。準(zhǔn)確稱取20 g虎杖粗粉,放入索氏提取器的提取筒中,接受瓶內(nèi)裝入乙醇,水浴,回流,得到的液體為總游離蒽醌粗提取液,然后減壓蒸餾,回收乙醇,將得到的類似糖漿狀物體置于烘箱60℃烘干,得到粉紅色粉末。將此粉末放入索氏提取器中用乙醚提取2 h,至乙醚接近無色。將乙醚提取物不斷振蕩均勻后靜置,上層乙醚溶液傾入三角燒瓶,瓶內(nèi)剩余黏稠液體再加10 ml乙醚,同時加2滴丙酮,振搖,放置,將溶液轉(zhuǎn)移至三角燒瓶同法操作3次。乙醚溶液中即含有高濃度的游離蒽醌[3]?;厥找颐眩?0℃烘干,稱重,計(jì)算總蒽醌得率。
表1 指標(biāo)及水平
表2 正交試驗(yàn)結(jié)果
根據(jù)單因素試驗(yàn)結(jié)果,選用乙醇濃度(A)、提取溫度(B)、提取時間(C)及料液比(D)作為考察因素,以提取液中 總蒽醌含量為考察指標(biāo),選用正交表試驗(yàn)。因素水平見表1。
表3 方差分析表
由表3可知,在虎杖游離蒽醌提取率的影響因素中,乙醇濃度(A)、提取溫度(B)對虎杖游離蒽醌得率有顯著性影響,C、D因素的影響不顯著,四因數(shù)的影響順序依次為:乙醇濃度(A)>提取溫度(B)>提取時間(C)>料液比(D)。在這四個因素中,乙醇濃度和提取溫度對提取效果的影響最大,均達(dá)到顯著水平(P<0.05);提取時間影響其次;料液比影響最小。由此可以得出,提取虎杖游離蒽醌的最佳工藝條件是:A2B1C1D3,即乙醇濃度70%,提取溫度為90℃,提取時間為2.0 h,料液比為1:20。有研究顯示灌胃給藥(100,200,400 mg/kg),虎杖總蒽醌提取物對小鼠自主活動無明顯影響,而對小鼠閾下劑量戊巴比妥鈉催眠具有協(xié)同作用,麻醉犬經(jīng)十二指腸給藥(20,40,80 mg/kg)對麻醉犬的血壓、心率、心電圖、呼吸頻率和深度無明顯影響[4]。
[1] 南京中醫(yī)藥大學(xué)編著.中藥大辭典.上??茖W(xué)技術(shù)出版社,2006.
[2] 張喜云.虎杖的化學(xué)成分藥理作用與提取分離.天津藥學(xué),1999,(3):13-14.
[3] 陸豫,黃志紓,馬林,等.虎杖中主要蒽醌的提取分離及HPLC分析測定.應(yīng)用化學(xué),2004,(5):433-436.
[4] 朱彬,李鳳新,郜欣,等.虎杖總蒽醌提取物一般藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)研究.東北師大學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版),2009,41(2):160-163.
132000 吉林省吉林市鹿王制藥股份有限公司(張春復(fù));北華大學(xué)醫(yī)學(xué)部(申野 段大航)
·論著·