孫晶秋

[關(guān)鍵詞] 糖尿??；酮癥酸中毒；生化檢測(cè)；意義

[中圖分類號(hào)]R446.112 [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] B[文章編號(hào)] 1673-7210（2009）06（b）-066-01

近年來(lái)隨著人民生活水平的提高，糖尿病發(fā)病率也逐年上升，隨之由于各種因素引起的并發(fā)癥也相繼增多。糖尿病酮癥酸中毒是糖尿病一種嚴(yán)重急性并發(fā)癥，由于其病情常較重，如不及時(shí)搶救會(huì)危及患者生命，為了及時(shí)、準(zhǔn)確判斷病情，非常需要一個(gè)高靈敏度且特異性強(qiáng)的指標(biāo)，D-3-羥丁酸的測(cè)定不僅滿足了上述要求，而且還可作為糖尿病昏迷的診斷及鑒別診斷指標(biāo)。筆者在自動(dòng)生化分析儀上，在340 nm下進(jìn)行連續(xù)監(jiān)測(cè)，操作簡(jiǎn)單，迅速可得結(jié)果，精密度好，線性范圍較寬，適合于各種自動(dòng)生化分析儀，建立了適合于臨床應(yīng)用及自動(dòng)生化分析儀的方法和參考值。

1 材料與方法

1.1 原理

D-3-羥丁酸+NAD+3-羥丁酸脫氫酶乙酰乙酸+NADH 在340 nm處有最大吸收峰，此波長(zhǎng)下的吸光度變化與D-3-羥丁酸的濃度成正比。

1.2 材料

100 mmol/L Tris緩沖液，pH 8.5；NAD 2.5 mmol/L，3-HBDH 0.12 U/ml；標(biāo)準(zhǔn)液1 mmol/L（Randox公司）；血糖異常患者及正常人空腹采血，離心，取血清備用。日立7170全自動(dòng)生化分析儀。

1.3 方法

7170分析儀主要參數(shù)：標(biāo)準(zhǔn)液濃度S1∶0，S2∶1.0，樣品：4.0 μl，試劑：200μl，測(cè)試方法：兩點(diǎn)速率法，副/主波長(zhǎng)700/340，測(cè)定點(diǎn)（3）、（10）。

2 結(jié)果

2.1 線性范圍

取D-3-羥丁酸值高于5.8 mmol/L的標(biāo)本，制成混合高值血清，配成不同稀釋度測(cè)定，相關(guān)系數(shù)r=0.987，說(shuō)明在0～5.8 mmol/L范圍內(nèi)，本法具有很好的線性。

2.2 精密度

取正常體檢混合血清標(biāo)本，在1 d內(nèi)重復(fù)測(cè)定20次，求得批內(nèi)精密度，均值X=0.20 mmol/L，標(biāo)準(zhǔn)差s=0.008 2，變異系數(shù)CV=4.1%；將該標(biāo)本連續(xù)測(cè)定5 d，每天測(cè)10次，求得批間精密度，X=0.20 mmol/L，s=0.012 2，CV=6.1%。說(shuō)明本方法重復(fù)性好，精密度較高。

2.3 干擾實(shí)驗(yàn)

對(duì)高濃度膽紅素（0.23 g/L），三酰甘油（8 g/L），血紅素（10 g/L）標(biāo)本進(jìn)行測(cè)定，沒(méi)有發(fā)現(xiàn)對(duì)測(cè)定結(jié)果有影響，說(shuō)明至少在此濃度下的標(biāo)本不受干擾。Fe3+（100 μmol/L）、Ca2+（8.2 mmol/L）對(duì)測(cè)定無(wú)干擾。

2.4 實(shí)驗(yàn)穩(wěn)定性

取1份正常體檢血清標(biāo)本置于4℃冰箱，連續(xù)測(cè)定6 d，CV=5.2%，說(shuō)明至少可穩(wěn)定6 d。

2.5 參考值

取健康體檢血清50份，按上述方法檢測(cè)D-3-羥丁酸，所得范圍為（0.16±0.12） mmol/L。

3 討論

D-3-羥丁酸可反映體內(nèi)酮體的情況和酸中毒的真實(shí)情況，在糖尿病酮癥酸中毒的治療過(guò)程中監(jiān)測(cè)血D-3-羥丁酸的變化，可準(zhǔn)確了解酮癥酸中毒的治療效果[1]。以往由于不能常規(guī)進(jìn)行D-3-羥丁酸定量測(cè)定，而是先測(cè)尿糖和尿酮體，陽(yáng)性之后才用酮試紙進(jìn)行半定量試驗(yàn)，試驗(yàn)時(shí)須將血漿進(jìn)行系列稀釋后檢測(cè)，既繁瑣又貽誤搶救時(shí)間，而D-3-羥丁酸的定量測(cè)定不僅可以解決此問(wèn)題，而且還對(duì)病情的準(zhǔn)確判斷及療效觀察起重要作用[2]。此外，由于胰島素過(guò)量而導(dǎo)致低血糖昏迷時(shí)，D-3-羥丁酸水平升高，血液葡萄糖測(cè)定是診斷糖代謝異常的最常用的指標(biāo),也是診斷糖尿病和低血糖癥的唯一指標(biāo),檢測(cè)結(jié)果的真實(shí)性顯得尤為重要。GOD-PAP法測(cè)定血糖特異性較高，簡(jiǎn)單實(shí)用，費(fèi)用低廉，是我國(guó)目前推薦的常規(guī)測(cè)定方法之一。糖尿病酮癥酸中毒是糖尿病的急性并發(fā)癥，也是內(nèi)科常見危象之一。當(dāng)糖尿病代謝紊亂發(fā)展至嚴(yán)重階段，脂肪分解加速，酮體形成增加而利用減慢，大量消耗體內(nèi)儲(chǔ)備堿，而發(fā)生代謝性酸中毒，病情嚴(yán)重時(shí)發(fā)生昏迷[3-4]。臨床上常通過(guò)測(cè)定酮體來(lái)進(jìn)行監(jiān)測(cè)，酮體包括：D-3-羥丁酸、乙酰乙酸和丙酮，其中D-3-羥丁酸在酮體中占總量的70%，它可在體內(nèi)轉(zhuǎn)化成乙酰乙酸，經(jīng)三羧酸循環(huán)代謝 。酮癥時(shí)D-3-羥丁酸的改變要比血糖早2 h，且早于乙酰乙酸，隨著治療的進(jìn)行，D-3-羥丁酸不斷氧化生成乙酰乙酸，尿中乙酰乙酸升高，導(dǎo)致尿酮體升高，而神經(jīng)性低血糖昏迷時(shí)，D-3-羥丁酸水平正常，所以，D-3-羥丁酸還可作為糖尿病昏迷的鑒別診斷指標(biāo)。

[參考文獻(xiàn)]

[1]倪桂臣，吳玉筠，朱逞.應(yīng)用胰島素泵治療兒童1型糖尿病合并酮癥酸中毒[J].中華兒科雜志，2000,38:494.

[2]Knight G.Diabetes clinical management[M].Singapore:Longman Group UK Limited,1990:207.

[3]張文武.急診內(nèi)科學(xué)[M].北京:人民衛(wèi)生出版社,2000:447.

[4]Gefalu WT.Diabetic ketoacidosis[M].Crit Care Clin,1991:89.

（收稿日期：2009-01-05）