[摘要] 目的 探討Survivin在人腦星形細胞瘤的表達及與星形細胞瘤發(fā)生發(fā)展之間的關(guān)系。方法 采用免疫組織化學(xué)Elivision二步法檢測53例腦星形細胞瘤組織和10例正常腦組織標(biāo)本中Survivin的表達水平。結(jié)果 Survivin在正常腦組織無表達；在腦星形細胞瘤組織中Survivin的表達陽性率為64.1%，且隨星形細胞瘤病理級別的增高而表達增強（P＜0.05）。結(jié)論 Survivin的高表達與腦星形細胞瘤的惡性進展有關(guān)。

[關(guān)鍵詞] Survivin； 腦星形細胞瘤； 免疫組化

[中圖分類號] R730.264 [文獻標(biāo)識碼] A [文章編號] 1673-9701（2009）13-104-02

Expression and Significance of Survivin in the Human Astrocytomas

WANG Xinping1 MEI Jinhong2

1.Department of Pathology，the Medical College of Jiujiang University，Jiangxi 332000；2.Department of Pathology，the First Affiliated Hospital of Nanchang University，Nanchang 330006

[Abstract] ObjectiveTo explore the expression level of Survivin in the human astrocytomas and its relationship between tumorigenesis and progression of the human astrocytomas. MethodsThe expression level of Survivin protein was investigated by immunohistochemistry Enivision method in 53 cases of the human astrocytomas and 10 cases of normal brain tissues. Results34 of 53（64.1%） astrocytic tumors expressed survivin. The distributions included 7 of 18（38.9%） diffuse astrocytomas，14 of 19（74.7%） anaplastic astrocytomas，and 13 of 16（81.3%）glioblastomas，and the positive rate was increased associated with tumor grade getting higher. Survivin was not found expression in the normal brain tissue. ConclusionThe strong relationship between m alignant grade and survivin expression indicates that expression of survivin may relate to tumor m alignant progression of astrocytic tumors．

[Key Words]Survivin protein； Brain astrocytoma； Immunohistochemistry

Survivin是新發(fā)現(xiàn)的一種凋亡抑制蛋白，具有強大的抗細胞凋亡以及促進有絲分裂的作用，并與人類多種腫瘤的形成密切相關(guān)[1]。本文采用免疫組織化學(xué)方法檢測Survivin蛋白在人腦星形細胞瘤的表達，并分析其臨床意義，現(xiàn)報道如下。

1 材料與方法

1.1 組織標(biāo)本

53例星形細胞瘤標(biāo)本來自南昌大學(xué)第一附屬醫(yī)院病理科2004～2007年存檔的蠟塊，其中男性33例，女性20例；年齡18～72歲；按WHO 2000年分類標(biāo)準，包括彌漫性星形細胞瘤18例，間變形星形細胞瘤19例，膠質(zhì)母細胞瘤16例； 10例正常腦組織取自九江學(xué)院病理教研室尸體解剖標(biāo)本。

1.2 免疫組化

4mm石蠟切片常規(guī)脫蠟至水，行微波抗原修復(fù)，以下按Elivision試劑盒說明書進行操作。兔抗人Survivin多克隆抗體（試劑均購于中杉生物技術(shù)有限公司），DAB顯色，蘇木素復(fù)染。胃癌陽性對照標(biāo)本由南昌大學(xué)第一附屬醫(yī)院病理科提供，用PBS代替一抗作陰性對照。

1.3 結(jié)果判定

Survivin蛋白免疫組化陽性為胞漿和或核呈棕黃色染色。在400倍顯微鏡下觀察，每例切片隨機計數(shù)5個視野，計算陽性細胞的百分比。Survivin蛋白表達半定量分析法根據(jù)文獻[2]免疫反應(yīng)評分（Immunoreactivity score ，IRS）進行評定，IRS由陽性細胞百分數(shù)（Percent of positive cells，PP）計分與染色強度（Staining intensity，SI）計分相加所得。PP計分如下：0分：＜5%，1分：5%～25%，2分：26%～50%，3分：51%～75%，4分：＞75%。SI計分如下：1分：弱染色，2分：中等染色，3分，強染色；SI計分以多數(shù)細胞為標(biāo)準；≤2分為陰性，＞2分為陽性。

1.4 統(tǒng)計學(xué)處理

采用SPSS12.0統(tǒng)計軟件分析，率的比較用x²檢驗，IRS采用（χ±s）表示，組間均數(shù)比較采用t檢驗，方差分析，q檢驗。

2 結(jié)果

2.1 Survivin在星形細胞瘤和正常腦組織中的表達和意義

Survivin蛋白免疫組化陽性為胞漿和（或）核呈棕黃色染色，主要為胞漿著色。Survivin在星形細胞瘤及正常腦組織之間表達陽性率及IRS均有極顯著性差異（x² = 11.474，P＜0.01；t = 6.041， P＜0.01），見圖1，表1。

2.2 Survivin表達陽性率與腦星形細胞瘤惡性程度的關(guān)系

星形細胞瘤不同病理類型間Survivin表達陽性率差異顯著（P＜0.05），其中彌漫性星形細胞瘤與間變性星形細胞瘤（P＜0.01）及膠質(zhì)母細胞瘤間差異極顯著（P＜0.01）。

2.3 Survivin IRS與腦星形細胞瘤惡性程度的關(guān)系

星形細胞瘤不同病理類型間Survivin IRS差異顯著（P＜0.05），其中彌漫性星形細胞瘤與間變性星形細胞瘤（P＜0.05）及膠質(zhì)母細胞瘤間差異顯著（P＜0.05）。

3 討論

腦星形細胞瘤的發(fā)生是多因素參與形成的，其中腫瘤細胞的增殖與凋亡失衡是星形細胞瘤形成和發(fā)展的一個重要機制。Survivin是近年來新發(fā)現(xiàn)的一種凋亡抑制蛋白，在細胞周期中具有在G2/M期特異性表達的特點，Survivin的高表達能夠抑制多種因素如P53、Fas、caspase等誘導(dǎo)的細胞凋亡[3]。Survivin除了強大的抗細胞凋亡功能外，還具有調(diào)節(jié)細胞增殖的功能，它與細胞的有絲分裂、卵裂溝形成及胞漿移動等有關(guān)。

Survivin在胚胎、胎兒發(fā)育期表達，除子宮內(nèi)膜、胎盤和胸腺組織中發(fā)現(xiàn)存在不同程度的Survivin基因表達外[4]，在正常分化末期的成人組織中不表達，而在人類多數(shù)腫瘤組織中廣泛表達，如大多數(shù)神經(jīng)上皮性腫瘤[5]、食道鱗癌[6]等中都能檢測到Survivin蛋白的表達，并且與腫瘤的惡性程度相關(guān)。本實驗結(jié)果顯示，Survivin蛋白在正常腦組織中無表達，而在星形細胞瘤組織中高表達；且彌漫性星形細胞瘤、間變性星形細胞瘤、膠質(zhì)母細胞瘤三組比較陽性表達率差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P < 0.05）。Survivin表達陽性率隨星形細胞瘤病理級別增高而明顯增高，提示Survivin高表達與腦星形細胞瘤的形成及惡性演進均有密切關(guān)系。本組Survivin蛋白在瘤細胞的細胞漿和細胞核均有表達。過去的研究認為Survivin僅是胞漿蛋白，但現(xiàn)已證實Survivin有5種剪接異構(gòu)體，分別存在細胞漿和細胞核中，這與Survivin既抑制細胞凋亡、又調(diào)節(jié)細胞分裂的多重功能相一致[7]。

最新的研究認為，Survivin的細胞核表達是判斷腫瘤預(yù)后的重要指標(biāo)之一。Grabowski等[6]研究顯示食道鱗癌Survivin的細胞核陽性患者比陰性患者的平均生存時間短，Survivin的細胞漿表達對患者的預(yù)后無影響，但是Survivin在星形細胞瘤中細胞漿或細胞核陽性表達對患者預(yù)后的影響有待進一步研究。

[參考文獻]

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[6] Grabowski P，Kuhnel T，Muhr-Wilkenshof F，et al. Prognostic value of nuclear survivin expression in esophageal squamous cell carcinoma[J]. Br J Cancer，2003，88（1）：115-119．

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（收稿日期：2009-01-08）