[摘要] 目的 觀察依達(dá)拉奉液對心肺復(fù)蘇后家兔的腦保護(hù)作用。方法 將30只家兔隨機(jī)分為生理鹽水組（N組）、小劑量依達(dá)拉奉組（L組）、大劑量依達(dá)拉奉組（H組），每組10只。建立心肺腦復(fù)蘇模型后，從耳緣靜脈泵入以 0，1，3mg/（kg·h）依達(dá)拉奉液，于30min、2h、4h檢測血清SOD、MDA。結(jié)果 與生理鹽水組比較，H、L兩組血清SOD顯著升高、MDA值顯著下降；與L組相比，H組SOD也顯著升高，MDA也顯著降低。結(jié)論 依達(dá)拉奉液對心肺復(fù)蘇后家兔腦有顯著的保護(hù)作用，呈劑量依賴性。

[關(guān)鍵詞] 依達(dá)拉奉； 心肺復(fù)蘇； 腦保護(hù)； MDA； SOD

[中圖分類號] R541.78 [文獻(xiàn)標(biāo)識碼] A [文章編號] 1673-9701（2009）13-38-02

The Brain Protective Effect of Different Dose Edaravone by Ear Intravenous Injection in CPR Rabbits

LIU Lin1 CAO Huanjun1 ZHANG Chengming1，2

1.Department of Anesthesiology，Weifang Medical College；2.The Department of Anesthesia，Weifang Medical College Affiliated Hospital，Shandong 261042

[Abstract] ObjectiveTo investigate the effect of edaravone on brain in the rabbits by cardiopulmonary resuscitation. Methods30 rabbits were randomly divided into three groups：NS，low-dose edaravone-treated and high-dose edaravone-treated groups. Each group had 10 animals. The contents of SOD and MDA in serum were assessed 30min，2h，4h after the cardiopulmonary cerebral models were established. ResultsCompared with the NS group，serum SOD in edaravone groups were significantly higher，but serum MDA in edaravone groups were significantly lower；Compared with group S，the serum SOD in group H was significantly higher，serum MDA of group H was significantly lower. ConclusionEdaravone has protective effect on brain in the rabbits after cardiopulmonary resuscitation，especially the high dose.

[Key Words]Edaravone； Cardiopulmonary resuscitation； Brain protection； MDA； SOD

心肺復(fù)蘇是危重疾病的搶救和治療過程中經(jīng)常遇到的問題，復(fù)蘇成功后由于長時間的缺血缺氧，腦組織可能造成不同程度的損傷。目前認(rèn)為缺血再灌注后氧自由基增多是導(dǎo)致腦損傷加重的主要原因[1]，而超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）等是反映氧自由基水平的主要觀察指標(biāo)。依達(dá)拉奉（3-甲基-1-苯基-2-吡唑啉-5-酮）是新一類羥自由基清除劑，臨床上主要用于腦梗死的治療。各項實驗研究證實，依達(dá)拉奉對缺血性腦損傷有保護(hù)作用[2，3]，能改善缺血性腦損傷患者神經(jīng)功能的預(yù)后。本實驗擬通過檢測家兔血清SOD、MDA水平的變化，旨在評價不同劑量的依達(dá)拉奉液對心肺復(fù)蘇后家兔腦組織的保護(hù)作用，為臨床提供參考。

1 材料與方法

1.1 試劑與器材

（1）主要試劑：超氧化物歧化酶（SOD）測定試劑盒（南京建成生物工程研究所）；丙二醛（MDA）測定試劑盒（南京建成生物工程研究所）。

（2）儀器：微量注射器（寧波市三愛儀器廠）；4°離心機(jī)（上海安亭科學(xué)儀器廠）；722s分光光度計（上海精科公司）；DW-2000動物呼吸機(jī)（上海嘉鵬科技有限公司）；PM- 9000便攜式多參數(shù)監(jiān)護(hù)儀（深圳邁瑞生物醫(yī)療電子股份有限公司）。

1.2 實驗動物及分組

5月齡健康家兔30只，雌雄不拘，體重（2.50±0.30）kg，由濰坊醫(yī)學(xué)院實驗動物中心提供。實驗動物用隨機(jī)數(shù)字表法分為3組：生理鹽水組（N組）、小劑量依達(dá)拉奉組（L組）、大劑量依達(dá)拉奉組（H組），每組10只。

1.3 方法

1.3.1 動物模型制作 心肺腦復(fù)蘇動物模型的制作參照文獻(xiàn)[4，5]進(jìn)行。實驗前禁食12h，耳緣靜脈推注氯胺酮10mg/kg誘導(dǎo)，氯胺酮100mg加入250mL林格氏液內(nèi)靜脈輸注維持麻醉，保持家兔肢體無體動，呼吸、心率平穩(wěn)。環(huán)甲膜做T形切口，插入氣管導(dǎo)管，接上動物呼吸機(jī)行機(jī)械通氣。分離胸前皮膚，打開胸腔，暴露心臟。直流電約20mA，正極在右心房，負(fù)極在左心室，行電刺激誘發(fā)室顫，直至有創(chuàng)血壓低于30mmHg，維持5min。手法心肺復(fù)蘇，直至有創(chuàng)血壓高于60mmHg，且能穩(wěn)定維持為復(fù)蘇成功。另從右側(cè)耳緣靜脈泵入相應(yīng)干預(yù)藥物。

1.3.2 給藥劑量 本實驗采用2種給藥劑量，即耳緣靜脈持續(xù)泵入依達(dá)拉奉液（由江蘇先聲藥業(yè)有限公司提供）1mg/（kg·h）， 3mg/（kg·h），對照組給予適量生理鹽水。

1.3.3 血清SOD、MDA含量測定 復(fù)蘇后30min、2h、4h分別抽取左側(cè)頸靜脈血液3mL，6h內(nèi)離心（3000r/min）15min后棄去下層，取上層血清測定SOD、MDA含量。血清SOD含量測定采用黃嘌呤氧化酶法。血清MDA含量測定采用硫代巴比妥酸法。以上嚴(yán)格按照試劑盒說明書操作。

1.4 統(tǒng)計學(xué)處理

所測數(shù)據(jù)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（χ±s）表示，采用SPSS13.0分析系統(tǒng)對定量數(shù)據(jù)進(jìn)行組間t檢驗，以P＜0.05為差異有顯著性。

2 結(jié)果

2.1 血清SOD含量比較

與N組比較，H組血清SOD含量明顯升高，差異有顯著性（P＜0.05）；L組SOD含量開始升高不明顯，但隨著時間的延長也顯著升高。與L組比較，H組血清SOD含量明顯升高（表1）。

2.2 血清MDA含量比較

與N組比較，L組與H組血清MDA含量開始雖然降低，但差異無顯著（P＞0.05）。隨著時間的增加，H組血清MDA含量明顯降低，差異有顯著性（P＜0.05），L組MDA含量也顯著降低（P＜0.05）。與L組比較，H組血清MDA含量明顯降低（表2）。

3 討論

心肺復(fù)蘇后引起的一系列病理生理變化均可導(dǎo)致復(fù)蘇后全身性炎癥反應(yīng)綜合征，繼而發(fā)生多臟器功能障礙綜合征，直接影響著復(fù)蘇的預(yù)后。腦組織較其他臟器更易遭受缺血缺氧性損害，復(fù)蘇后存在腦損傷、腦缺血缺氧等病理情況以及體內(nèi)酶系統(tǒng)保護(hù)作用減弱，氧自由基生成過多。腦內(nèi)產(chǎn)生的大量氧自由基通過脂質(zhì)過氧化作用及與膜蛋白的反應(yīng)造成腦細(xì)胞、血腦屏障的過氧損傷，導(dǎo)致細(xì)胞毒性、血管源性腦水腫，加劇腦的繼發(fā)性損害。

監(jiān)測血清SOD、MDA水平對研究心肺腦復(fù)蘇后缺血缺氧情況有重要意義。SOD作為內(nèi)源性氧自由基清除劑的代表，其活力在一定程度上反映了內(nèi)源性氧自由基的清除活力，大量SOD對缺氧缺血性腦損傷有明顯保護(hù)作用[6]。MDA是自由基與生物膜不飽和脂肪酸發(fā)生脂質(zhì)過氧化反應(yīng)的代謝產(chǎn)物，代表氧自由基的含量，測定MDA含量可以反映出組織含有氧自由基的多少[7]。本實驗結(jié)果顯示：H組血清SOD含量明顯升高，L組血清SOD含量升高不如H組明顯，說明大劑量依達(dá)拉奉治療產(chǎn)生的大量SOD對心肺復(fù)蘇后的腦保護(hù)作用顯著。依達(dá)拉奉治療后血清MDA含量明顯降低，說明氧自由基含量明顯減少，從而減輕腦損傷。

依達(dá)拉奉是親脂性基團(tuán)，對血腦屏障的通透率為60%。作為一種新型自由基清除劑，它通過提供一個電子給自由基，從而清除體內(nèi)活性氧分子，抑制脂質(zhì)過氧化[8]，同時也保護(hù)血管內(nèi)皮細(xì)胞，抑制遲發(fā)性神經(jīng)細(xì)胞死亡，從而減輕神經(jīng)細(xì)胞損傷[9]。

目前依達(dá)拉奉已廣泛用于臨床治療缺血性腦血管病，通過清除自由基，抑制黃嘌呤氧化酶和次黃嘌呤氧化酶的活性，降低羥自由基的濃度，減輕腦損傷，對缺血的腦組織發(fā)揮神經(jīng)保護(hù)作用。結(jié)果證實，心肺復(fù)蘇后靜脈注射依達(dá)拉奉液對心肺復(fù)蘇后家兔有一定腦保護(hù)作用，且呈劑量依賴關(guān)系，為其在心肺復(fù)蘇后對患者臨床治療中的應(yīng)用提供了理論依據(jù)。

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[9] Zhang N，Komine-Kobayashi M，Tanaka R，et al. Edaravone reduces early accumulation of oxidative products and sequential inflammatory responses after transient focal ischemia in mice brain[J]. Stroke，2005，36：2220- 2225.

（收稿日期：2009-01-14）