[摘要] 目的 探討慢性乙型肝炎(CHB)患者病毒復(fù)制水平與血清HBeAg、HBV DNA含量和肝損害的關(guān)系。方法 對(duì)175例患者，采用定量PCR檢測(cè)血清HBV DNA含量，酶聯(lián)免疫吸附法檢測(cè)HBV血清標(biāo)志物，采用LISYS全自動(dòng)分析儀測(cè)定血清ALT、AST。結(jié)果 血清HBeAg陽(yáng)性組HBV DNA含量明顯高于HBeAg陰性組?；蚨克竭M(jìn)一步證實(shí)了血清HBeAg確是反映乙肝病毒復(fù)制的良好指標(biāo)。175例患者中有28.6%HBeAg陰性，部分病例HBV DNA水平較高。結(jié)論 隨著肝損害程度的加重，血清HBV DNA含量逐漸下降，而血清HBV DNA含量與ALT、AST無(wú)明顯關(guān)系。

[關(guān)鍵詞] 慢性乙肝炎病毒;HBV DNA定量測(cè)定;肝損害程度

[中圖分類號(hào)] R512.6[文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] A [文章編號(hào)] 1673-9701(2009)36-32-02

乙型肝炎病毒(HBV)感染時(shí)，外周血中HBV DNA是病毒復(fù)制活動(dòng)最直接和可靠的標(biāo)志，其含量能直接代表患病毒血癥的水平。我們采用熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)檢測(cè)175例慢性乙型肝炎(CHB)患者血清HBV DNA基因含量，以探討慢性乙肝患者病毒復(fù)制水平與乙肝病毒標(biāo)志物和肝損害程度的相互關(guān)系。

1對(duì)象與方法

1.1對(duì)象

175例病人來(lái)源于我院2001年10月～2007年2月的住院病人，按2000年9月西安會(huì)議修訂的《病毒性肝炎防治方案》的診斷標(biāo)準(zhǔn)診斷為慢性乙型病毒性肝炎，血清HBVDNA均陽(yáng)性，其中輕度92例、中度67例，男性139例，女性36例，平均年齡31.9歲(9～74歲)。平均病程(5.0±4.4)年。

1.2檢查方法

HBV DNA定量采用熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)檢測(cè)，HBV血清標(biāo)志物采用酶聯(lián)免疫吸附法檢測(cè)，血清ALT、AST測(cè)定采用LIASYS全自動(dòng)分析儀測(cè)定。

1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS12.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件，以(χ±s)表示，計(jì)量資料采用t檢驗(yàn)或q檢驗(yàn)，以P<0.05為差異有顯著性。

2結(jié)果

2.1血清HBV DNA基因含量與HBeAg陽(yáng)性的關(guān)系

見(jiàn)表1，由表1中可見(jiàn)，血清HBeAg陽(yáng)性組HBV DNA基因含量明顯高于HBeAg陰性組，在175例患者中占28.6%HBeAg陰性，其中部分病例HBV DNA水平還較高。

2.2血清HBV DNA基因含量與臨床肝損害的關(guān)系

見(jiàn)表2。

由表2可見(jiàn)，在慢乙肝患者中隨著臨床肝損害程度加重，HBV DNA基因含量逐漸下降。

3討論

隨著分子生物技術(shù)的發(fā)展，病毒感染的臨床診斷技術(shù)已從定性檢測(cè)發(fā)展到定量檢測(cè)。從核酸雜交技術(shù)到定量PCR技術(shù)檢測(cè)HBVDNA，其靈敏度和特異性不斷提高，且在研究病毒感染量與臨床病毒的關(guān)系、評(píng)價(jià)和檢測(cè)抗病毒藥物療效等方面具有重要指導(dǎo)作用。

HBeAg是HBV核心區(qū)基因的一部分，乙肝患者血清中存在HBeAg是病毒活躍的指標(biāo)。本文結(jié)果顯示血清HBeAg陽(yáng)性者HBV DNA基因含量明顯高于HBeAg陰性者，從基因定量水平進(jìn)一步證實(shí)了HBeAg確是反映乙肝病毒復(fù)制的良好指標(biāo)。既往一般認(rèn)為，血清HBeAg陰性，抗-HBe的出現(xiàn)預(yù)示病毒復(fù)制水平降低或病變恢復(fù)。但近年來(lái)的研究觀察到部分血清HBeAg陰性，抗-HBe陽(yáng)性的患者有高滴度的HBV DNA，表明有活躍的病毒復(fù)制，肝組織炎性反應(yīng)仍繼續(xù)發(fā)展，成為HBeAg 陰性CHB。本文觀察的175例HBV DNA陽(yáng)性慢性乙肝患者中28.6%的病例血清HBeAg陰性，有的HBV DNA水平還較高。近年研究發(fā)現(xiàn)，在這些病人中多數(shù)伴有HBV前C區(qū)變異，這種變異導(dǎo)致不能產(chǎn)生HBeAg，但卻不影響HBV的復(fù)制與傳播。經(jīng)研究證實(shí)，其中一部分為HBV前C區(qū)變異株感染，另一部分中，重慢性乙肝時(shí)HBV野生株低水平復(fù)制所致。隨著肝臟的損傷程度加重，HBeAg定量逐漸減少。這種現(xiàn)象也與慢乙肝的肝損害是由病毒激發(fā)的自身免疫系統(tǒng)清除所致[1]。HBV前C區(qū)變異與乙肝慢性化、慢性肝炎惡化、暴發(fā)性肝炎和肝癌有關(guān)。臨床資料證實(shí)，HBeAg陰性患者的肝病活動(dòng)度和進(jìn)展速度高于HBeAg陽(yáng)性患者，50%以上的患者在診斷時(shí)有嚴(yán)重的肝細(xì)胞炎性反應(yīng)，壞死，29%～38%已發(fā)展至肝硬化[2]。因此，血清HBeAg陰性，而HBV DNA水平高的病人在臨床上值得注意。乙肝患者血清中病毒標(biāo)記與肝損害程度的關(guān)系仍不清楚，既往報(bào)告結(jié)果缺乏一致性。血清HBV DNA含量與病情輕重的關(guān)系尚未見(jiàn)報(bào)告。本文結(jié)果顯示在慢性乙肝患者中隨著肝損傷程度的加重HBV DNA基因含量逐漸下降，提示病情越重病毒復(fù)制水平越低。有人認(rèn)為活躍的HBV復(fù)制是引起慢遷肝炎癥狀反應(yīng)的主導(dǎo)原因，而機(jī)體免疫紊亂是慢活肝發(fā)病機(jī)理的主要方面[3]。慢性肝炎中重度按既往診斷標(biāo)準(zhǔn)絕大多數(shù)為慢活肝、其發(fā)病主要與免疫損傷有關(guān)。機(jī)體的體液和細(xì)胞免疫應(yīng)答在造成肝損害的同時(shí)也有利于中和和清除血循環(huán)中的病毒顆粒，這可能是HBV含量隨慢乙肝病情加重而下降的原因。另外可能隨著感染時(shí)間延長(zhǎng)病情加重，HBV DNA與宿主肝細(xì)胞整合致血清中HBV檢出率下降，含量降低。本研究顯示血清HBV DNA基因含量與血清ALT、AST 水平無(wú)相關(guān)，提示HBV復(fù)制程度與慢乙肝患者的炎癥活動(dòng)程度無(wú)明顯關(guān)系。

[參考文獻(xiàn)]

[1] 王功遂，王曼曼，明朗，等. HBeAg定量測(cè)定在慢性乙型肝炎診斷和治療中的價(jià)值[J]. 中華傳染病雜志，2004，22(4);255-258.

[2] 紀(jì)泛樸，鄧紅，趙文學(xué)，等. HBeAg陰性慢性乙型肝炎臨床特征分析[J]. 中華傳染病雜志，2007，25(12):753-755

[3] 劉澤富，聶青和. 病毒性肝炎的診斷與治療[M]. 北京:人民軍醫(yī)出版社，2001:449-477.

(收稿日期:2009-10-26)