王　輝　徐小林　陳銀寶　姚　磊　徐　佳　李　勇　王晨晨　薛　永 戴體俊

3.徐州醫(yī)學院麻醉學院,江蘇 徐州 221002;4.麻醉藥理學教研室徐州,江蘇 徐州 221002)

[摘要]目的 從致驚厥的行為學、安全性角度探討咪達唑侖對氯普魯卡因致驚厥作用的影響。方法 皮下注射咪達唑侖 20 min后,腹腔注射不同劑量氯普魯卡因,觀察小鼠驚厥潛伏期、持續(xù)時間、未驚厥率及死亡率;并按序貫法分析咪達唑侖對氯普魯卡因致驚厥半數(shù)有效量(ED₅₀)和半數(shù)致死量(LD₅₀)的影響。結(jié)果 0.5、1.0 mg/kg咪達唑侖可延長氯普魯卡因致小鼠驚厥潛伏期(P<0.05)、縮短驚厥持續(xù)期(P<0.01)、減少驚厥發(fā)生率和致死率;且本實驗劑量咪達唑侖(0.5、1.0mg/kg與5.0、10mg/kg)均可增大氯普魯卡因致驚厥ED₅₀和LD₅₀。 結(jié)論 咪達唑侖可拮抗氯普魯卡因的致驚厥作用,結(jié)果對臨床聯(lián)合用藥有一定的參考意義。

[關鍵詞]咪達唑侖;氯普魯卡因;驚厥;半數(shù)有效量;半數(shù)致死量

[中圖分類號]R971+.2 [文獻標識碼] A [文章編號]1004-8650(2009)10-122-03

氯普魯卡因(Chloroprocaine) 是一種起效快、效果確切、沒有快速耐藥、毒副反應小的短效局麻藥[1]。咪達唑侖(Midazolam)為臨床廣泛應用的苯二氮卓類藥物,具有催眠、抗焦慮、抗驚厥等作用[2]。本文從致驚厥的行為學、安全性角度探討咪達唑侖對羅哌卡因致驚厥作用的影響。

1 材料和方法

1.1 試驗動物

昆明種小鼠142只 (徐州醫(yī)學院實驗動物中心提供),雌雄各半,清潔級,體重(25±3)g。小鼠在試驗前一天熟悉實驗室環(huán)境,自由攝食飲水,為避免小鼠各時間段可能出現(xiàn)行為差異對研究結(jié)果的影響,實驗于每日同一時間段進行。

小鼠隨機分為3組:A組(咪達唑侖52):咪達唑侖對氯普魯卡因致驚厥作用影響;B組(咪達唑侖45):咪達唑侖對氯普魯卡因致驚厥ED₅₀的影響;C組(咪達唑侖45):咪達唑侖對氯普魯卡因LD₅₀的影響。

1.2 藥品

氯普魯卡因注射液 (無錫凱夫制藥有限公司生產(chǎn),批號0709202,規(guī)格:200 mg咪達唑侖ml),咪達唑侖注射液 (商品名:力月西,江蘇恩華藥業(yè)有限公司,批號20090225,規(guī)格:5 mg/ml)。兩藥均以生理鹽水(NS)配至所需濃度(氯普魯卡因160、200、240、250、300、375及469mg/kg,咪達唑侖0.25、0.5 、1、5.0和10 mg/kg)。

1.3 觀察及評價指標

1.3.1 驚厥及其持續(xù)時間判斷

參照文獻[3]方法,以動物興奮性明顯增高,活動增強如跳躍、奔跑,因肢體痙攣體位不能平衡而倒地等指標判斷驚厥發(fā)生。以從第一次驚厥開始致肌張力下降,到末次驚厥結(jié)束、能自主活動為止為驚厥持續(xù)時間。

1.3.2 指標評價

1.3.2.1 對氯普魯卡因致驚厥作用的影響

按分層隨機設計法,A組分為4亞組,每組13只,分別為生理鹽水組(NS瑼組,0.1 ml /10g)和咪達唑侖各劑量組(M瑼1、M瑼2及M瑼3 組,劑量分別為0.25、0.5 和1.0 mg/kg),均皮下注射給藥。本組受試小鼠參照預試驗結(jié)果的氯普魯卡因腹腔注射致驚厥劑量250mg/kg,于生理鹽水或不同劑量咪達唑侖皮下注射20 min 后注射。觀察各組小鼠發(fā)生驚厥及死亡情況,并記錄驚厥的潛伏期及持續(xù)時間。

1.3.2.2 對氯普魯卡因致驚厥ED₅₀的影響

按分層隨機設計法,B組分為3亞組,每組15只,分別為生理鹽水組(NS瑽組,0.1 ml /10g)和咪達唑侖各劑量組(M瑽1、M瑽2組,咪達唑侖分別為0.5和1.0 mg/kg),均為皮下注射給藥,20 min后腹腔注射氯普魯卡因。氯普魯卡因參照200 mg/kg劑量按1:0.8比例配制成不同等比溶液,即按160、200、及250 mg/kg的等比劑量。

按序貫法[4]操作如下:各組第一只小鼠皮下注射各組別相應劑量的咪達唑侖,20 min后腹腔注射生理鹽水或各組最高劑量氯普魯卡因,觀察30min內(nèi)是否發(fā)生驚厥,若驚厥第二只小鼠下調(diào)一個劑量,操作如上,若依然驚厥再下調(diào)一個劑量;若不驚厥第三只小鼠上調(diào)一個劑量,第4-15只小鼠序貫操作如上,根據(jù)序貫法的相關公式分析不同劑量咪達唑侖組氯普魯卡因致驚厥ED₅₀。

1.3.2.3 對氯普魯卡因LD₅₀的影響

C組按分層隨機設計法分為3亞組,每組15只,分別為生理鹽水組(NSC組,0.1 ml/10g)和咪達唑侖各劑量組(MC1、MC2組,咪達唑侖分別為5.0和10 mg/kg),給藥方法和氯普魯卡因給藥劑量和方法與1.3.2類似,分析不同劑量咪唑安定組氯普魯卡因LD₅₀。

1.4 統(tǒng)計學分析 致驚厥潛伏期和持續(xù)時間以 (x±s)表示,統(tǒng)計學分析采用SPSS17.0軟件。各組間用單因素方差分析和q檢驗,兩組的ED₅₀和LD₅₀采用t 檢驗,以P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié)果

2.1 對致驚厥作用的影響

與NS_A組相比,M_A2及M_A3組小鼠驚厥潛伏期延長 (P<0.05);M_A2及M_A3組驚厥持續(xù)時間縮短 (P<0.01)咪達唑侖各劑量組未驚厥小鼠只數(shù)隨劑量增加而增加,且與NS_A組相比,M_A2及M_A3組差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。見表1。

2.2 對氯普魯卡因致驚厥ED₅₀的影響

NS_B組致驚厥ED₅₀為152.5 mg/kg,與其相比,M瑽1、M瑽2組ED₅₀增加(P<0.01)。見表2。

2.3 對LD₅₀的影響

NSc組致驚厥LD₅₀為451.7 mg/kg,與其相比,MC1、MC2組LD₅₀增加(P<0.01)。見表3。

3 討論

局麻藥系臨床麻醉最常用的藥物,其所致中樞神經(jīng)系統(tǒng)(CNS) 毒性驚厥為臨床上常見的并發(fā)癥,如得不到及時處理,可迅速發(fā)展為CNS抑制,循環(huán)虛脫以致呼吸停止,嚴重威脅著患者生命安全[5]。氯普魯卡因作為短效局麻藥,目前對其抗驚厥作用的研究尚且較少。咪達唑侖是一種水溶性的苯二氮卓類藥物,其消除半衰期短,在臨床麻醉中具有廣闊的應用前景[6-7]。

本研究的預試驗提示,腹腔注射氯普魯卡因的致驚厥劑量為250 mg/kg,故本研究在此基礎上進行,觀察注射咪達唑侖20 min后注射氯普魯卡因的驚厥發(fā)生情況。

試驗結(jié)果初步提示,咪達唑侖可拮抗氯普魯卡因的致驚厥作用。其可能機制為,咪達唑侖與γ-氨基丁酸(GABA)的苯二氮卓類位點結(jié)合,導致氯離子內(nèi)流,細胞超級化,產(chǎn)生抑制作用,從而拮抗和減輕驚厥的發(fā)生[6]。苯二氮卓類具有的中樞性肌松作用,可對抗驚厥時的肌肉收縮[8]。咪達唑侖可延長氯普魯卡因驚厥發(fā)生的潛伏期,為制止驚厥發(fā)作贏得時間;縮短驚厥持續(xù)期可減輕驚厥造成的損害;降低驚厥發(fā)生數(shù)及死亡數(shù)表明降低了毒性;咪達唑侖劑量依賴性地增大氯普魯卡因致驚厥ED₅₀和LD₅₀,表明聯(lián)用可增強用藥安全性。

4 結(jié)論

本試驗結(jié)果初步表明,咪達唑侖可拮抗氯普魯卡因致驚厥作用。

參考文獻:

[1] 解軼,黃紹強,梁偉民.氯普魯卡因鞘內(nèi)給藥神經(jīng)毒性的研究進展[J].復旦學報(醫(yī)學版),2008,35(3):461-463.

[2] 戴體俊.麻醉藥理學[M].第2版.北京:人民衛(wèi)生出版社,2008:92-94.

[3] 徐叔云,卞如濂,陳修.藥理學實驗方法學[M].第3版.北京:人民衛(wèi)生出版社,2003:863.

[4] 孫瑞元.定量藥理學[M].北京:人民衛(wèi)生出版社,1987:203-214.

[5] 盛恒煒,綜述,徐世元等.局麻藥引起毒性驚厥的影響因素[J].廣東醫(yī)學,2003,24(12):1374-1375.

[6] Olkkola KT,Ahonen J.Midazolam and other benzodiazepines[J].Handb Exp Pharmacol,2008,182(2):335-360.

[7] Hong JY,Lee IH,Shin SK,et al.Caudal midazolam does not affect sevoflurane requirements and recovery in pediatric day-case hernioplasty[J].Acta Anaesthesiol Scand,2008,52(10):1411-1414.

[8] 戴體俊.麻醉藥理學[M].第2版.北京:人民衛(wèi)生出版社,2008:25.

(收稿日期2009-06-27)