敖　利　趙　倩　彭盯園

摘要：目的：建立補(bǔ)腎養(yǎng)血膠囊的質(zhì)量控制方法。方法：采用薄層色譜法對(duì)處方中紅參、赤芍、當(dāng)歸、女貞子、淫羊藿進(jìn)行了鑒別。結(jié)果：斑點(diǎn)清晰，陰性對(duì)照無(wú)干擾。結(jié)論：所建立的薄層色譜鑒別方法可用于補(bǔ)腎養(yǎng)血膠囊的質(zhì)量控制。

關(guān)鍵詞：補(bǔ)腎養(yǎng)血膠囊；紅參；赤芍；當(dāng)歸；女貞子；淫羊藿；薄層色譜鑒別

中圖分類號(hào)：R286.0文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A文章編號(hào)：1673-2197(2009)05-0024-03

補(bǔ)腎養(yǎng)血膠囊為我院自制制劑，具有滋補(bǔ)肝腎、益氣養(yǎng)血、烏發(fā)生發(fā)、寧心安神的功效，用于治療肝腎不足、氣血兩虛所致疲倦乏力、腰腿酸軟、心煩口干、頭昏耳鳴、心慌心悸、失眠多夢(mèng)、頭發(fā)脫落、須發(fā)早白等癥。為完善該制劑的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，筆者對(duì)方中主要藥味紅參、赤芍、當(dāng)歸、女貞子、淫羊藿進(jìn)行了薄層色譜鑒別。

1儀器與試藥

PBQ-I型薄層自動(dòng)鋪板器(重慶南岸力儀器廠)；AE-200型電子天平(天津METTLER公司)；微量進(jìn)樣器(上海醫(yī)用激光設(shè)備廠)；UV-I型三用紫外分析儀(上海顧村電光儀器廠)；HH-S11-2型電熱恒溫水浴鍋(上海躍進(jìn)醫(yī)療器械廠)；KQ250DB型數(shù)控超聲波清洗器(昆山市超聲儀器有限公司)。

薄層層析硅膠G(青島海洋化工集團(tuán)公司)；羧甲基纖維素鈉(國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司)；D101大孔樹脂(天津骨膠廠)；聚酰胺(柱層析用，100～200目，浙江省臺(tái)州市路橋四甲生化塑料廠)。人參皂苷Re對(duì)照品(0754-200013)、芍藥苷(110736-2003)、齊墩果酸(110709-200304)、淫羊藿苷(110737-200312)、當(dāng)歸對(duì)照藥材(120927-200512)，由中國(guó)藥品生物制品檢定所提供。補(bǔ)腎養(yǎng)血膠囊自制。所用試劑均為分析純。

2方法與結(jié)果

2.1紅參、赤芍的薄層色譜鑒別

2.1.1溶液的制備

供試品溶液：取本品粉末10g，加80％乙醇40mL，回流提取2h。醇提液濾過(guò)，置水浴上去乙醇，用水10mL溶解。水溶液加入D101大孔樹脂中(φ1cm×20cm)，先用水200mL洗脫，棄去，再用70％乙醇50mL洗脫。收集乙醇洗脫液，置水浴上揮去乙醇，殘?jiān)?5％乙醇溶解，并定量轉(zhuǎn)移至5mL量瓶中，搖勻，作為供式品溶液。

對(duì)照品溶液：取人參皂苷Re對(duì)照品加甲醇制成每1mL含1.20mg的溶液，以及芍藥苷對(duì)照品加甲醇制成每1mL含1.98 mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。

陰性對(duì)照品溶液：按處方取不含紅參及赤芍的其它藥味，按成品工藝及上述供試品制備方法，制成陰性對(duì)照溶液。

2.1.2薄層層析

照薄層色譜法(《中國(guó)藥典》2005年版一部附錄VIB試驗(yàn))吸取對(duì)照品溶液各5μL，供試品溶液、陰性對(duì)照溶液各20μL，分別點(diǎn)于同一以0.3％CM(-Na為粘合劑的硅膠H薄層板上，以正丁醇，乙酸乙酯－水(4：1：5)上層為展開劑，展開，取出，晾干。噴10％硫酸乙諄溶液，置烘箱中加熱至斑點(diǎn)清晰。

檢視：供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜的相應(yīng)位置上顯相同的藍(lán)紫色斑點(diǎn)(人參皂苷Re)和紫色斑點(diǎn)(芍藥苷)。陰性對(duì)照無(wú)此斑點(diǎn)。

2.2當(dāng)歸的薄層層析

2.2.1溶液的制備

供試品溶液：取本品粉末10g，加入乙醇40mL，浸泡4h，超聲提取15min，濾過(guò)。置水浴上揮盡乙醚，殘?jiān)?5％乙醇2mL溶解，搖勻，作為供試品溶液。

對(duì)照品溶液：取當(dāng)歸對(duì)照藥材1g，加甲醇10mL，超聲提取30min，濾過(guò)，置水浴上濃縮至5mL，作為對(duì)照藥材溶液。

陰性對(duì)照品溶液：按處方取不含當(dāng)歸的其它藥味，按成品工藝及上述供試品制備方法，制成陰性對(duì)照溶液。

2.2.2薄層層析

照薄層色譜法(《中國(guó)藥典》2(05年版一部附錄VIB試驗(yàn))吸取對(duì)照藥材溶液各5μL，供式品溶液、陰性對(duì)照溶液各20μL，分別點(diǎn)于同一以0.3％CMC-Na為粘合劑的硅膠G薄層板上，以正己烷-乙酸乙酯9：1)為展開劑，展開，取出，晾干。

置365nm紫外燈下檢視，在共試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)位置上顯相同的兩個(gè)亮藍(lán)綠色斑點(diǎn)。陰性對(duì)照無(wú)此斑點(diǎn)。

2.3女貞子

2.3.1溶液的制備

供試品溶液：取本品粉末10g，加70％乙醇50mL回流提取2h，濾過(guò)，將醇提液揮去溶劑，加鹽酸2mL水浴回流1.5h，濾過(guò)。濾液移入分液漏斗中，用石油醚(60℃～90℃)萃取3次，每次15mL。蒸干石油醚萃取液，用95％乙醇溶解，并定量轉(zhuǎn)移至5mL量瓶中，搖勻，作為供試品溶液。

對(duì)照品溶液：齊墩果酸對(duì)照品，加甲醇制成每1mL含0.85mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。

陰性對(duì)照品溶液：按處方取不含女貞子的其它粉末，按成品工藝及上述供試品制備方法，制成陰性對(duì)照溶液。

2.3.2薄層層析

照薄層色譜法(《中國(guó)藥典》2005年版一部附錄VIB試驗(yàn))吸取對(duì)照品溶液10μL，供試品溶液、陰性對(duì)照溶液各20μL，分別點(diǎn)于同一以0.3％CMC-Na為粘合劑的硅膠H薄層板上，以氯仿一甲醇(40：1)為展開劑，展開，取出，晾干。噴10％硫酸乙醇溶液，置烘箱中加熱至斑點(diǎn)清晰。

檢視：供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相對(duì)應(yīng)位置上顯相同的紫紅色斑點(diǎn)。陰性對(duì)照無(wú)此斑點(diǎn)。

2.4淫羊藿

2.4.1溶液的制備

供試品溶液：取本品粉末10g，加70％乙醇50mL回流提取2h，將醇提液濾過(guò)，蒸干，加水20mL溶解，用水飽和正丁醇萃取3次，每次20mL，合并正丁醇萃取液，蒸干。用20％乙醇20mL溶解，加入聚酰胺中(φ1cm×20cm，干粉裝柱，100～200目)。先用水洗脫100mL，棄去，再用90％乙醇洗脫50mL，蒸干乙醇洗脫液，殘?jiān)?5％乙醇溶解，并定量轉(zhuǎn)移至5mL量瓶中，搖勻，作為供試品溶液。

對(duì)照品溶液：取淫羊藿苷對(duì)照品加甲醇制成每1mL含0.80mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。

陰性對(duì)照品溶液：按處方取不含淫羊藿的其他藥味，按成品工藝及上述供試品制備方法，制成陰性對(duì)照溶液。

2.4.2薄層層析

照薄層色譜法(《中國(guó)藥典~2005年版一部附錄VIB試驗(yàn))吸取對(duì)照品溶液、供試品溶液、陰性對(duì)照溶液各20μL，分別點(diǎn)于同一以0.3％CMC-Na為粘合劑的硅膠H薄層板上，以乙酸乙脂-丁酮-甲酸-水(10：1：1：1)為展開劑，展開，取出，晾干。噴2％三氯化鐵乙醇溶液，置烘箱中加熱至斑點(diǎn)清晰。

檢視：供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)位置上顯相同的草綠色斑點(diǎn)，陰性對(duì)照無(wú)此斑點(diǎn)。

3討論

(1)在紅參、赤芍的薄層鑒別試驗(yàn)中，紅參選人參皂苷Re為對(duì)照品，赤芍選芍藥苷為對(duì)照品。人參皂苷Re與芍藥苷極性相近，不易分開，選擇在同一薄層板上同時(shí)進(jìn)行分離鑒定，這樣，供試品的處理凈化就很重要，可以排除雜質(zhì)干擾，使薄層色譜斑點(diǎn)清晰。經(jīng)系統(tǒng)試驗(yàn)，供試品前處理方法有：①乙醇提取－正丁醇分離法；②乙醇提取－大孔樹脂分離法。兩種方法制樣的分離效果都較好，但以方法②效果更好。展開劑選擇，從①正丁醇－乙酸乙酯－水(4：1：5)上層、②氯仿－甲醇－水(13:7:2)下層中選擇展開劑①，效果好。本文所選2方法，能在同一薄層板上同時(shí)鑒別紅參、赤芍，斑點(diǎn)清晰，陰性無(wú)干擾。

(2)淫羊藿供試品的前處理純化方法，按照比較思路，從乙醇提取—大孔樹脂分離法與乙醇提?。〈驾腿。埘０分鶎游龇ㄖ羞x用后者，分離效果好，薄層板選用硅膠H板比硅膠G板效果好，斑點(diǎn)清晰，陰性無(wú)干擾。

(3)女貞子的薄層鑒別展開系統(tǒng)，經(jīng)試驗(yàn)比較，從氯仿－甲醇(40：1)與環(huán)己烷－丙酮－乙酸乙酯(5：2：1)中選用后者，分離效果好，R，值適中。

本文所選薄層鑒別方法鑒別以上幾味藥材，操作簡(jiǎn)便，重現(xiàn)生好，結(jié)果準(zhǔn)確、可靠，能為質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)提供依據(jù)。

責(zé)任編輯曾楚華