徐靜媛

[摘要] 目的：研究厭氧菌檢驗的重要性及注意事項。方法：結(jié)合臨床經(jīng)驗，回顧性闡述厭氧菌檢驗的注意事項。結(jié)果：厭氧菌在感染性疾病中的致病作用日益受到臨床重視。臨床感染的很多實例證明開展厭氧菌檢驗極為必要。結(jié)論：不同地區(qū)和不同醫(yī)院厭氧菌的耐藥譜不同，經(jīng)驗用藥時要根據(jù)本地區(qū)和本實驗室的藥敏譜選藥。因此，為提高療效，減少抗生素的毒副作用，最好根據(jù)藥敏試驗選擇藥物治療。

[關(guān)鍵詞] 厭氧菌；無氧；培養(yǎng)；檢驗

[中圖分類號]R446.5 [文獻(xiàn)標(biāo)識碼] B[文章編號] 1673-7210（2009）01（c）-119-01

厭氧菌是一類在無氧條件下比在有氧環(huán)境中生長好的細(xì)菌，這類細(xì)菌缺乏完整的代謝酶體系，其能量代謝以無氧發(fā)酵的方式進(jìn)行。它能引起人體不同部位的感染，包括闌尾炎、膽囊炎、中耳炎、口腔感染、心內(nèi)膜炎、子宮內(nèi)膜炎、腦膿腫、心肌壞死、骨髓炎、腹膜炎、膿胸、輸卵管炎、膿毒性關(guān)節(jié)炎、肝膿腫、鼻竇炎、腸道手術(shù)或創(chuàng)傷后傷口感染、盆腔炎以及菌血癥等。厭氧菌在感染性疾病中的致病作用日益受到臨床重視，臨床感染的很多實例證明開展厭氧菌檢驗極為必要。

1 厭氧菌檢驗概況

過去我國厭氧菌培養(yǎng)在實驗室檢驗中開展的并不理想，臨床醫(yī)生重視程度不夠，大多數(shù)實驗室沒有將厭氧菌培養(yǎng)作為常規(guī)檢驗開展，加上厭氧菌培養(yǎng)方法學(xué)落后，且受培養(yǎng)基的配制和保存的限制，制約了厭氧菌培養(yǎng)在實驗室中的正常開展，造成厭氧菌的漏檢率很高。據(jù)報道[1]，我國從未開展過厭氧菌培養(yǎng)的實驗室占77%之多，有90%的實驗室沒有鑒定厭氧菌的設(shè)備，幾乎所有臨床細(xì)菌室均不開展厭氧菌藥敏試驗。近年來，國內(nèi)從臨床感染病例中分離出厭氧菌的報道日益增多，臨床醫(yī)生已認(rèn)識到厭氧菌在感染性疾病中的重要性，并能識別厭氧菌的重要特征，能認(rèn)真、正確地采樣、送檢，且隨著厭氧菌培養(yǎng)技術(shù)的不斷進(jìn)步，厭氧菌檢驗已成為臨床細(xì)菌學(xué)檢驗的重要組成部分。為提高感染性疾病的病原學(xué)診斷水平，開展厭氧菌培養(yǎng)是非常必要的。據(jù)資料顯示，如僅做需氧菌培養(yǎng)，在23份漏檢標(biāo)本中檢出9株厭氧菌，這說明在做細(xì)菌需氧菌培養(yǎng)的同時應(yīng)做厭氧菌培養(yǎng)[2]，否則將會造成大量病原菌漏檢，它不僅關(guān)系到疾病診斷的正確性，且影響治療效果或?qū)е轮委煵粡氐住?/p>

2 厭氧菌檢驗的注意事項

2.1 標(biāo)本選擇

根據(jù)厭氧菌感染的臨床特征，選擇感染局部有氣體產(chǎn)生，排出物有惡臭、帶血、呈黑色或黃綠色，與腫瘤有關(guān)的感染，病程呈亞急性或慢性，發(fā)生在肛周、口腔、鼻竇、咽頰等部位的感染，長期使用氨基糖苷類抗生素?zé)o效者和應(yīng)用甲硝唑及替硝唑治療有效者。

2.2 標(biāo)本送檢

大氣中的氧對厭氧菌有毒性作用，任何標(biāo)本建議采用床邊接種的方法，床邊接種既能縮短標(biāo)本接觸空氣的時間，又能較好地把好標(biāo)本的質(zhì)量關(guān)。不在床邊接種的標(biāo)本必須立即放入輸送培養(yǎng)基中并馬上送檢。

2.3 檢驗人員的責(zé)任心

檢驗人員對厭氧菌標(biāo)本要加倍重視，積極配合臨床，主動到床邊采集標(biāo)本。厭氧菌培養(yǎng)成敗的關(guān)鍵在一個快字，標(biāo)本采集后要馬上接種并放置于厭氧環(huán)境，對厭氧菌培養(yǎng)標(biāo)本要做到標(biāo)本到手后馬上處理。厭氧菌生長物特別惡臭，所以觀察結(jié)果時檢驗人員要不怕臭，仔細(xì)觀察，多挑選可疑菌落做耐氧試驗，這樣才能成功地分離出厭氧菌。

2.4 標(biāo)本涂片檢查

在對標(biāo)本做厭氧菌培養(yǎng)的同時進(jìn)行涂片鏡檢，可早期把有厭氧菌生長的信息提供給臨床，如普通需氧培養(yǎng)無細(xì)菌生長，但直接涂片見到大量細(xì)菌者，即可考慮為厭氧菌感染；如普通培養(yǎng)只有一種細(xì)菌生長但直接涂片可見2種或2種以上細(xì)菌者，可考慮患者為混合感染，這樣可早期指導(dǎo)臨床診斷，避免盲目用藥造成耐藥菌株產(chǎn)生，又可解決厭氧菌培養(yǎng)和藥敏周期長的弊端。

2.5 培養(yǎng)基的選擇和培養(yǎng)環(huán)境

初代接種厭氧菌最好使用新鮮配制的培養(yǎng)基，還可適當(dāng)選用一些選擇培養(yǎng)基，培養(yǎng)基使用前須進(jìn)行預(yù)還原。培養(yǎng)環(huán)境選用厭氧袋或厭氧罐，兩種方法價廉且操作簡易；厭氧箱設(shè)備昂貴，操作復(fù)雜，不利于臨床實驗室的使用。目前，厭氧菌培養(yǎng)用OxyplatesTM培養(yǎng)法較好[3]，它無需其他厭氧裝置，它的劃線和培養(yǎng)在一個標(biāo)準(zhǔn)的厭氧培養(yǎng)基中，且能被反復(fù)打開使用多次，無須預(yù)先還原，便于實驗室的使用，這種培養(yǎng)方法省去了厭氧罐、厭氧袋、厭氧箱等復(fù)雜、昂貴的消耗品，又能較好地分離出厭氧菌。

厭氧菌的鑒定可選用API 20A、VITEK-ANI、MICRO-01D、氣液色譜儀等設(shè)備鑒定。厭氧菌的藥敏試驗，大部分實驗室采用美國臨床實驗室標(biāo)準(zhǔn)化委員會(NCCLS)推薦的瓊脂稀釋法[4]，該方法實用性強(qiáng)，適用于大量菌株的測定，有的實驗室使用濃度梯度法(Etest)或ATB-ANA試條的方法，操作簡便、快速。

3 厭氧菌感染的治療

厭氧菌感染的治療除針對原發(fā)病外，抗厭氧菌的治療最為重要。替硝唑和甲硝唑?qū)Υ蠖鄶?shù)厭氧菌感染治療有效，故成為目前臨床上抗厭氧菌的首選藥物。由于多數(shù)厭氧菌感染是混合感染，聯(lián)合使用抗厭氧菌和需氧菌藥物是非常必要的。由于不同地區(qū)和不同醫(yī)院厭氧菌的耐藥譜不同，經(jīng)驗用藥時要根據(jù)本地區(qū)和本實驗室的藥敏譜選藥。因此，為提高療效，減少抗生素的毒副作用，最好根據(jù)藥敏試驗選擇藥物治療。

[參考文獻(xiàn)]

[1]張秀珍.要加強(qiáng)我國臨床細(xì)菌室厭氧菌的培養(yǎng)技術(shù)[J].中華檢驗醫(yī)學(xué)雜志,2002,25(3):133-134.

[2]儲從家,孔繁林,羅次節(jié),等.同時做需氧厭氧培養(yǎng)提高血(體)液細(xì)菌培養(yǎng)陽性率[J].中華檢驗醫(yī)學(xué)雜志,2002,23(5):285.

[3]吳多榮.氧凈（OxyplatesTM）厭氧菌培養(yǎng)法的實驗室應(yīng)用[J].中國熱帶醫(yī)學(xué),2004,4(4):617-619.

[4]Ptrick R.Manual of clinical microbiology[M].7th ed. Washington DC: ASM press,1999.1555-1560.

（收稿日期：2008-10-20）