皮瓣移植是整形外科常用的修復(fù)組織缺損和器官再造的重要手段。應(yīng)用游離皮瓣或軸形皮瓣進(jìn)行組織移植和器官再造時(shí)，最常遇見(jiàn)的問(wèn)題是皮瓣缺血再灌注損傷(ischemia-reperfusion，IR)導(dǎo)致的皮瓣部分或全部壞死。缺血再灌注損傷的確切發(fā)生機(jī)制目前尚不完全清楚，多認(rèn)為是多細(xì)胞參與、多種介質(zhì)共同發(fā)揮作用的復(fù)雜病理生理過(guò)程，其中細(xì)胞凋亡是造成皮瓣壞死的重要原因。近年來(lái)有關(guān)各種組織細(xì)胞缺血再灌注損傷與細(xì)胞凋亡(apoptosis)的關(guān)系已經(jīng)取得了一定進(jìn)展。本文對(duì)細(xì)胞凋亡、器官和組織缺血再灌注損傷中細(xì)胞損傷的發(fā)病機(jī)制及其與細(xì)胞凋亡的關(guān)系、凋亡相關(guān)基因的研究進(jìn)展綜述如下。

1細(xì)胞凋亡

細(xì)胞凋亡是細(xì)胞在生理和病理情況下的一種死亡模式。此概念由美國(guó)病理學(xué)家Kerr 等[1] 在1972 年首先提出，是指細(xì)胞受到一些特殊信號(hào)刺激后，按照內(nèi)在程序，即細(xì)胞預(yù)存的死亡程序，由其自身內(nèi)部機(jī)制調(diào)控的主動(dòng)細(xì)胞死亡，屬于機(jī)體自身的生理活動(dòng)， 又稱為程序性細(xì)胞死亡(programmed cell death ，PCD) 。細(xì)胞凋亡過(guò)程受基因嚴(yán)格調(diào)控，與細(xì)胞壞死有顯著的差別。

1.1細(xì)胞凋亡的機(jī)制：細(xì)胞凋亡是細(xì)胞在其生長(zhǎng)、發(fā)育過(guò)程中具有十分重要作用的生理現(xiàn)象。其生物學(xué)意義是在發(fā)育過(guò)程中清除多余的細(xì)胞、發(fā)育不正常的細(xì)胞、已完成任務(wù)的細(xì)胞以及有害的細(xì)胞，參與免疫系統(tǒng)細(xì)胞的發(fā)育和克隆選擇等，是確保機(jī)體正常生理過(guò)程所必須的。隨著研究的深入，人們認(rèn)識(shí)到細(xì)胞凋亡和細(xì)胞的生長(zhǎng)、分化、消亡以及機(jī)體的許多生理和病理過(guò)程密切相關(guān)。

1.2細(xì)胞凋亡的過(guò)程：可分為三期：①誘導(dǎo)期：凋亡誘導(dǎo)因素作用于細(xì)胞，導(dǎo)入死亡信號(hào)； ②執(zhí)行期：凋亡相關(guān)基因激活，決定死亡的細(xì)胞按預(yù)定程序啟動(dòng)凋亡，激活凋亡所需的核酸內(nèi)切酶、凋亡蛋白酶等及降解相關(guān)物質(zhì)，形成凋亡小體；③消亡期：凋亡細(xì)胞被鄰近的細(xì)胞所吞噬并在吞噬細(xì)胞內(nèi)降解。

1.3細(xì)胞凋亡的形態(tài)學(xué)改變:微絨毛、細(xì)胞突起和細(xì)胞表面皺褶消失，胞膜迅速空泡化，內(nèi)質(zhì)網(wǎng)不斷擴(kuò)張并與胞膜融合，形成膜表面的芽狀突起，即出芽；胞質(zhì)脫水而導(dǎo)致細(xì)胞皺縮、致密及固縮，線粒體變大，嵴增多，空泡化；核內(nèi)染色質(zhì)濃縮，形成染色質(zhì)塊，邊聚或中聚；胞膜皺縮內(nèi)陷，分割包裹胞質(zhì)，形成泡狀小體即凋亡小體，這是凋亡細(xì)胞特征性的形態(tài)學(xué)改變。凋亡小體迅即被鄰近的細(xì)胞吞噬和消化。整個(gè)凋亡過(guò)程沒(méi)有細(xì)胞內(nèi)涵物的外溢，故不引起炎性反應(yīng)與周圍組織損傷。

1.4 細(xì)胞凋亡的生化改變:細(xì)胞染色質(zhì)DNA 的降解是細(xì)胞凋亡的一個(gè)顯著特征。細(xì)胞凋亡發(fā)生時(shí)，Ca²⁺/Mg²⁺ 依賴性核酸內(nèi)切酶激活，切割核小體間的DNA，最后形成長(zhǎng)度為180～200堿基對(duì)(bp)或其整倍數(shù)的片段，在瓊脂糖凝膠電泳中呈“梯”狀(ladder pattern) 條帶，是判斷凋亡發(fā)生的客觀指標(biāo)。

2缺血再灌注損傷

缺血的組織、器官經(jīng)恢復(fù)血流灌注后不但不能使其功能和結(jié)構(gòu)恢復(fù)，反而加重其功能障礙和結(jié)構(gòu)損傷的現(xiàn)象稱為缺血再灌注損傷（IR）。這是一種常見(jiàn)的病理生理過(guò)程，可發(fā)生在腦梗死、心肌梗死、休克、手術(shù)創(chuàng)傷、肝門阻斷術(shù)及皮瓣移植和器官再造過(guò)程中。關(guān)于缺血再灌注損傷的發(fā)病機(jī)制與下列因素密切相關(guān)。

2.1 自由基生成增多

2.1.1黃嘌呤氧化酶和次黃嘌呤生成增多:組織缺血時(shí)，一方面由于ATP生成減少，膜泵功能障礙，Ca進(jìn)入細(xì)胞，激活Ca依賴性蛋白水解酶，使細(xì)胞內(nèi)大量黃嘌呤脫氫酶轉(zhuǎn)化為黃嘌呤氧化酶，另一方面，ATP被降解為ADP、AMP和次黃嘌呤，故在缺血時(shí)組織內(nèi)次黃嘌呤大量堆積。再灌注時(shí)，大量分子氧隨血液進(jìn)入缺血組織，在黃嘌呤氧化酶將次黃嘌呤轉(zhuǎn)化為黃嘌呤并進(jìn)而催化黃嘌呤轉(zhuǎn)化為尿酸的兩步反應(yīng)中，都以分子氧為電子接受體產(chǎn)生大量氧和過(guò)氧化氫，后者在金屬離子參與下形成OH，因此再灌注時(shí)組織內(nèi)氧、OH等氧自由基大量產(chǎn)生。

2.1.2 中性粒細(xì)胞的大量積聚和激活[2-3]：中性粒細(xì)胞在吞噬活動(dòng)加強(qiáng)時(shí)耗氧量顯著增多，所攝取的氧絕大部分經(jīng)白細(xì)胞內(nèi)的NADPH氧化酶和NADH氧化酶的作用形成超氧陰離子，如果形成的自由基過(guò)多或機(jī)體清除自由基的酶系統(tǒng)活性不足，則導(dǎo)致氧自由基增多。

2.1.3 線粒體功能受損：缺血再灌注時(shí)，Ca進(jìn)入線粒體增多，使其功能受損，細(xì)胞色素氧化酶系統(tǒng)功能失調(diào)，進(jìn)入細(xì)胞的氧經(jīng)單電子還原而形成氧自由基。

2.1.4 酚胺的增多和氧化：在各種應(yīng)激包括缺氧條件下，交感-腎上腺髓質(zhì)系統(tǒng)可分泌大量?jī)翰璺影罚环矫嫠哂兄匾拇鷥斪饔?，另一方面兒茶酚胺氧化時(shí)能產(chǎn)生具有細(xì)胞毒性的自由基。

2.1.5 四烯酸代謝過(guò)程增強(qiáng)：缺血再灌注時(shí)，由于細(xì)胞內(nèi)鈣超載激活了Ca依賴性磷脂酶，引起花生四烯酸代謝產(chǎn)生大量氧自由基。

2.2 鈣超載的機(jī)制

2.2.1 近年來(lái)大量研究表明Na⁺/Ca²⁺交換是調(diào)節(jié)細(xì)胞內(nèi)鈣離子平衡的主要途徑[4-6]。IR時(shí)組織內(nèi)ATP生成減少，細(xì)胞內(nèi)酸中毒，Na⁺在細(xì)胞內(nèi)積聚，激活了Na⁺/Ca²⁺交換系統(tǒng)，使大量Ca進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)形成鈣超載。

2.2.2 IR時(shí)大量自由基產(chǎn)生，作用于鈣通道，增加Ca²⁺通透性，而且由于ATP生成減少，鈣泵排Ca²⁺的能力下降，導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)Ca增多。

2.3能量代謝障礙：實(shí)驗(yàn)證明，在缺血再灌注時(shí)，由于缺氧和血流量不足，組織缺血，可導(dǎo)致能量代謝障礙，ATP明顯下降。可進(jìn)一步引起一系列代謝異常和紊亂：①組織缺血時(shí)，組織內(nèi)ATP生成減少，細(xì)胞內(nèi)酸中毒，導(dǎo)致氧自由基產(chǎn)生增加。此外酸中毒又可直接損害細(xì)胞的超微結(jié)構(gòu)，使Ca²⁺通道通透性增加，致使Ca²⁺內(nèi)流增加。同時(shí)Na⁺在細(xì)胞內(nèi)積聚，激活了Na⁺/Ca²⁺交換系統(tǒng)，使Ca²⁺進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)形成鈣超載；②隨ATP含量的下降，細(xì)胞膜、肌漿網(wǎng)Ca²⁺-ATP酶活力及肌漿網(wǎng)鈣攝取能力下降，使細(xì)胞內(nèi)Ca²⁺增加；③依賴ATP的細(xì)胞膜泵活性降低，肌鈣蛋白C親和力下降，使Ca²⁺增加。

2.4 血管內(nèi)皮細(xì)胞功能障礙

2.4.1 內(nèi)皮細(xì)胞抗氧化系統(tǒng)損傷：研究證明[7]內(nèi)皮細(xì)胞的抗氧化活性與其對(duì)氧化活性的敏感性之間有一定關(guān)系。組織缺血再灌注時(shí)，內(nèi)皮細(xì)胞不僅產(chǎn)生大量的活性氧，而且其抗氧化活性大大降低，并對(duì)外源性的活性氧產(chǎn)生系統(tǒng)有較高的敏感性，從而引起大量活性氧的產(chǎn)生，遠(yuǎn)遠(yuǎn)超過(guò)了內(nèi)皮細(xì)胞的防御能力，最終引起組織的損傷。

2.4.2 內(nèi)皮細(xì)胞合成與釋放血管活性物質(zhì)的功能障礙：①內(nèi)皮源性血管舒張因子NO是內(nèi)皮細(xì)胞產(chǎn)生的強(qiáng)大舒血管物質(zhì)，可通過(guò)彌散或載體轉(zhuǎn)運(yùn)至血管平滑肌，活化細(xì)胞內(nèi)鳥苷酸環(huán)化酶，使環(huán)磷鳥苷(cGMP)升高而擴(kuò)張血管;同時(shí)還具有抑制血小板和白細(xì)胞粘附、抑制平滑肌細(xì)胞增殖作用，在缺血再灌注中對(duì)組織具有保護(hù)作用；②內(nèi)皮素( ET)在組織缺血時(shí)釋放增加，再灌注時(shí)ET釋放進(jìn)一步增加，引起強(qiáng)烈的血管收縮，可直接引起組織缺血，加重血管功能障礙，使細(xì)胞發(fā)生不可逆性損傷；③缺血再灌注損傷引起中性粒細(xì)胞與內(nèi)皮細(xì)胞的粘附增加，中性粒細(xì)胞與血管內(nèi)皮接觸時(shí)即被激活，釋放OFR等毒性產(chǎn)物及破壞性蛋白酶，改變血管的通透性。同時(shí)活性氧產(chǎn)生的增加，損傷了內(nèi)皮細(xì)胞和其他細(xì)胞，其作用于內(nèi)皮細(xì)胞或粒細(xì)胞表面的粘附分子，促進(jìn)內(nèi)皮細(xì)胞的粘附，而缺氧本身也損傷內(nèi)皮功能，改變其粘附性，最終導(dǎo)致內(nèi)皮細(xì)胞破損、水腫和功能障礙，毛細(xì)血管腔被阻塞，導(dǎo)致雖有大血管的再灌注但局部缺血區(qū)仍無(wú)復(fù)流的現(xiàn)象[8]。

2.5 缺血再灌注時(shí)，組織細(xì)胞產(chǎn)生大量細(xì)胞因子和生長(zhǎng)因子致組織損傷：組織發(fā)生缺血再灌注損傷后，由于氧自由基、髓過(guò)氧化物酶及彈性蛋白酶的大量產(chǎn)生，血小板活化因子及許多炎癥介質(zhì)如激活的補(bǔ)體、白介素（IL-1、IL-6、IL-8、TGF）、TNF等大量釋放，以及細(xì)胞周圍環(huán)境中的生長(zhǎng)因子（血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子、血小板衍生生長(zhǎng)因子、表皮生長(zhǎng)因子、巨噬細(xì)胞集落刺激因子）等，引起內(nèi)皮細(xì)胞或白細(xì)胞表面特殊粘附分子的表達(dá)，從而使細(xì)胞粘附蛋白介導(dǎo)的中性粒細(xì)胞與內(nèi)皮細(xì)胞發(fā)生粘附，誘導(dǎo)中性粒細(xì)胞穿內(nèi)皮遷移以及對(duì)缺血組織的浸潤(rùn)和損傷。并通過(guò)誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡因子的產(chǎn)生，進(jìn)一步對(duì)組織細(xì)胞造成損害。

2．6 缺血再灌注損傷時(shí)細(xì)胞凋亡的相關(guān)凋亡基因:研究發(fā)現(xiàn)，在缺血再灌注的發(fā)生發(fā)展過(guò)程中，Bcl-2基因家族、Fas基因、P53、caspase、即早基因等多種凋亡基因均參與了凋亡的發(fā)生。這些調(diào)控基因相互調(diào)節(jié)和制約，構(gòu)成了一個(gè)復(fù)雜的網(wǎng)絡(luò)體系，共同調(diào)控著缺血再灌注后細(xì)胞凋亡的發(fā)生。

目前多數(shù)學(xué)者認(rèn)為，IR是各種因素相互作用、相互促進(jìn)共同作用的結(jié)果。IR時(shí)生成的自由基可促進(jìn)鈣超載，胞漿內(nèi)游離鈣增加又加速自由基產(chǎn)生，共同導(dǎo)致IR損傷。血管內(nèi)皮細(xì)胞和中性粒細(xì)胞作為IR中自由基、細(xì)胞粘附分子及其他生物活性物質(zhì)的重要來(lái)源，在IR損傷的發(fā)生發(fā)展中起重要作用，此外細(xì)胞代謝紊亂及其產(chǎn)生的細(xì)胞因子誘導(dǎo)產(chǎn)生的細(xì)胞凋亡因子也參與了IR損傷過(guò)程。

3皮瓣缺血再灌注損傷與細(xì)胞凋亡

近年來(lái)大量的研究表明，缺血再灌注損傷的發(fā)生不僅來(lái)自缺血再灌注的直接作用，同時(shí)凋亡機(jī)制的啟動(dòng)與放大后造成的組織壞死同樣也參與了上述組織的損傷過(guò)程。Schumer等 ［9］在缺血再灌注的大鼠腎臟組織觀察到細(xì)胞凋亡現(xiàn)象與缺血再灌注的關(guān)系。Gottlieb [10]于1994年首次在兔心臟上驗(yàn)證了再灌注損傷所導(dǎo)致的心肌細(xì)胞凋亡 。有研究進(jìn)一步表明，細(xì)胞凋亡是組織缺血再灌注損傷后細(xì)胞死亡的重要方式，并且組織缺血再灌注后細(xì)胞凋亡的發(fā)生與缺血的嚴(yán)重程度、再灌注時(shí)間的長(zhǎng)短有關(guān)。其中Kuo等[11-14]進(jìn)行實(shí)驗(yàn)證實(shí)，凋亡細(xì)胞量的增加和再灌注損傷的程度相關(guān)，而且凋亡的程度與缺血再灌注損傷的生化和病理學(xué)參數(shù)成正相關(guān)。同時(shí)還在觀察中發(fā)現(xiàn)，當(dāng)組織細(xì)胞發(fā)生缺血再灌注損傷時(shí)，未發(fā)生缺血的組織細(xì)胞在灌注后也發(fā)生細(xì)胞凋亡現(xiàn)象。從而推斷組織細(xì)胞發(fā)生凋亡后，可誘導(dǎo)相應(yīng)的凋亡分子和凋亡誘導(dǎo)分子釋放，導(dǎo)致正常的組織細(xì)胞發(fā)生死亡。概括起來(lái)缺血再灌注損傷與細(xì)胞凋亡存在如下關(guān)系：

3.1缺血再灌注損傷時(shí)氧自由基增多與細(xì)胞凋亡的關(guān)系：許多研究表明，氧自由基與細(xì)胞凋亡密切相關(guān)，可啟動(dòng)細(xì)胞凋亡。其機(jī)制為[15]：①直接損傷DNA ，誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡； ②誘發(fā)細(xì)胞膜脂質(zhì)過(guò)氧化，從而影響信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)系統(tǒng)，激活相關(guān)促凋亡基因，導(dǎo)致細(xì)胞死亡； ③導(dǎo)致蛋白質(zhì)交聯(lián)，使具有酶活性的蛋白質(zhì)功能喪失；④影響核基因的轉(zhuǎn)錄，改變細(xì)胞的表型特征，誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡。

3.2缺血再灌注損傷所致鈣超載與細(xì)胞凋亡的關(guān)系：鈣超載是組織缺血再灌注損傷的重要機(jī)制，也參與細(xì)胞凋亡過(guò)程，但其具體機(jī)制尚不清楚?？赡芘c以下因素有關(guān)：①激活Ca²⁺ 依賴性磷酸酶，破壞線粒體結(jié)構(gòu)和功能，ATP 生成減少，同時(shí)引起B(yǎng)cl-2 蛋白失活；②促進(jìn)氧自由基的生成，進(jìn)而促進(jìn)細(xì)胞凋亡的產(chǎn)生；③激活Ca²⁺ 依賴性的核酸內(nèi)切酶，降解DNA；④激活Ca²⁺ 依賴性中性蛋白酶(caplain)，介導(dǎo)TNF 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路和調(diào)控p53，從而誘發(fā)細(xì)胞凋亡。

3.3缺血再灌注損傷時(shí)線粒體通透性改變和能量代謝障礙與細(xì)胞凋亡的關(guān)系：細(xì)胞凋亡有兩條分子信號(hào)通路，其一為受體介導(dǎo)的死亡信號(hào)通路，主要由外源性信號(hào)引起。另一凋亡通路由線粒體介導(dǎo)，主要由內(nèi)源性信號(hào)所引起。通過(guò)細(xì)胞色素C的釋放，激活caspase 9 ，引起caspase級(jí)聯(lián)反應(yīng)。另外線粒體膜腔內(nèi)還釋放許許多多肽，對(duì)凋亡起重要的調(diào)控作用。線粒體通透性改變可以作為死亡的閘門[16]，不但決定細(xì)胞的死亡或者生存，而且決定細(xì)胞的死亡機(jī)制，即凋亡或壞死。至于細(xì)胞走向凋亡還是壞死則取決于線粒體內(nèi)ATP水平[17]。在組織缺血情況下，細(xì)胞若仍能以糖酵解的方式提供ATP，則細(xì)胞走向凋亡。如ATP 已耗竭，則細(xì)胞走向死亡。

3.4缺血再灌注損傷時(shí)所釋放細(xì)胞因子與細(xì)胞凋亡關(guān)系：組織缺血再灌注損傷時(shí)，應(yīng)激產(chǎn)生大量的細(xì)胞因子，如TNF、IL-6、IL-8、TGF 等，以及細(xì)胞周圍環(huán)境中產(chǎn)生大量的生長(zhǎng)因子（如：血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子、血小板衍生生長(zhǎng)因子、表皮生長(zhǎng)因子、巨噬細(xì)胞集落刺激因子等），通過(guò)細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)酪氨酸激酶和蛋白質(zhì)酪氨酸磷酸酶介導(dǎo)，引起組織細(xì)胞凋亡。研究發(fā)現(xiàn)直接注射TNF-α到活體組織內(nèi)，有凋亡典型的DNA 梯帶出現(xiàn)[18]，同時(shí)TNF-α還可致組織內(nèi)皮細(xì)胞發(fā)生凋亡[19]。TGF-β為多種上皮組織增殖抑制因子，體內(nèi)外實(shí)驗(yàn)證實(shí)TGF-β可誘導(dǎo)組織細(xì)胞凋亡。經(jīng)過(guò)有絲分裂原誘導(dǎo)組織細(xì)胞凋亡的組織中，TGF-βmRNA 表達(dá)水平增高，說(shuō)明TGF-β有致細(xì)胞凋亡的作用[20] 。

3.5缺血再灌注損傷時(shí)凋亡相關(guān)基因產(chǎn)生與細(xì)胞凋亡的關(guān)系：有研究發(fā)現(xiàn)，在缺血再灌注中，有多種凋亡相關(guān)基因參與細(xì)胞凋亡的發(fā)生。凋亡相關(guān)基因多達(dá)數(shù)十種，根據(jù)功能不同可分為：①抑制凋亡基因：如Bcl-2； ②促進(jìn)凋亡基因:Bcl-2 家族中的bax、Hrk、野生型p53；③雙向調(diào)控基因即早基因(IEGs)等，其中對(duì)Bcl-2 在缺血再灌注損傷中表達(dá)的研究較為深入。

3.5.1 Bcl-2 基因：Bcl-2 是缺血再灌注損傷中最重要的抗細(xì)胞凋亡基因，主要分布在線粒體膜、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜、核膜等處。Bcl-2抗凋亡的機(jī)制為：①直接的抗氧化； ②調(diào)節(jié)線粒體功能:Bcl-2可抑制MTP 的功能，減少細(xì)胞色素C 的釋放，阻止凋亡蛋白酶的激活；③維持細(xì)胞Ca²⁺ 穩(wěn)態(tài)，細(xì)胞內(nèi)Ca²⁺ 濃度的升高是細(xì)胞凋亡的始動(dòng)因素，Bcl-2 高表達(dá)可抑制內(nèi)質(zhì)網(wǎng)釋放Ca²⁺ ；④Bcl-2 與同族基因的bax 形成二聚體，Bcl-2 能抑制bax 誘導(dǎo)的細(xì)胞色素C釋放，阻止細(xì)胞凋亡。Bcl-2/Bax表達(dá)后的比例是決定細(xì)胞凋亡敏感性的變阻器[21]。

3.5.2 Fas：Fas是一種細(xì)胞表面受體，屬于腫瘤壞死因子受體(TNFR) 家族，F(xiàn)as配體(FasL)屬于TNF家族成員。Fas受體配體系統(tǒng)是激活細(xì)胞凋亡的最主要的受體介導(dǎo)途徑。Fas受體與FasL結(jié)合激活后，啟動(dòng)凋亡信號(hào)的跨膜傳遞，F(xiàn)as的“死亡區(qū)段”(death doman，DD)與Fas死亡結(jié)構(gòu)域相關(guān)蛋白（FADDPMORT1）結(jié)合，并激活天門冬氨酸特異性半胱氨酸蛋白酶(caspase)8，進(jìn)而導(dǎo)致caspase3的激活和一系列的級(jí)聯(lián)反應(yīng)，以Ca²⁺非依賴的形式誘發(fā)凋亡[22]。

3.5.3 p53基因：p53是與細(xì)胞DNA修復(fù)有關(guān)的重要細(xì)胞周期調(diào)控基因。野生型p53誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，突變型p53則抑制細(xì)胞凋亡。損傷后細(xì)胞核中野生型p53很快聚集，使細(xì)胞停止于G1PS 期，這使細(xì)胞難以恢復(fù)重新進(jìn)入細(xì)胞周期。如DNA損傷過(guò)于嚴(yán)重，DNA 無(wú)法恢復(fù)，則產(chǎn)生細(xì)胞凋亡。同時(shí)研究還發(fā)現(xiàn)，野生型p53 能下調(diào)Bcl-2的表達(dá)[23]。p53 在不同細(xì)胞中誘導(dǎo)凋亡的機(jī)制不同，但最終都是通過(guò)細(xì)胞色素C釋放和caspase的激活而完成細(xì)胞凋亡。

3.5.4 caspase 基因家族：caspase 基因家族為半胱天冬氨酸蛋白酶家族，在細(xì)胞內(nèi)以非活性的酶原形式存在，激活后通過(guò)caspase 級(jí)聯(lián)反應(yīng)，引起蛋白分解，驅(qū)動(dòng)細(xì)胞凋亡的發(fā)生。Cursio[24]的研究表明在肝缺血再灌注損傷（HIRI）后caspases 活性增加，提示caspases 的活性與HIRI 后細(xì)胞凋亡的發(fā)生密切相關(guān)。

3.5.5 即早基因(IEGS)：IEGS 是一組快速表達(dá)并參與細(xì)胞信息傳遞、生長(zhǎng)、分化和損傷修復(fù)的原癌基因，包括c2fos、c2jun、c2myc等。IEGS編碼的蛋白在核內(nèi)起著轉(zhuǎn)錄因子的作用。IEGS在細(xì)胞凋亡過(guò)程中被激活，不僅可調(diào)節(jié)細(xì)胞凋亡程度，而且可促進(jìn)細(xì)胞增殖。

4小結(jié)

皮瓣缺血再灌注損傷是一個(gè)多因素、多環(huán)節(jié)、多途徑參與的復(fù)雜的病理過(guò)程，細(xì)胞凋亡是其損傷的一個(gè)重要特征。隨著對(duì)細(xì)胞凋亡研究的進(jìn)一步深入，皮瓣缺血再灌注損傷的病理生理過(guò)程將會(huì)進(jìn)一步得到揭示，從而為在分子和基因水平防治皮瓣缺血再灌注引起的細(xì)胞損傷提供理論依據(jù)，為進(jìn)一步完善臨床治療提供新的有效途徑。這主要體現(xiàn)在以下兩個(gè)方面：①針對(duì)凋亡發(fā)生的不同環(huán)節(jié)，如消除或阻抑刺激因子，阻斷凋亡的信息傳導(dǎo)通路，如基因治療；②開(kāi)發(fā)調(diào)節(jié)細(xì)胞凋亡的新藥物。

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[收稿日期]2008-06-03[修回日期]2008-08-06

編輯/李陽(yáng)利