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        黃芪注射液對(duì)早期糖尿病腎病纖溶酶原激活物抑制物-1表達(dá)的影響

        2007-12-31 00:00:00

        王 宏 孫喜明 程宇甫

        摘要:目的 通過(guò)檢測(cè)黃芪注射液治療前后糖尿病腎病病人血清纖溶酶原激活物抑制物-1(PAI-1)表達(dá)的變化,探討其與糖尿病腎臟病變之間的關(guān)系,以及黃芪治療糖尿病腎病的機(jī)制。方法92例糖尿病病人,根據(jù)尿白蛋白排泄率分為糖尿病無(wú)腎病組(45例)與早期糖尿病腎病組(47例),早期糖尿病腎病組接受黃芪注射液治療,另設(shè)23名健康者作為對(duì)照組,應(yīng)用ELISA方法檢測(cè)血清PAI-1表達(dá)。結(jié)果 早期糖尿病腎病病人血清PAI-1表達(dá)為(5.51+0.31)μg/mL,較對(duì)照組、糖尿病無(wú)腎病組明顯升高,使用黃芪注射液治療后,早期糖尿病腎病組血清PAI-1表達(dá)降低為(3.41±0.21)μg/mL(P<0.05);尿白蛋白含量亦由治療前的(152±31)mg/24h降至(34±21)mg/24h(P<0.05)。結(jié)論P(yáng)AI一1在糖尿病腎病的發(fā)病過(guò)程中起重要作用,黃蓖注射液治療糖尿病腎病的機(jī)制之一可能是通過(guò)抑制PAI-1的表達(dá)實(shí)現(xiàn)的。

        關(guān)鍵詞:糖尿病腎病;纖溶酶原激活物抑制物-1;黃芪注射液

        中圖分類號(hào):R587.1 R289.5 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼:B 文章編號(hào):1672-1349(2007)07-0581-02

        糖尿病腎病(DN)的發(fā)病是多種細(xì)胞因子、生長(zhǎng)因子以及激素對(duì)高血糖的綜合反應(yīng)的結(jié)果。近年研究發(fā)現(xiàn),糖尿病腎病病人的纖溶酶原激活物抑制物-1(PAI-1)在血漿中濃度有顯著變化,從而提示PAI-1可能參與了DN的發(fā)生與進(jìn)展。本研究通過(guò)觀察黃芪注射液臨床治療前后,早期糖尿病腎病病人血清PAI-1表達(dá)的變化,探討其與糖尿病’腎臟病變之間的關(guān)系,以及黃芪注射液治療糖尿病腎病的機(jī)制。

        1 資料與方法

        1.1 臨床資料 選擇我院2005年—2006年糖尿病病人92例,糖尿病元腎病組(NDN組)45例,年齡36歲~71歲(41.5歲±12.7歲),均符合WHO診斷標(biāo)準(zhǔn),24h尿微量白蛋白<30mg/24h;早期糖尿病腎病組(DN組)47例,年齡33歲~69歲(45.2歲±14.7歲),24h尿微量白蛋白30mg/24h~300mg/24h。所有病人既往無(wú)急性腎炎、慢性腎炎、泌尿系感染、酮癥及近期使用腎毒性藥物史。另設(shè)正常對(duì)照組,為23名健康體檢者,年齡31歲~64歲(40.2歲±15.3歲)。

        1.2 治療方法 DN組及NDN組病人進(jìn)入實(shí)驗(yàn)前餐后2h血糖控制在10.0mmol/L以下,凡血壓超過(guò)135/85 mmHg(1mmHg=O.133kPa)者給予抗高血壓藥物治療(用鈣離子拮抗劑,應(yīng)用血管緊張素轉(zhuǎn)換酶抑制劑者不在人選之列),控制血壓于135/80mmHg以下;并在原降血糖、降血壓治療的基礎(chǔ)上加用黃芪注射液30mL加入5%葡萄糖注射液250mL、胰島素3U靜脈輸注,每日1次,共應(yīng)用4周。

        1.3 檢測(cè)項(xiàng)目 進(jìn)入實(shí)驗(yàn)前以及黃芪注射液治療4周末,于晨起空腹抽取靜脈血,按試劑盒要求分離血漿,一30℃冰箱保存待測(cè)。采用雙抗體夾心ELISA法(大連泛邦科技實(shí)業(yè)有限公司提供試劑盒)。操作嚴(yán)格按說(shuō)明進(jìn)行,應(yīng)用芬蘭生產(chǎn)的Well/seanMK-3型酶標(biāo)儀測(cè)OD492值,根據(jù)不同濃度標(biāo)準(zhǔn)血清的OD492值作校正曲線,計(jì)算待測(cè)標(biāo)本血清PAI-1濃度。24h尿白蛋白測(cè)定:收集24h的尿,準(zhǔn)確記錄尿量,標(biāo)本攪勻,采用磺柳酸比濁法測(cè)定24h尿白蛋白含量,儀器用721分光光度計(jì)。受試期間保持用藥前的生活方式與飲食習(xí)慣,不用影響血脂代謝的藥物。

        1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(x±s)表示,采用SPSS 12.0軟件進(jìn)行方差分析及q檢驗(yàn),P<0.05為有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

        2 結(jié)果

        對(duì)照組和NDN組治療前后24h尿白蛋白和PAI-1的表達(dá)均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05);DN組24h尿白蛋白和PAI-1的表達(dá)在治療前較對(duì)照組和NDN組顯著增高。治療4周后與治療前比較均有明顯下降,但仍較對(duì)照組和NDN組高(P<0.05)。詳見表1。

        表1各組尿島蛋白排泄率及PAI-1水平的比較(x±s)

        3 討論

        DN是糖尿病常見而嚴(yán)重的并發(fā)癥之一,糖尿病引起腎損害的確切機(jī)制并不完全清楚,DN的基本病變是腎小球體積增大、基膜增厚及足突融合、細(xì)胞外基質(zhì)(ECM)增多、腎小管-間質(zhì)纖維化,從而導(dǎo)致腎小球硬化。腎臟微血管病變的發(fā)生發(fā)展與血管內(nèi)皮細(xì)胞的損傷及纖溶活性降低有著密切的關(guān)系。

        PAI-1是一種絲氨酸蛋白酶抑制物,是調(diào)節(jié)纖溶活性的關(guān)鍵因子,PAI-1是纖溶系統(tǒng)的關(guān)鍵酶,主要來(lái)源于血管內(nèi)皮細(xì)胞,亦來(lái)自于活化的血小板α顆粒及增生的平滑肌細(xì)胞。測(cè)定PAI-1的血漿活性,可反映體內(nèi)纖溶系統(tǒng)的功能狀態(tài),纖溶系統(tǒng)的主要功能是清除沉積在血管壁上的纖維蛋白,以保持血流暢通。高糖可直接引起PAI-1的增多(在體外葡萄糖能促進(jìn)人血管內(nèi)皮細(xì)胞和平滑肌細(xì)胞PAI-1的合成和分泌,促進(jìn)PAI-1的轉(zhuǎn)錄的啟動(dòng)),糖基化終末產(chǎn)物可刺激系膜細(xì)胞PAI-1基因表達(dá)和生物學(xué)活性,白細(xì)胞介素-1(IL-1)、血管緊張素Ⅱ(angⅡ)、氧化低密度脂蛋白(OX-LDL)均可引起血漿PAI-1升高。PAI-1不僅抑制纖溶酶活性,并抑制對(duì)細(xì)胞外基質(zhì)(ECM)有降解作用的基質(zhì)金屬蛋白酶(MUPs)的活性。本實(shí)驗(yàn)觀察到糖尿病腎病病人PAI-1的表達(dá)明顯高于無(wú)糖尿病腎病的病人,因而PAI-1在DN的發(fā)生、發(fā)展中具有重要作用,提示PAI-1可作為早期DN的一個(gè)診斷指標(biāo)。

        中醫(yī)學(xué)認(rèn)為,糖尿病腎病屬于中醫(yī)“消渴”“水腫”范疇,其主要病因中病機(jī)為消渴日久,耗氣傷陰,氣陰兩虛,氣虛行血無(wú)力致血瘀,陰虛致根本之陰虧損,腎陰不足,陰損及陽(yáng),陽(yáng)虛不能行氣化水,水濕潴留,發(fā)為水腫。故臨床治療當(dāng)扶正祛邪并舉,以益氣養(yǎng)陰、化瘀通絡(luò)。黃芪屬扶正固本,補(bǔ)中益氣類中藥。黃芪注射液是中藥黃芪的提取物,含有黃芪皂苷類、黃芪多糖、氨基酸類及微量元素等多種成分,臨床上廣泛用于治療各種原因引起的蛋白尿。黃芪的主要作用是降低血小板的聚集性,增強(qiáng)紅細(xì)胞的變形能力,緩解高凝狀態(tài),并能改變血瘀時(shí)的血流狀態(tài),使毛細(xì)血管保持開放,血流加快,總血流量增加,疏通微循環(huán)。高凝聚高黏狀態(tài)造成組織缺血缺氧,缺氧造成內(nèi)皮細(xì)胞脂質(zhì)過(guò)氧化的損傷,引起內(nèi)皮功能紊亂。黃芪注射液通過(guò)抗脂質(zhì)過(guò)氧化的過(guò)程,加強(qiáng)氧自由基的清除,對(duì)缺氧內(nèi)皮細(xì)胞產(chǎn)生細(xì)胞保護(hù)作用。陶少平等研究認(rèn)為黃芪治療糖尿病腎病的機(jī)制可能是通過(guò)抑制血轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子一魚(TGF-β1)的表達(dá)實(shí)現(xiàn)的。本研究觀察到,黃芪注射液能顯著降低DN病人尿白蛋白排泄率,降低PAI-1的表達(dá)水平。提示黃芪可通過(guò)抑制DN病人PAI-1的過(guò)度表達(dá),改善腎臟細(xì)胞外基質(zhì)蛋白代謝異常,發(fā)揮抗纖維化的作用,有效地保護(hù)腎臟。

        PAI-1在DN的發(fā)生、發(fā)展中具有重要作用,PAI-1可作為早期糖尿病腎病的一個(gè)診斷指標(biāo),黃芪可通過(guò)抑制DN病人PAI-1的過(guò)度表達(dá),改善腎臟細(xì)胞外基質(zhì)蛋白代謝異常,發(fā)揮抗纖維化的作用,有效地保護(hù)腎臟。

        (本文編輯 王雅潔)

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