摘 要：目的：觀察中藥?kù)町惪祵?duì)子宮內(nèi)膜異位癥大鼠腹腔液IL－2、IL－6的影響，探討其治療子宮內(nèi)膜異位癥的機(jī)理。方法：將40只健康雌性SD大鼠隨機(jī)分為4組：A組只行開(kāi)關(guān)腹，B、C、D組均行內(nèi)膜移植，造模完成后，A、B組以生理鹽水灌胃，C、D組分別給予中藥?kù)町惪?、西藥丹那唑灌胃?周后開(kāi)腹收集腹腔液測(cè)定IL－2、IL－6表達(dá)水平。結(jié)果：祛異康可以降低異位癥大鼠腹腔液中IL－2及IL－6濃度(P＜0.05；P＜0.01)。結(jié)論；祛異康能明顯改善腹腔微環(huán)境，其治療子宮內(nèi)膜異位癥的作用機(jī)理可能是通過(guò)改變腹腔液微環(huán)境，降低細(xì)胞因子IL－2、IL－6的水平，從而抑制異位內(nèi)膜生長(zhǎng)來(lái)實(shí)現(xiàn)的。

關(guān)鍵詞：子宮內(nèi)膜異位癥；大鼠模型，IL－2，IL－6；中藥?kù)町惪?；?shí)驗(yàn)研究

中圖分類(lèi)號(hào)：R285．5 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A

文章編號(hào)：1007－2349(2007)10－0036－02

子宮內(nèi)膜異位癥(endometriosis，EMS簡(jiǎn)稱(chēng)內(nèi)異癥)，在育齡婦女中發(fā)病率為3％～10％，其好發(fā)年齡是25～45歲，臨床以痛經(jīng)、性交痛、月經(jīng)失調(diào)、不孕、盆腔包塊為主要表現(xiàn)。中醫(yī)藥治療本病對(duì)改善臨床癥狀，減輕患者痛苦，提高不孕者的妊娠率有顯著療效，本研究通過(guò)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)，從異位癥模型大鼠腹腔液IL－2、IL－6變化角度客觀評(píng)價(jià)中藥?kù)町惪祵?duì)子宮內(nèi)膜異位癥的作用機(jī)理。

1 材料與方法

1．1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 健康SD雌性大鼠40只，體重150～180g，由西安交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院動(dòng)物中心提供(動(dòng)物合格證號(hào)：醫(yī)動(dòng)字第08－005號(hào))。

1．2 實(shí)驗(yàn)藥物 祛異康主要由當(dāng)歸、赤芍、川芎、三棱、桂枝、丹參等十三味中藥組成，購(gòu)于陜西中醫(yī)學(xué)院門(mén)診部，將上藥煎煮濃縮成含生藥2g／mL，丹那唑(上海華聯(lián)制藥有限公司生產(chǎn)，國(guó)藥準(zhǔn)字H31021681)，用1％的甲基纖維素納溶解成20mg／mL的溶液。

1．3 主要試劑 IL－2、IL－6放免試劑盒，購(gòu)自北京科美東雅生物技術(shù)有限公司。

1．4 實(shí)驗(yàn)方法

1．4．1 動(dòng)物模型制作與分組 SD大鼠適應(yīng)性喂養(yǎng)3天后隨機(jī)分成4組，每組10只?？瞻讓?duì)照組(A組)：只行開(kāi)腹關(guān)腹術(shù)；模型組(B組)、丹那唑組(C組)、祛異康組(D組)均采用種植內(nèi)膜方法建立子宮內(nèi)膜異位癥動(dòng)物模型。造模當(dāng)天肌注青霉素20萬(wàn)^u／次，2次／d，連續(xù)3d，造模后7d打開(kāi)腹腔觀察異位內(nèi)膜生長(zhǎng)情況，以異位病灶呈米粒大小之結(jié)節(jié)，切面可見(jiàn)一線形閉合水孔，異位內(nèi)膜組織均形成囊狀，囊內(nèi)為無(wú)色透明液體，或囊內(nèi)形成多個(gè)串珠狀，周?chē)梢?jiàn)豐富血管形成，表明造模成功。術(shù)后第8d，A組、B組用生理鹽水2mL／100g灌胃，1次／d；C組用丹那唑混懸液，含生藥0.016g／mL／100g灌胃(相當(dāng)于成人每天劑量的16倍)，1次／d；D組用祛異康煎劑，含生藥2g／mL，2mL／次灌胃(相當(dāng)于成人每天劑量的6.125倍)，1次／d，各組均連續(xù)灌胃28d，擇動(dòng)情期處死。

1．4．2 取材 各組大鼠于末次給藥后24h，水合氯醛0.5mL腹腔麻醉，打開(kāi)腹腔，用生理鹽水沖洗腹腔，收集腹腔液。

1．4．3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 各組實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)采用均數(shù)士標(biāo)準(zhǔn)差(χ±s)表示，多個(gè)樣本均數(shù)先進(jìn)行方差分析，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義再進(jìn)行兩兩比較，組間以τ檢驗(yàn)比較。

2 結(jié)果

2．1 各組大鼠異位內(nèi)膜病灶體積比較 見(jiàn)表1。

2．2 各組大鼠腹腔液中IL--2含量比較 見(jiàn)表2。

2．3 各組大鼠腹腔液中IL－6含量比較 見(jiàn)表3。

3 討論

白細(xì)胞介素(interleukin，IL)是細(xì)胞因子中的一種，參與免疫應(yīng)答和介導(dǎo)炎癥反應(yīng)。當(dāng)異位的子宮內(nèi)膜作為抗原刺激患者的免疫系統(tǒng)，可誘發(fā)機(jī)體產(chǎn)生體液和細(xì)胞免疫應(yīng)答，導(dǎo)致其腹腔液中巨噬細(xì)胞數(shù)量以及外周血液中淋巴細(xì)胞的活性均顯著增加。近年來(lái)研究表明多種細(xì)胞因子參與了子宮內(nèi)膜異位癥的免疫發(fā)病機(jī)制，其中IL－2、IL－6在細(xì)胞因子網(wǎng)絡(luò)中扮演重要的角色。IL－2水平的高低是反映機(jī)體細(xì)胞免疫功能的變化，IL－6可通過(guò)介導(dǎo)免疫和炎癥反應(yīng)導(dǎo)致盆腔局部粘連、纖維化和免疫學(xué)異常，從而促進(jìn)內(nèi)異癥的發(fā)生發(fā)展。

子宮內(nèi)膜異位癥臨床表現(xiàn)的痛經(jīng)、月經(jīng)失調(diào)、不孕、盆腔包塊等婦科疾病。中醫(yī)認(rèn)為多因外感寒熱濕邪，或內(nèi)傷七情及婦科官腔手術(shù)創(chuàng)傷等所致，使子宮、沖任受損，離經(jīng)之血停滯其中，瘀血形成，留結(jié)于子宮、胞脈而發(fā)病，辨證以血瘀證為主。中藥?kù)町惪捣街挟?dāng)歸、川芎、赤芍養(yǎng)血活血，行氣止痛，使氣血調(diào)和；元胡、蒲黃、乳沒(méi)共具理氣化瘀止痛之效，可減輕或消除子宮內(nèi)膜異位癥引起的疼痛，使氣血通暢則積血易去；“通則不痛”，桂枝辛溫發(fā)散，溫通血脈；丹參味苦性微寒，專(zhuān)走血分，寒熱平調(diào)，共起祛瘀止痛，活血通絡(luò)之效；血竭、桔梗、三棱、莪術(shù)消癥散結(jié)除積血，能減少盆腔粘連，化散囊腫、包塊等子宮內(nèi)膜異位病灶。

本實(shí)驗(yàn)結(jié)果證明，模型組大鼠腹腔液中IL－2、IL－6含量明顯高于A、C、D組，說(shuō)明IL－2、IL－6參與了異位子宮內(nèi)膜的生長(zhǎng)、發(fā)育。而祛異康組大鼠腹腔液IL－2、IL－6明顯降低(P＜0.05，P＜0.01)，與丹那唑有同樣效果。由此推測(cè)中藥?kù)町惪抵委熥訉m內(nèi)膜異位癥的機(jī)理是其活血化瘀作用改善了腹腔微環(huán)境，降低細(xì)胞因子IL－2、IL－6的水平，從而達(dá)到抑制炎性反應(yīng)及異位內(nèi)膜生長(zhǎng)，逐漸使卵巢和盆腔組織恢復(fù)其解剖功能來(lái)實(shí)現(xiàn)的。