【摘要】 目的 從CR1分子數(shù)量表達(dá)方面探討促紅細(xì)胞生成素和血清瘦素水平與慢性腎衰病人療效評(píng)價(jià)的關(guān)系。

方法 選擇40例慢性腎功能不全(CRF)貧血患者作為觀察組，每例皮下注射rhEPO 2000 U/ 次，每周2 次，共用6—8周;同時(shí)口服右旋糖酐鐵片0.5 g/次，3次/d。治療期間禁止輸血、透析、使用免疫抑制劑。另選同期接受健康檢查者36例作為對(duì)照。結(jié)果 rhEPO治療前觀察組外周血紅細(xì)胞上CR1分子的表達(dá)及血Hb的水平均顯著低于對(duì)照組(P<0.01)，治療后兩項(xiàng)指標(biāo)均較治療前顯著升高(P<0.01)，但仍顯著低于對(duì)照組(P<0.01)，血清瘦素明顯降低(P<0.01)。結(jié)論 rhEPO 治療后在增加紅細(xì)胞上CR1分子表達(dá)和血Hb 水平的同時(shí)，尚可間接調(diào)節(jié)NK細(xì)胞和LAK細(xì)胞的功能，提高機(jī)體免疫系統(tǒng)的功能。

【關(guān)鍵詞】 慢性腎功能衰竭；促紅細(xì)胞生成素；瘦素

文章編號(hào)：1003-1383(2007)02-0134-02中圖分類號(hào)：R 692.5文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A

腎性貧血是慢性腎衰竭病人主要的臨床表現(xiàn)之一。隨著人類重組促紅細(xì)胞生成素(rhEPO)技術(shù)的發(fā)展，rhEPO已被廣泛應(yīng)用于腎性貧血的治療中并取得很好的療效。瘦素是近年發(fā)現(xiàn)的一種脂肪細(xì)胞分泌的肥胖基因編碼的蛋白產(chǎn)物，造血干細(xì)胞在瘦素刺激下可發(fā)生增殖效應(yīng)，與紅細(xì)胞生成素協(xié)同促進(jìn)紅系生長(zhǎng)［1］。也有研究表明紅細(xì)胞表面具有1型補(bǔ)體受體分子(CR1)，主要的免疫功能是消除循環(huán)免疫復(fù)合物(CIC)及病原體，將抗原提呈給淋巴細(xì)胞;增強(qiáng)T 淋巴依賴性反應(yīng);增強(qiáng)免疫調(diào)控作用及效應(yīng)細(xì)胞樣作用［2］。因此研究紅細(xì)胞CR1分子的數(shù)量表達(dá)與慢性腎衰竭的關(guān)系具有重要意義。本文初步從CR1分子數(shù)量表達(dá)方面探討促紅細(xì)胞生成素和血清瘦素水平與慢性腎衰病人療效評(píng)價(jià)的關(guān)系。

對(duì)象與方法

1.對(duì)象 選擇在我院住院治療的40例慢性腎功能不全(CRF)并貧血患者作為觀察組，男24例，女16例，年齡19—72 歲，病程1—11 年。 其中原發(fā)病為慢性腎小球腎炎26例，狼瘡腎炎4例，腎結(jié)石5例，多囊腎3例，慢性腎盂腎炎2 例。血尿素氮(BUN)9.69—37.15 mmol/ L，平均19.03 mmol/ L，血清肌酐(Scr)164.2—840.9 μmol/ L，平均502.55 μmol/ L。均無(wú)感染、慢性失血及缺鐵等。另選同期健康體檢者36例作為對(duì)照組，男24例，女22例，年齡16—66 歲。兩組性別、年齡比較無(wú)顯著性差異(P>0.05)，具有可比性。

2.方法

(1)治療方案 觀察組患者均接受沈陽(yáng)三生制藥股份有限公司生產(chǎn)的益比奧(成分為rhEPO)治療。每例患者皮下注射2000 U/ 次，每周2次，共用6—8周;同時(shí)口服右旋糖酐鐵片0.5 g/次，3 次/d。治療期間禁止輸血、透析和使用免疫抑制劑。

(2)紅細(xì)胞上CR1分子的測(cè)定 建立的ELISA法檢測(cè)紅細(xì)胞上CR1分子的表達(dá)。抽取靜脈血2 ml，以EDTA 抗凝，經(jīng)PBS 洗滌3 次、戊二醛固定后，以PBS 配成2%的紅細(xì)胞懸液，取25 μl紅細(xì)胞懸液加入“V”形板各孔中，依次加入抗CR1單抗mAb、堿性磷酸酶標(biāo)記的羊抗鼠IgG和底物單磷酸酚酞(PMP)，離心，吸取上層顯色液，加入到另一個(gè)干凈的“U”形板中測(cè)定A405值。實(shí)驗(yàn)中以一抗的稀釋液(PBS/ BSA)作為空白對(duì)照，用綿羊紅細(xì)胞(無(wú)CR1分子)作為陰性對(duì)照。檢測(cè)結(jié)果以觀察組的A405值與空白對(duì)照A405值之差作為測(cè)定值。

(3)血Hb水平的測(cè)定 采用日本Sysmex KX221型血液分析儀測(cè)定，試劑為其配套產(chǎn)品。

(4)血清瘦素水平的測(cè)定 于晨7時(shí)左右空腹取血2 ml，標(biāo)本離心后，將血清保存-20℃以下備用。血清瘦素水平的測(cè)定采用放射免疫分析法。

3.統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 計(jì)量資料以-±s表示，采用t檢驗(yàn)。

結(jié)果

rhEPO治療前觀察組外周血紅細(xì)胞上CR1分子的表達(dá)及血Hb的水平均顯著低于對(duì)照組(P<0.01)，治療后兩項(xiàng)指標(biāo)均較治療前顯著升高(P<0.01)，但仍顯著低于對(duì)照組(P<0.01)，血清瘦素明顯降低(P<0.01)。提示CRF患者紅細(xì)胞上CR1的表達(dá)降低并存在明顯的貧血，應(yīng)用rhEPO治療后對(duì)CR1的表達(dá)及Hb和血清瘦素的水平均有顯著改善。

討論

紅細(xì)胞CR1分子具有許多重要的生物學(xué)功能:①具有Ⅰ因子輔因子活性(FICA)和C3/C5轉(zhuǎn)化酶衰變加速作用(DAA)，可調(diào)節(jié)兩條補(bǔ)體途徑的激活;②補(bǔ)體調(diào)理的抗原物質(zhì)可經(jīng)補(bǔ)體受體與巨噬細(xì)胞結(jié)合，促進(jìn)吞噬且有利于巨噬細(xì)胞對(duì)抗原信息的傳遞，刺激其他免疫細(xì)胞而擴(kuò)大免疫效應(yīng);③通過(guò)免疫黏附對(duì)CIC具有強(qiáng)大的輔助消除作用;④紅細(xì)胞主要的免疫功能是消除CIC及病原體，將抗原提呈給淋巴細(xì)胞;增強(qiáng)T淋巴依賴性反應(yīng);增強(qiáng)免疫調(diào)控作用及效應(yīng)細(xì)胞樣作用。本研究證實(shí)，CRF患者紅細(xì)胞上CR1分子的表達(dá)降低，但用rhEPO治療后具有較明顯的提高，說(shuō)明CRF患者存在EPO生成不足。而EPO生成的減少，可能與患者的腎功能受損有關(guān)。紅細(xì)胞上CR1分子表達(dá)的降低可導(dǎo)致其RCIA功能下降，清除CIC的能力隨之下降，而致血中CIC濃度增高，并沉淀在相應(yīng)組織中。而大量CIC 在腎小球基底膜的沉積，可加劇腎臟的炎癥反應(yīng)而使腎功能進(jìn)一步受損，形成惡性循環(huán)。應(yīng)用rhEPO治療后，紅細(xì)胞上CR1 分子的表達(dá)顯著提高，同時(shí)血Hb的水平也明顯升高，充分說(shuō)明rhEPO對(duì)CRF患者治療的效果。另外，rhEPO治療后在增加紅細(xì)胞上CR1分子表達(dá)和血Hb水平的同時(shí)，尚可間接調(diào)節(jié)NK細(xì)胞和LAK細(xì)胞的功能，提高機(jī)體免疫系統(tǒng)的功能。

瘦素是一種蛋白質(zhì)激素，主要在腎臟清除［3，4］：其主要生理功能是感受機(jī)體的營(yíng)養(yǎng)狀況，通過(guò)調(diào)節(jié)食欲和能量代謝來(lái)調(diào)節(jié)體質(zhì)量。當(dāng)體質(zhì)量增加時(shí)，脂肪組織分泌瘦素增多，通過(guò)調(diào)節(jié)下丘腦神經(jīng)內(nèi)分泌軸，促進(jìn)食欲的神經(jīng)肽Y(NPY)分泌減少，引起食欲下降；此外瘦素還可促進(jìn)能量消耗，導(dǎo)致體質(zhì)量減輕，兩者共同作用實(shí)現(xiàn)對(duì)體質(zhì)量的調(diào)節(jié)［5，6］。慢性腎功能衰竭時(shí)血瘦素水平升高，高瘦素血癥抑制食欲，增加能量消耗，造成尿毒癥患者瘦體質(zhì)量(1ean body mass)減輕，并可能引起營(yíng)養(yǎng)不良，進(jìn)一步加重慢性腎衰竭患者的病情。本研究表明經(jīng)EPO 治療后，CRF患者的血清瘦素水平明顯降低，血Hb 水平增高。認(rèn)為可能是：①rhEPO治療后腎功能改善，瘦素是由腎小球?yàn)V過(guò)而部分清除。②高瘦素可能可以增加rhEPO治療的敏感性，血清瘦素與rhEPO有相互協(xié)同的作用。而消耗部分血清瘦素。③高血清瘦素可能有刺激骨髓紅細(xì)胞生成的作用。慢性腎功能衰竭病人經(jīng)EPO治療后CR1水平明顯升高，高血清瘦素對(duì)CR1有無(wú)直接作用，尚缺乏證據(jù)。有待于進(jìn)一步研究與探索。但動(dòng)態(tài)定量檢測(cè)CRF患者紅細(xì)胞上CR1分子的表達(dá)和血清瘦素水平，對(duì)判定病情的發(fā)展及療效確有一定的臨床參考價(jià)值。

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