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        4-氨基安替比鄰和乙醇在金魚體內(nèi)積聚量的溫度和表面活性依賴

        2013-08-15 06:23:02孔令辰天津師范大學(xué)
        化工管理 2013年8期
        關(guān)鍵詞:山梨酸水相金魚

        孔令辰(天津師范大學(xué))

        實驗部分

        材料:4-氨基安替比鄰,乙醇,緩血酸胺和聚山梨酸酯。乙醇溶于蒸餾水中并在4℃保存。

        準(zhǔn)備工作:金魚,1-3g,置于含有0.075%氯化鈉溶液并且不斷攪拌混合的容積為48升矩形玻璃缸中。而這個玻璃缸懸在溫度維持在10℃-35℃的變溫水槽中。所有實驗用魚均來自同一批魚苗,以排除不同種群魚的差異性。

        預(yù)備實驗可以證明吸收率在溫度變化調(diào)整后快速穩(wěn)定。用于實驗的金魚至少在實驗條件溫度下觀察適應(yīng)24個小時。然后他們被分別至于含有100ml的4-氨基安替比鄰溶液(1.5mg/ml)和75ml乙醇溶液(1.0%),并分別以0.05M緩血酸胺為緩沖溶液使溶液pH穩(wěn)定在7.0。實驗操作過程中,聚山梨酸酯作為表面活性劑,在溶液中濃度為0.01%。所有實驗溶液均在當(dāng)天制備。在將金魚浸入藥物溶液的各個不同實驗階段,金魚都用蒸餾水漂洗后裹上棉紙稱重。金魚從水缸中取出后,要立即進(jìn)行實驗或者冷凍備用。

        實驗方法:將金魚浸泡在15ml的0.05M緩血酸胺為緩沖溶液使溶液pH穩(wěn)定在7.0的4-氨基安替比鄰溶液中,然后在氯仿中分散為混合均液。然后用離心機(jī)分離,并除去5.0ml的氯仿,然后加入10ml的0.01MHCl溶液并攪拌20分鐘。從水相中取2ml,加入7ml水和2ml二甲氨基苯甲醛試劑。在430nm測量其吸光度并按每克魚衡量其4-氨基安替比鄰的含量。

        為測量4-氨基安替比鄰到魚體表面的吸附量,將金魚置于實驗藥液中30秒后,對4-氨基安替比鄰含量進(jìn)行分析。在對之前準(zhǔn)備的空白液和浸泡實驗魚后的實驗溶液的吸光度之間進(jìn)行比較,并沒有發(fā)現(xiàn)顯著的不同。而沒有浸入金魚的空白實驗溶液,也在相同實驗條件下操作,僅作為參考對比。

        為了確定乙醇的吸收量,每條實驗魚都用5ml的蒸餾水潤洗后,均漿用離心機(jī)分離。將0.5ml上清液轉(zhuǎn)移到閃爍管中,混合10ml的閃爍液進(jìn)行計算,直到收集到最小10000的計數(shù)。甲苯用做內(nèi)標(biāo)來更正猝熄,計數(shù)系統(tǒng)的效率大概是75%。

        結(jié)果與討論

        分布容量表明金魚體內(nèi)積聚藥物的能力。4-氨基安替比鄰的分布容量隨著溫度的升高而增加,較乙醇相比表現(xiàn)為溫度依賴。結(jié)果表明4-氨基安替比鄰的分布容量是熱敏平衡的,這大概是由于與血漿蛋白結(jié)合而到轉(zhuǎn)移到非水相導(dǎo)致的。而乙醇的分布容量沒有呈現(xiàn)溫度依賴,表明它有限地分布在金魚體內(nèi)的水相中。在對這兩種藥物的實驗中,聚山梨酸酯都沒有影響到分布容量值。

        對于這兩種藥物,吸收的間隙常量對于溫度都相當(dāng)敏感。這兩個吸收反應(yīng)的能壘均涉及擴(kuò)散,因此他們的吸收常量都符合阿倫尼烏斯公式。對于4-氨基安替比鄰吸收行為的活化能缺乏表面活性作用,通過圖中的斜率就可以確定。而相對于物質(zhì)在水中的擴(kuò)散行為,吸收的活化能相當(dāng)大,4-氨基安替比鄰吸收的速控步驟應(yīng)該是穿過生物膜的擴(kuò)散行為而不是水滯留層。相似的小分子穿過細(xì)胞膜的被動運輸?shù)幕罨芤灿羞^報道[4-5]。例如,尿素和安替比鄰穿過兔膽囊上皮細(xì)胞膜的活化能分別是13.0和9.3kcal/mol。

        Fig.1 乙醇根據(jù)乙醇濃度的吸收量

        Fig.2 4-氨基安替比鄰在不同溫度下根據(jù)時間的吸附量

        Fig.3 4-氨基安替比鄰和乙醇根據(jù)溫度的分布容量

        結(jié)論

        實驗證明金魚體內(nèi)乙醇的分布量不受溫度和表面活性劑的影響。而4-氨基安替比鄰的分布量同樣不受表面活性劑影響,但確隨溫度的升高而顯著增加。金魚對這兩種藥物吸收的間隙常量都是溫度依賴的。大概是因為4-氨基安替比鄰與血漿蛋白結(jié)合而到轉(zhuǎn)移到非水相,而乙醇有限地分布在金魚體內(nèi)的水相中所導(dǎo)致。

        [1]N.A.HallandW.L.Hayton,J.Pharm.Sci.,56,304(2007).

        [2]M.Gibaldi and C.H.Nightingale,ibid.,57,226(2008).

        [3]A.R.DiSanto and J.G.Wagner,ibid.,58,1077(2009).

        [4]C.Brun,J.Lab.Clin.Med.,37,955(2011).

        [5]B.E.Cohen,J.Membr.Riol.,20,205(2005)

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