關(guān)鍵詞：麥冬[Ophiopogon japonicus（L.f.）Ker-Gawl.]；新品種保護(hù)；特異性、一致性、穩(wěn)定性；測(cè)試指南中圖分類號(hào)：S567.23；S339 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A

文章編號(hào)：0439-8114（2025）07-0105-09

DOI：10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2025.07.019 開放科學(xué)（資源服務(wù)）標(biāo)識(shí)碼（OSID）：回

Formulation of guidelines for distinctness，uniformity and stability testing of Ophiopogon japonicus

ZHAO Cui-rong1， LU Yang1， ZHAO Dan2， DAI Wei2，DENG Chao3，WANG Zhi-an4， ZHAO Ming1

XiangyangAcadeyofrilturaliencesangang47HubeiCina；iayangcadeofgriculturalieesag60 Sichuan，China;DevelopntCenterofiencendTchnologyiistryofAgricutureanduralAirs，eijingOi; 4.Zhejiang Research Instituteof Traditional Chinese MedicineCo.，Ltd.，Hangzhou31Oo23，China）

Abstract：InordertopromotetheprotectionofnewvarietiesofOphiopogonjaponicus，utilizationnddevelopmentofitsgemplasmre sourcesoriginatedinChinaaswellasthevelopmentofcalcharacteristicmedicinalOpiopogonjaponicusidustryeearh ontheformulationofthedistictness，uniformityandstabity（DUS）testguideofOphiopogonjaponicusvarietieswascarredout.By plantingandobseing93cesionsofOpopogonjponicusgermplsmresources，theculivationpropagationmethodsadp typicdatacolectiomethodsofOphiopogonjaponicusweresudied，7traitswereselectedforphenotypicdeseriptionofOiopgon japonicusvarieties，therequirementsfobreedingmaterialsforOphiopogonjapoicusvarietyDUStestwerclarifid，tegnealrinciplesforDUSdeterminatioofOopogonjaponicusreestablished，ndtheOphopogonjaponicusDUStestguidewafolated.

KeyWords：Ophiopogonjaponicus（L.f.）Ker-Gawl.；newvarietyprotection；distinctess，uniforityandstabilty（DUS）；estguide lines

麥冬［Ophiopogon japonicus（L.f.）Ker-Gawl.]是原產(chǎn)于中國(guó)的食藥用兼園林觀賞草本植物，地下塊根入藥。其產(chǎn)業(yè)發(fā)展速度和規(guī)模很大程度上依賴于對(duì)其開發(fā)利用價(jià)值的深入挖掘、種質(zhì)資源的創(chuàng)新利用、新品種的培育以及品種的更新?lián)Q代。對(duì)麥冬食藥用塊根有效成分的研究較多，但在麥冬植物新品種保護(hù)和種質(zhì)資源利用方面進(jìn)展緩慢。按規(guī)定，獲得中國(guó)植物新品種權(quán)保護(hù)，首先該品種必須是新品種，其次應(yīng)已被納人中國(guó)公布的植物新品種保護(hù)種屬名錄。根據(jù)《植物新品種保護(hù)條例》，新品種需同時(shí)滿足以下5項(xiàng)條件：特異性（Distinctness）、一致性（Uniformity）穩(wěn)定性（Stability）、合規(guī)的品種命名及新穎性。《植物新品種保護(hù)條例》《中華人民共和國(guó)種子法》《非主要農(nóng)作物品種登記辦法》《主要農(nóng)作物品種審定辦法》均規(guī)定，申請(qǐng)審定、登記、品種權(quán)保護(hù)的品種應(yīng)當(dāng)符合特異性、一致性和穩(wěn)定性要求。因此特異性、一致性和穩(wěn)定性測(cè)試（簡(jiǎn)稱DUS測(cè)試）是申請(qǐng)審定、登記、品種權(quán)保護(hù)必經(jīng)的程序。而開展DUS測(cè)試的技術(shù)依據(jù)是DUS測(cè)試指南（標(biāo)準(zhǔn)）。

農(nóng)業(yè)植物品種DUS測(cè)試所依據(jù)的技術(shù)文件包括國(guó)際植物新品種保護(hù)聯(lián)盟（簡(jiǎn)稱UPOV）測(cè)試指南、國(guó)家或行業(yè)DUS測(cè)試標(biāo)準(zhǔn)等，是國(guó)際、國(guó)內(nèi)實(shí)施植物新品種保護(hù)、新品種DUS審查和測(cè)試機(jī)構(gòu)開展DUS測(cè)試的重要技術(shù)基礎(chǔ)和依據(jù)，也是國(guó)際通用的植物品種描述的統(tǒng)一依據(jù)。

中國(guó)于1999年3月申請(qǐng)加人UP0V，同年4月23日正式加入U(xiǎn)POV公約，成為其第39個(gè)成員國(guó)，并執(zhí)行UP0V1978年文本。此后，中國(guó)開始接收國(guó)家植物新品種保護(hù)名錄內(nèi)國(guó)內(nèi)外植物新品種權(quán)申請(qǐng)，并自主開展新品種DUS測(cè)試工作[1，2]。至此，中國(guó)的植物新品種保護(hù)實(shí)現(xiàn)了與國(guó)際同步，也為國(guó)際間植物品種資源交流共享提供了制度保障。

自1999年加入U(xiǎn)POV以來，中國(guó)的植物新品種保護(hù)制度一直在持續(xù)發(fā)展、完善，保護(hù)水平與國(guó)內(nèi)各作物的育種水平息息相關(guān)。若中國(guó)未來加入U(xiǎn)POV1991年文本公約，那么中國(guó)境內(nèi)所有的植物新品種都可獲得品種權(quán)保護(hù)，國(guó)家也就不需要發(fā)布植物新品種保護(hù)名錄了。

麥冬是百合科（Liliaceae）沿階草屬（Ophiopogon Ker-Gawl.）草本植物，其葉片呈細(xì)長(zhǎng)條線形，基生，呈禾葉狀，四季常綠，是重要的園林觀賞植物、藥用植物、特色經(jīng)濟(jì)作物。2024年8月，國(guó)家衛(wèi)生健康委員會(huì)、國(guó)家市場(chǎng)監(jiān)管總局批準(zhǔn)將麥冬、天冬、化橘紅、地黃4種納入按照傳統(tǒng)既是食品又是中藥材的物質(zhì)目錄。中藥“麥冬\"別名“不死草”，中醫(yī)藥對(duì)麥冬的研究由來已久?！渡褶r(nóng)本草經(jīng)》記載，麥冬是養(yǎng)陰潤(rùn)肺的上品藥物，言其“久服輕身，不老不饑”?！侗静莘纸?jīng)》稱麥冬“甘、微苦，微寒。潤(rùn)肺清心、瀉熱生津、化痰止嘔、治嗽行水”?！夺t(yī)學(xué)衷中參西錄》言其“能人胃以養(yǎng)胃液，開胃進(jìn)食，更能入脾以助脾散精于肺，定喘寧嗽”。2020版《中華人民共和國(guó)藥典》描述其功能與主治“養(yǎng)陰生津，潤(rùn)肺清心。用于肺燥干咳，陰虛癆嗽，喉痹咽痛，津傷口渴，內(nèi)熱消渴，心煩失眠，腸燥便秘”[3]?，F(xiàn)代藥理研究表明，麥冬具有耐缺氧、增強(qiáng)心肌收縮力、抗心律失常等作用[4-9]，含有沿階草苷、谷甾醇、氨基酸、高異黃酮、維生素等，具有抗疲勞、消除自由基和降低血糖的作用[10-13]?！笆奈錦"期間，國(guó)家中藥材產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系將麥冬列入單品種聯(lián)合攻關(guān)首批目錄。2020年新冠疫情發(fā)生以來，國(guó)粹中草藥文化和藥理研究日益興盛，為現(xiàn)階段麥冬在鄉(xiāng)村振興與特色產(chǎn)業(yè)發(fā)展中的研究和發(fā)展提供了廣闊空間。

麥冬尚未被列入中國(guó)的植物新品種保護(hù)名錄。UPOV現(xiàn)行標(biāo)準(zhǔn)中尚未包含麥冬新品種DUS測(cè)試指南，日本雖制定了沿階草屬植物的審查基準(zhǔn)[14]，但其適用范圍僅包含麥冬和黑沿階草（OphiopogonplaniscapusNakai）2個(gè)種，且尚未被UPOV采納。為有效保護(hù)和合理利用中國(guó)優(yōu)勢(shì)麥冬種質(zhì)資源，推動(dòng)麥冬新品種的培育與應(yīng)用，促進(jìn)麥冬特色產(chǎn)業(yè)的健康發(fā)展，開展了麥冬品種DUS測(cè)試指南的制定研究，旨在建立統(tǒng)一的麥冬品種描述方法，為麥冬育種研究提供新品種鑒定、保護(hù)的技術(shù)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1材料

麥冬原產(chǎn)于中國(guó)，資源分布較廣，在園林綠化中被廣泛種植。為了平衡地區(qū)差異，由麥冬主產(chǎn)區(qū)的科研單位聯(lián)合組建麥冬DUS測(cè)試指南研制工作組，共同完成麥冬測(cè)試指南研制工作。

截至2020年底，共收集麥冬類資源（含沿階草屬、山麥冬屬及其野生近緣種）93份，依次編號(hào)MD01、MD02、…、MD93，并建立麥冬類作物種質(zhì)資源圃。

資源圃位于襄陽市農(nóng)業(yè)科學(xué)院團(tuán)山基地中 31.5^°N，112.89^°E ，海拔 37.13m ，屬北亞熱帶季風(fēng)氣候，年降水日數(shù)為107～135d，降水量為 820～1100mm ，其中夏季降水量為 400～450mm ；年平均總?cè)照諘r(shí)數(shù) 1800～2 100h ;無霜期 228～249d ；年平均氣溫在13～22% ;最高氣溫出現(xiàn)在7一8月，極端高溫 39^°C 最低氣溫一般出現(xiàn)在1月，極端低溫 -10°C ；日均溫度變幅1月 月 2～11^°C，3 月 8～17°C ，4月 14～24^°C，5 月 19～28^°C，6 月 23～31^°C，7 月 25～34°C 8月 24～33^°C，9 月 19～28^°C，10 月 14～23^°C，11 月 8～15^°C 12月 2～10% 。

1.2 方法

1.2.1資源收集和分類鑒定 ① 通過從麥冬科研及育種單位征集、市場(chǎng)購買、公共綠地收集、野外保護(hù)性收集等途徑，收集麥冬類種質(zhì)資源，并詳細(xì)記錄植株的采集地點(diǎn)、時(shí)間。 ② 按株行距 20cm×33cm 的密度，依資源引進(jìn)的先后順序分8批次栽植于基地，建立麥冬類作物種質(zhì)資源圃。川麥冬1號(hào)、浙麥冬1號(hào)作為僅有的地方審定（認(rèn)定）品種，分別由綿陽市農(nóng)業(yè)科學(xué)研究院、浙江中藥研究所有限公司提供，作為標(biāo)準(zhǔn)品種引入資源圃。 ③ 依據(jù)《中國(guó)植物志》[15]和植物分類檢索表，對(duì)種質(zhì)圃的資源開展分類鑒定，主要目的是區(qū)分沿階草屬與山麥冬屬資源，以確定測(cè)試指南的適用范圍，

1.2.2栽培技術(shù)研究麥冬栽培技術(shù)研究包括栽植時(shí)期、繁殖方法、生育期與生長(zhǎng)發(fā)育規(guī)律、生長(zhǎng)習(xí)性、肥水管理、連作障礙觀察等方面。 ① 2017—2019年分8批次（3月、4月、5月、6月、7月、9月、10月、11月）開展地栽試驗(yàn)，記錄栽培措施和成活情況，結(jié)合成活率、生長(zhǎng)量、生育期、生產(chǎn)和測(cè)試需要，確定最適栽植土壤類型、最佳栽植時(shí)期，并對(duì)生育階段進(jìn)行劃分。 ② 采用分株繁殖法，并收集野外植株種子，開展種子行播繁殖試驗(yàn)。 ③2020 年3月將一批旺盛生長(zhǎng)的麥冬苗分栽到大田，觀察成活率；在此基礎(chǔ)上，2020年11月進(jìn)行資源圃更新移栽。

1.2.3DUS測(cè)試性狀篩選旨在針對(duì)植株的根、莖、葉、花、果實(shí)、種子、整株、群體等不同部位情況和部分生理生化性狀開展觀測(cè)，篩選適宜用于DUS測(cè)試的性狀。性狀指具體觀測(cè)的植株或植株部位的表現(xiàn)，一般應(yīng)是受遺傳控制的、品種固有的、穩(wěn)定一致的表現(xiàn)型。DUS測(cè)試性狀的篩選需滿足以下6項(xiàng)條件：其一，是特定的基因型或者基因型組合的結(jié)果；其二，在特定環(huán)境下具有一致性和可重復(fù)性;其三，在品種間表現(xiàn)出足夠的差異，能夠用于確定特異性；其四，可被準(zhǔn)確描述和識(shí)別；其五，能夠滿足一致性的要求；其六，能夠滿足穩(wěn)定性要求[1，16-19]

1.2.4觀測(cè)方法研究觀測(cè)方法研究涵蓋觀測(cè)時(shí)期、測(cè)試地點(diǎn)、田間試驗(yàn)要求、觀測(cè)是否借助工具、觀測(cè)取樣數(shù)量等方面，同時(shí)包括測(cè)試周期的確定及附加測(cè)試的必要性等。在對(duì)麥冬表型性狀開展觀測(cè)方法研究時(shí)，需明確植株發(fā)育至某特定時(shí)期觀測(cè)時(shí)該性狀最為穩(wěn)定，這一時(shí)期即為測(cè)試時(shí)期；明確測(cè)試性狀充分表達(dá)對(duì)栽培環(huán)境條件的特殊要求，此涉及測(cè)試地點(diǎn)；需明確如何控制田間試驗(yàn)條件對(duì)性狀表達(dá)的干擾，此類問題屬于田間試驗(yàn)管理范疇；明確性狀測(cè)試時(shí)所需的測(cè)量方式，即通過自測(cè)或借助工具測(cè)量，以及如何實(shí)現(xiàn)測(cè)量的準(zhǔn)確與高效；明確觀測(cè)群體的樣本量，以使測(cè)量值更接近真實(shí)值，從而更好地反映品種實(shí)際情況，此關(guān)乎個(gè)體觀測(cè)還是群體觀測(cè)；明確如何確定品種性狀表達(dá)的穩(wěn)定性，這涉及測(cè)試周期；還需明確如何確定選測(cè)性狀。

1.2.5測(cè)試指南結(jié)構(gòu)的確定為促進(jìn)新品種和種質(zhì)資源的國(guó)際交流互認(rèn)，通常以國(guó)際公認(rèn)的DUS測(cè)試指南結(jié)構(gòu)作為共同的參照，按照UPOV和GB/T19557.1—2004《植物新品種特異性、一致性和穩(wěn)定性測(cè)試指南總則》[16.17，20]所確定的國(guó)家植物品種DUS測(cè)試指南總則的結(jié)構(gòu)要求，確定DUS測(cè)試指南的結(jié)構(gòu)框架，并確定研究對(duì)象的種屬拉丁學(xué)名、中英文學(xué)名、國(guó)際/國(guó)內(nèi)現(xiàn)有DUS測(cè)試指南版次等信息，隨后按照通用的封面結(jié)構(gòu)進(jìn)行排版。

2 結(jié)果與分析

2.1 確定指南的框架結(jié)構(gòu)

依相關(guān)慣例[16-19]，經(jīng)梳理明確麥冬DUS測(cè)試指南主要由封面、前言、目錄、正文、附錄5部分（共15章）構(gòu)成。其中，附錄A、附錄B、附錄C為規(guī)范性附錄，各部分結(jié)構(gòu)與對(duì)應(yīng)內(nèi)容的關(guān)聯(lián)可參照表1完整展示。

表1麥冬DUS測(cè)試指南的結(jié)構(gòu)和組成

2.2 確定指南適用范圍和植物學(xué)名

對(duì)收集到的不同產(chǎn)地、不同來源的93個(gè)麥冬類種質(zhì)資源，經(jīng)繁殖、栽培試驗(yàn)及種屬鑒定后發(fā)現(xiàn)，不同種屬的麥冬類資源的主要形態(tài)差異見表2。

依據(jù)表2所述差異，結(jié)合《中國(guó)植物志中第十五卷》（1978年）[15]《百合科》，將資源圃的麥冬類資源劃分為沿階草屬和山麥冬屬兩大類群。由于不同種、屬的“麥冬類植物\"形態(tài)差異較明顯，需將沿階草屬麥冬與山麥冬屬麥冬類植物區(qū)分開，獨(dú)立制訂DUS測(cè)試技術(shù)指南。本研究麥冬測(cè)試指南的適用范圍界定如下：沿階草屬麥冬，涵蓋川麥冬和浙麥冬，不包含湖北麥冬、短葶山麥冬（闊葉山麥冬）和山麥冬屬等其他廣義麥冬類植物。

確定指南名稱時(shí)，沿用通用的DUS測(cè)試指南命名規(guī)范[19]，采用拉丁學(xué)名Ophiopogon japonicus（L.f.）Ker-Gawl.作為麥冬的學(xué)名表述，而非文獻(xiàn)中比較常見的\"DwarfLilyturf”。該命名方式主要為了區(qū)分山麥冬屬中習(xí)慣稱“麥冬”的一類植物。

表2不同種屬麥冬類資源的主要形態(tài)差異

2.3確定供試繁殖材料要求

從繁殖方式研究結(jié)果來看，麥冬可以種子繁殖或分株繁殖。生產(chǎn)上分株繁殖較普遍，變異小。在麥冬新鮮種子種皮呈現(xiàn)固有顏色后，進(jìn)行采收、去皮、趁鮮播種，翌年3一5月可以出苗。充分成熟后的干種子播種后很難出苗。育種上可能會(huì)采用種子繁殖，但種子繁殖變異大，且種子發(fā)芽慢，需要冷藏處理，因此不建議采用種子苗進(jìn)行測(cè)試。

遵照GB/T19557.1—2004《植物新品種特異性、一致性和穩(wěn)定性測(cè)試指南總則》2的要求，依據(jù)麥冬繁殖方式、測(cè)試所需的植株數(shù)量，確定麥冬DUS測(cè)試時(shí)繁殖材料的要求如下： ① 繁殖材料以種苗形式提供； ② 提交的種苗數(shù)量至少60盆，每盆苗為1叢，且至少4個(gè)分蘗； ③ 提交的繁殖材料種苗應(yīng)尚未抽生過花葶，外觀健康，活力高，無病蟲侵害，葉片和根系完整，并對(duì)根部進(jìn)行保濕處理； ④ 提交的繁殖材料應(yīng)不進(jìn)行任何影響品種性狀正常表達(dá)的處理，如果已處理，應(yīng)提供處理的詳細(xì)說明； ⑤ 提交的繁殖材料應(yīng)符合中國(guó)植物檢疫的有關(guān)規(guī)定。

2.4 確定測(cè)試植株的栽植時(shí)間

麥冬移栽時(shí)，需要對(duì)植株的地上、地下部分進(jìn)行短剪，同時(shí)剪除老根和地中莖，因此傷流重，緩苗時(shí)間長(zhǎng)，需要精細(xì)管理。從8個(gè)批次的栽植結(jié)果來看，麥冬苗3一11月移栽均能成活，精細(xì)管理后成活率均可達(dá) 100% ，但以6—8月移栽成活速度更快；同時(shí)，麥冬5—7月開花結(jié)實(shí)期對(duì)水肥敏感，6一8月高溫下移栽對(duì)養(yǎng)護(hù)措施要求嚴(yán)苛，結(jié)合麥冬秋季地下塊根開始膨大的特點(diǎn)，研究認(rèn)為長(zhǎng)江中下游地區(qū)的麥冬適合于立秋后移栽，第二年植株抽葶時(shí)開啟測(cè)試。

2.5 篩選確定DUS測(cè)試性狀

2017一2019年，挑選了近60個(gè)麥冬類作物測(cè)試性狀進(jìn)行觀測(cè)，包括抽葶期、開花期、結(jié)實(shí)期；初生葉葉尖形狀；葉片顏色、綠色程度、葉尖形狀、邊緣光滑程度、長(zhǎng)度、寬度、長(zhǎng)寬比、背面花青苷顯色強(qiáng)度、背面中脈隆起與否、背面中脈隆起程度；花葶姿態(tài)、形狀、相對(duì)葉叢高矮、花青苷顯色強(qiáng)度、長(zhǎng)度、粗細(xì)、花后生苗與否、花后結(jié)實(shí)與否；花序分枝與否、長(zhǎng)度；花著生密度；苞片形狀、長(zhǎng)度、腋內(nèi)簇生花朵數(shù)；花著生姿態(tài)；花萼花后是否宿存；花瓣顏色、形狀；子房位置；果著生姿態(tài)；果實(shí)形狀、顏色；植株生長(zhǎng)習(xí)性、分蘗數(shù)；地下走莖多少；須根粗細(xì)；塊根形狀、顏色、橫截面顏色、直徑；花藥形狀；花絲相對(duì)花藥長(zhǎng)短；花柱形狀等。同步盡可能多拍攝照片記錄性狀。

通過下列方法對(duì)觀察過的性狀進(jìn)行刪減： ① 對(duì)同一性狀，開展年際間、同一品種內(nèi)比較，以評(píng)估性狀表達(dá)的穩(wěn)定性； ② 對(duì)同一性狀，開展年際間、不同品種間性狀表達(dá)的差異性比較，排除栽培條件干擾及外界病蟲害影響，以評(píng)估品種間的特異性； ③ 對(duì)同一性狀，同一年內(nèi)、同一品種內(nèi)個(gè)體間數(shù)據(jù)比較，以評(píng)估一致性； ④ 刪除“花葶姿態(tài)、形狀、相對(duì)葉叢高矮、花后結(jié)實(shí)與否、花后生苗與否”“花著生姿態(tài)”“果著生姿態(tài)\"“子房位置”等易混淆、無顯著區(qū)分價(jià)值的分屬性狀。

撰寫測(cè)試指南討論稿時(shí)，人選性狀39個(gè)，征求意見稿時(shí)調(diào)整為25個(gè)，送審稿入選24個(gè)性狀，報(bào)批稿新增了一些葉片性狀，并根據(jù)藥用植物研究需要增加了采收期塊根性狀。

對(duì)選測(cè)性狀的列入，一般遵照國(guó)際慣例，遵循的原則如下：現(xiàn)階段育種水平下可能不關(guān)注，但以后可能會(huì)關(guān)注的性狀；當(dāng)前育種水平下雖然關(guān)注，但其他性狀能更便捷、準(zhǔn)確地區(qū)分不同品種，且隨著育種發(fā)展可能僅該性狀能區(qū)分品種的，可列為選測(cè)性狀。

現(xiàn)階段，麥冬的育種水平不高，麥冬道地藥材生產(chǎn)上重點(diǎn)關(guān)注塊根有效成分含量和商品塊根的大小分級(jí)；但依靠地上部分已能夠區(qū)分不同品種，故將塊根麥冬總皂苷含量、塊根長(zhǎng)度、塊根直徑3個(gè)性狀列入了選測(cè)性狀。最終指南入選DUS性狀27個(gè)，其中24個(gè)必測(cè)性狀、3個(gè)選測(cè)性狀（表3）。

2.6 確定性狀觀測(cè)方法

性狀觀測(cè)方法的確定一般伴隨測(cè)試性狀的選擇同步進(jìn)行，并結(jié)合麥冬的生長(zhǎng)習(xí)性及UPOV-TGP/7規(guī)定[21]的要求編制。

2.6.1 觀測(cè)時(shí)期 麥冬為多年生宿根性常綠草本植物，一次種植可連續(xù)多年開花。部分性狀（如葉片寬度）在同一品種內(nèi)表現(xiàn)穩(wěn)定，品種間差異較小，因此觀測(cè)時(shí)期要求較寬松；但有的性狀（如葉片長(zhǎng)度），隨栽培年限增長(zhǎng)而增加，需固定于特定生長(zhǎng)年份觀測(cè)（如第一次抽葶后）；同時(shí)，各性狀表達(dá)有特定最佳觀測(cè)時(shí)期（如花被片顏色、小花數(shù)量、花序長(zhǎng)度等），需逐一明確各性狀的最佳觀測(cè)時(shí)期。

表3麥冬DUS測(cè)試性狀名稱、觀測(cè)時(shí)期、性狀類型、性狀類別統(tǒng)計(jì)

注：QN為數(shù)量性狀;PQ為假質(zhì)量性狀;QL為質(zhì)量性狀;NG為群體觀測(cè);VG為群體目測(cè);VG/MS為個(gè)體觀測(cè)性狀;MS為個(gè)體測(cè)量

觀測(cè)時(shí)期的確定原則如下： ① 與采收期相關(guān)的性狀于采收時(shí)測(cè)定； ② 其余性狀需精確對(duì)應(yīng)6個(gè)生育階段，即抽葶前、抽葶期、花期、結(jié)實(shí)期、成熟期、采收期（表4）。

2.6.2觀測(cè)與記錄方法 ① 依據(jù)是否借助測(cè)量工具，將表型性狀區(qū)分為目測(cè)性狀（V/visual）和測(cè)量性狀（M/measurement）2種類型。目測(cè)即通過感官測(cè)試，比如顏色，可借助非線性圖表（如比色卡）和標(biāo)準(zhǔn)品種比對(duì)輔助。測(cè)量即借助線性刻度工具測(cè)試，如長(zhǎng)度、寬度、重量等指標(biāo)。 ② 依據(jù)觀測(cè)對(duì)象所需樣本大小，將性狀觀測(cè)記錄方式區(qū)分為個(gè)體記錄性狀（S/Single）和群體記錄性狀（G/Group）兩類。個(gè)體記錄（S）需取20個(gè)有效觀測(cè)值，最后按統(tǒng)計(jì)分析方法計(jì)算平均值;群體記錄（G）一般取一個(gè)群體觀測(cè)值，或觀測(cè)3次取平均值，如塊根粒重。 ③ 將測(cè)試工具和測(cè)試群體組合后，將表型性狀觀測(cè)方法區(qū)分為個(gè)體目測(cè)（VS）、群體目測(cè)（VG）、個(gè)體測(cè)量（MS）、群體測(cè)量（MG）4種。個(gè)體觀測(cè)性狀（VS/MS）需隨機(jī)選取不少于20株植株，每株僅采集1個(gè)目標(biāo)器官或部位。群體觀測(cè)性狀（VG/MG）應(yīng)觀測(cè)整個(gè)小區(qū)或規(guī)定大小的混合樣本。

表4麥冬生育階段

2.6.3測(cè)試周期麥冬是常異花授粉作物，生產(chǎn)中以分株繁殖為主，其繁殖苗性狀變異較小，一般1個(gè)測(cè)試周期即可完成評(píng)估。因此采用1周期測(cè)試。通常從定植的第2年開始測(cè)試。未來若因育種技術(shù)進(jìn)步導(dǎo)致品種同質(zhì)化加劇，則需修訂指南并延長(zhǎng)測(cè)試周期。

2.6.4測(cè)試地點(diǎn)通常在同一地點(diǎn)測(cè)試。某些性狀在該地點(diǎn)測(cè)試不能充分表達(dá)時(shí)，可在其他符合條件的地點(diǎn)觀測(cè)[22]

2.6.5田間試驗(yàn)要求 ① 依據(jù)UPOV規(guī)范，試驗(yàn)設(shè)2次重復(fù)，每次重復(fù)至少包含25株植株。種植密度為株距 25～30cm ，行距 30～40cm ，略低于大田種植密度，以確保性狀充分表達(dá)。 ② 植株盆栽或地栽均可，地栽更接近大田生產(chǎn)方式，故推薦地栽。宜選用pH6～7 的沙壤土或腐殖土，此類土壤更利于麥冬類生長(zhǎng)。地栽時(shí)，一般要求前茬不是麥冬或山麥冬屬作物。 ③ 必要時(shí)，將近似品種與被測(cè)試品種相鄰種植。 ④ 試驗(yàn)管理與大田管理相同。

2.6.6附加測(cè)試若現(xiàn)有DUS基本性狀無法區(qū)有效分品種，可以選擇指南基本性狀表中未列出的性狀或其他輔助性狀開展附加測(cè)試。但這些選用的附加測(cè)試性狀必須符合前述的6條選取原則[1，16-19]：具有可重現(xiàn)性、穩(wěn)定性、一致性、可描述和識(shí)別性、受遺傳控制、能穩(wěn)定顯示品種間差異（特異性）。附加測(cè)試性狀可來源于指南性狀表中的選測(cè)性狀，也可以是指南以外的其他性狀。

2.7確定特異性、一致性和穩(wěn)定性判定方法

遵循GB/T19557.1—2004確定的原則進(jìn)行特異性、一致性和穩(wěn)定性的判定，判定過程與制定指南時(shí)物種的育種水平相關(guān)。

2.7.1總體原則特異性、一致性和穩(wěn)定性的判定按照GB/T19557.1—2004確定的原則進(jìn)行。

2.7.2特異性的判定待測(cè)品種應(yīng)明顯區(qū)別于所有已知品種。在測(cè)試中，當(dāng)待測(cè)品種至少有1個(gè)性狀與最為近似的品種具有明顯且可重現(xiàn)的差異時(shí)，即可判定待測(cè)品種具備特異性[23]。

2.7.3一致性的判定對(duì)于無性繁殖的種類，一致性判定時(shí)，采用 1% 的群體標(biāo)準(zhǔn)和至少 95% 的置信概率。當(dāng)樣本為6～35株群體時(shí)，最多允許1個(gè)異型株；當(dāng)樣本為36～60個(gè)群體時(shí)，最多允許2個(gè)異型株[24]。

對(duì)于其他類型品種，一致性判定時(shí)，品種的變異程度不能顯著超過同類型品種。2.7.4穩(wěn)定性的判定若某個(gè)品種具備一致性，則可認(rèn)為該品種具備穩(wěn)定性。一般不對(duì)穩(wěn)定性進(jìn)行測(cè)試。必要時(shí)，可以種植該品種的下一批繁殖材料，與以前提供的繁殖材料相比，若性狀表達(dá)無明顯變化，則可判定該品種具備穩(wěn)定性[25]

2.8 確定性狀表

根據(jù)測(cè)試需要，將測(cè)試性狀分為基本性狀、選測(cè)性狀?；拘誀钍菧y(cè)試中必須使用的性狀，即必測(cè)性狀?！陡戒汚麥冬性狀表》包括A.1基本性狀表和A.2選測(cè)性狀表，屬于規(guī)范性附錄，是指南必不可少的部分。

2.8.1性狀選擇部分性狀雖能滿足DUS基本性狀的條件，但現(xiàn)階段育種水平下可能不被關(guān)注，或者現(xiàn)階段不用該性狀，而用別的性狀能更方便區(qū)別不同品種時(shí)，可作為選測(cè)性狀。最終塊根的長(zhǎng)度、直徑及麥冬總皂昔含量3個(gè)性狀被確定為麥冬的選測(cè)性狀。

2.8.2性狀排序性狀表列出了性狀名稱、性狀類型、觀測(cè)時(shí)期、觀測(cè)記錄方法、表達(dá)狀態(tài)及相應(yīng)的代碼和標(biāo)準(zhǔn)品種等內(nèi)容。性狀名稱單列一欄，有國(guó)際通用的固定表述格式[26]“觀測(cè)部位：名稱”，例：“植株：姿態(tài)”。

依據(jù)UPOV：TG/1/3、UPOV：TGP/7對(duì)指南性狀進(jìn)行排序，大致優(yōu)先按植物學(xué)順序（種子、幼苗、植株、根、莖、葉、花、果、種），同時(shí)依據(jù)植物器官性狀排列順序（從大到小、從外到內(nèi)、從下到上）測(cè)試時(shí)期（生育階段）性狀類別（姿態(tài)、高度、長(zhǎng)度、寬度、大小、形狀、顏色、其他）綜合排序[1]。

2.8.3性狀分級(jí)和表達(dá)狀態(tài)的描述綜合多年的觀測(cè)結(jié)果和《中國(guó)植物志》的品種描述對(duì)性狀進(jìn)行代碼分級(jí)。

分級(jí)是為了方便記錄和建立一致的品種描述形式，將每個(gè)測(cè)試性狀劃分為一系列表達(dá)狀態(tài)，每個(gè)表達(dá)狀態(tài)賦予1個(gè)數(shù)字代碼，所有表達(dá)狀態(tài)都在指南中列出。表達(dá)狀態(tài)的順序要符合UPOV：TGP/7模板，較小的、較少的、程度低的給予較低的代碼，顏色一般按光譜順序或出現(xiàn)的先后順序排列，形狀一般從尖到圓或從凸到凹排列，當(dāng)性狀表達(dá)狀態(tài)達(dá)7級(jí)以上時(shí)，偶數(shù)代碼的描述可表述為“前一個(gè)表達(dá)狀態(tài)到后一個(gè)表達(dá)狀態(tài)”的形式。

麥冬指南測(cè)量性狀按“2倍標(biāo)準(zhǔn)差”法完成分級(jí)。2.8.4符號(hào)標(biāo)識(shí)觀測(cè)時(shí)期的標(biāo)識(shí)以生育階段的代碼標(biāo)記，并標(biāo)注觀測(cè)記錄的方法（MG/MS/VG/VS）。

性狀表達(dá)類型分為質(zhì)量性狀（QL）、數(shù)量性狀（QN）、假質(zhì)量性狀（PQ），標(biāo)識(shí)在性狀名稱的下方。對(duì)單一性狀的解釋要單列1個(gè)附錄B，在性狀表中性狀名稱下以 （+） 標(biāo)注，表示附錄B中有解釋。涉及多個(gè)性狀需要一起在附錄B解釋的，在性狀表中性狀名稱下依次以其在附錄B中出現(xiàn)的先后順序以（a（b）標(biāo)記。

報(bào)批稿標(biāo)識(shí)了1個(gè)QL性狀（葉片：條紋），20個(gè)QN性狀，6個(gè)PQ必測(cè)性狀（表3），5個(gè)標(biāo)記（a）的性狀。

2.8.5標(biāo)準(zhǔn)品種的選擇選擇標(biāo)準(zhǔn)品種時(shí)，主要考慮入選品種具有較好的穩(wěn)定性、能一種多用、數(shù)量盡可能少。通常1個(gè)性狀至少應(yīng)有1個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品種，如果代碼分5級(jí)以上，至少2個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品種。指南入選了10個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品種：川麥冬1號(hào)、浙麥冬1號(hào)、玉龍草、白紋麥冬、銀霧麥冬、黑龍麥冬、MD23、MD51、MD52、MD83。

2.8.6分組性狀的確定分組性狀不宜多，主要是為方便對(duì)測(cè)試品種分組和篩選近似品種而設(shè)立，適當(dāng)入選QL性狀。指南入選3個(gè)分組性狀：a）植株：姿態(tài)；b葉片：長(zhǎng)度；c）花被片：張開姿態(tài)。

2.8.7性狀表的解釋對(duì)生育階段的界定、涉及多個(gè)性狀的解釋和需要獨(dú)立解釋的性狀，進(jìn)行文字或圖、表、照片解釋，以說明性狀觀測(cè)的方法、明確觀測(cè)方法或分級(jí)，形成《附錄B麥冬性狀表的解釋》。制定的麥冬測(cè)試指南總計(jì)對(duì)性狀表中的18個(gè)性狀進(jìn)行了測(cè)試解釋。

2.9 制訂技術(shù)問卷

技術(shù)問卷用于由育種人登記育種人信息、品種植物學(xué)歸類、選育過程、特殊備注、主要特征、近似品種等信息，有助于測(cè)試人員了解品種特性和安排分組測(cè)試，還有助于品種權(quán)授權(quán)審核。

技術(shù)問卷中有一項(xiàng)重要工作，即確定技術(shù)問卷性狀。技術(shù)問卷性狀用以反映品種主要特征。技術(shù)問卷性狀不需太多，但指南分組性狀數(shù)據(jù)必須有。指南入選了10個(gè)技術(shù)問卷性狀：抽葶期、植株姿態(tài)、葉片條紋、葉片長(zhǎng)度、花序姿態(tài)、花序苞片數(shù)、花被片張開姿態(tài)、種皮藍(lán)色程度、植株分蘗數(shù)、地下莖數(shù)量。

3 討論

廣義的“麥冬\"類植物包含了沿階草屬（Ophio-pogonKer-Gawl.）和山麥冬屬（LiriopeLour.）的多個(gè)不同物種[27]。不同種屬的“麥冬\"形態(tài)上的主要差異在于花器官姿態(tài)、種皮顏色和根形態(tài)，成株葉片的長(zhǎng)、寬也有差異，但苗期時(shí)差異不顯著。當(dāng)前全國(guó)麥冬主產(chǎn)區(qū)為四川省綿陽市、浙江省慈溪市和寧波市、

湖北省襄陽市以及福建省泉州市、仙游縣、莆田市等地。不同產(chǎn)區(qū)、不同種屬的麥冬形態(tài)各異，栽培方式、收獲時(shí)間差異很大，育種水平也各不相同[28]。湖北省襄陽市產(chǎn)區(qū)主栽湖北麥冬（Liriope spi-cata Lour（Thunb）.var.prolifera Y.T.Ma） [29.3o]，四川省綿陽市產(chǎn)區(qū)主栽川麥冬（ 2n=4x=68 ）[31] （Ophiopogonjaponicus（L.f.）Ker-Gawl.），浙江省慈溪市、寧波市產(chǎn)區(qū)主栽浙麥冬（2n=4x=68）[32]（Ophiopogon japonicus（L.f.）Ker-Gawl.） 。福建省泉州市、仙游縣、莆田市產(chǎn)區(qū)主要栽培短葶山麥冬（Liriopemuscari（Decn.）Bailey）[33]湖北麥冬（ 2n=3x=54 ）為山麥冬（Liriope spicata Lour.，2n=4x=72 ）的變種，屬三倍體，通常不結(jié)實(shí)，依賴分株繁殖[29.30.34-38]，其地下塊根洗凈干燥后成為商品山麥冬。短葶山麥冬[39葉片寬長(zhǎng)，俗稱大麥冬，可開花結(jié)實(shí)，分株繁殖，地下塊根洗凈干燥后成為商品山麥冬。川麥冬和浙麥冬是沿階草屬麥冬，植株可以開花結(jié)果，通常不用種子繁殖而采取分株繁殖，地下塊根洗凈干燥后成為商品麥冬。2005年以前，中藥材山麥冬和麥冬是混用的，在很多的經(jīng)典名方中，二者也是通用的。2005年起，《中華人民共和國(guó)藥典》（以下簡(jiǎn)稱《藥典》）單獨(dú)收錄山麥冬[40]，二者始逐漸區(qū)分應(yīng)用。

3.1關(guān)于對(duì)日本研制的麥冬測(cè)試審查基準(zhǔn)的參考

日本制定的麥冬測(cè)試審查基準(zhǔn)僅適用于麥冬（Ophiopogon japonicus（L.f.）KerGawl.）和黑沿階草（OphiopogonplaniscapusNakai）[i4]，其適用范圍與本研究存在差異，故無法直接應(yīng)用于麥冬DUS測(cè)試。在綜合參考該審查基準(zhǔn)后，新增了葉片形狀性狀，并在葉片顏色分級(jí)中補(bǔ)充“其他”選項(xiàng)，以涵蓋潛在的特殊表型品種。

指南制定時(shí)，國(guó)際上沒有其他關(guān)于麥冬的測(cè)試標(biāo)準(zhǔn)可供參考，與日本麥冬測(cè)試審查基準(zhǔn)的結(jié)合將有利于麥冬測(cè)試指南的國(guó)際化應(yīng)用及麥冬新品種的國(guó)際化推廣應(yīng)用。

3.2關(guān)于麥冬塊根成分含量性狀是否納入麥冬性狀表

當(dāng)麥冬作為中藥材使用時(shí)，其藥用價(jià)值主要取決于塊根的有效成分含量。因此有專家提議將《藥典》關(guān)注的塊根的相關(guān)物質(zhì)含量作為選測(cè)性狀列入性狀表。

《藥典》規(guī)定，麥冬藥材需檢測(cè)總灰分、水溶性浸出物及麥冬總皂苷含量[3]。三者在《藥典》里有規(guī)定的測(cè)定方法[41，42]，需要專業(yè)的實(shí)驗(yàn)室人員和檢測(cè)設(shè)備，操作流程復(fù)雜。對(duì)于可通過形態(tài)特征區(qū)分的品種，從降低測(cè)試成本角度看，不推薦用實(shí)驗(yàn)室儀器檢測(cè)。上述3項(xiàng)指標(biāo)均為中藥材質(zhì)量的合規(guī)性檢測(cè)指標(biāo)，屬于理化性質(zhì)范疇，與形態(tài)學(xué)性狀無關(guān)。此外，DUS測(cè)試性狀的篩選嚴(yán)格符合“1.2.3”所述的6項(xiàng)原則，即具備一致性、特異性、穩(wěn)定性、可遺傳性、可描述和識(shí)別性、可重復(fù)性。

3.2.1總灰分《藥典》要求不得超過 5.0%^[41] ?？偦曳謾z測(cè)旨在防止藥材摻假，但其遺傳機(jī)制尚未明確，不太符合測(cè)試性狀的選取原則，因此不納入測(cè)試性狀。

3.2.2水溶性浸出物《藥典》要求水溶性浸出物不得少于 60.0%^[41] 。水溶性浸出物成分復(fù)雜且未完全明確，易受環(huán)境及栽培條件干擾，遺傳穩(wěn)定性也不清楚，也不符合測(cè)試性狀的選取原則。因此不納入測(cè)試性狀。

3.2.3麥冬總皂苷《藥典》規(guī)定，藥材麥冬總皂苷以麥冬干燥品含魯斯可皂昔元（ C₂₇H₄₂O₄） 計(jì)，不得少于 0.12%^[41] 。盡管含量微量，卻是中藥材的關(guān)鍵質(zhì)量指標(biāo)。關(guān)于是否將其納人指南性狀存在較大爭(zhēng)議。由于其遺傳穩(wěn)定性及環(huán)境依賴性尚未明確，因此指南研制人員認(rèn)為這不是很好的DUS測(cè)試性狀。而且研制人員提出，新品種測(cè)試時(shí)，如果有新品種與近似品種僅在該項(xiàng)指標(biāo)上有顯著差異，可以由委托人自行舉證，測(cè)試機(jī)構(gòu)將其作為選測(cè)性狀、開展復(fù)測(cè)驗(yàn)證即可。按國(guó)際慣例，選測(cè)性狀可以是指南性狀表未列出的性狀。因此在指南性狀篩選初期，沒有入選該指標(biāo)。但不同品種、不同栽培年限、不同栽培地點(diǎn)的麥冬品種，該指標(biāo)含量差異較大，強(qiáng)烈建議將該指標(biāo)納人指南性狀?？紤]到制定指南的目的是為了促進(jìn)新品種的推廣應(yīng)用，麥冬新品種選育主要也是圍繞藥用成分含量的提高進(jìn)行的，該性狀人選為測(cè)試性狀將有利于新品種的推廣應(yīng)用，綜合考慮后，將該性狀納入選測(cè)性狀備用。

4小結(jié)

麥冬DUS測(cè)試指南的制定，研究過程包括文獻(xiàn)資料查閱、種質(zhì)資源收集、植物分類學(xué)鑒定、性狀觀測(cè)與篩選、多年數(shù)據(jù)評(píng)估及全國(guó)性生產(chǎn)加工調(diào)研，并整合DUS測(cè)試相關(guān)專家意見，最終制定形成了麥冬測(cè)試指南。指南已作為推薦性農(nóng)業(yè)行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)發(fā)布，自2023年3月1日起實(shí)施，標(biāo)準(zhǔn)號(hào)NY/T4215—2022，該指南為麥冬新品種保護(hù)測(cè)試提供了技術(shù)規(guī)范，并為新品種審定/認(rèn)定建立了統(tǒng)一的鑒定標(biāo)準(zhǔn)，意味著下一步可以推動(dòng)麥冬納人新品種保護(hù)名錄之中，若麥冬被列入新品種保護(hù)名錄，即可正式啟動(dòng)新品種保護(hù)申請(qǐng)程序。

指南的主要貢獻(xiàn)： ① 規(guī)定了麥冬品種特異性、一致性和穩(wěn)定性（DUS）判定的一般原則（標(biāo)準(zhǔn)）； ② 規(guī)定了育種人應(yīng)提交的用于DUS測(cè)試秋栽的植株數(shù)量（應(yīng)不少于60盆）和質(zhì)量要求； ③ 建立了用性狀描述來定義品種形態(tài)特征的麥冬形態(tài)描述方法； ④ 確定27個(gè)DUS性狀用于描述麥冬品種，列入附錄A（性狀表），其中24個(gè)基本性狀、3個(gè)選測(cè)性狀； ⑤ 為確保性狀分級(jí)描述的準(zhǔn)確性，提供了10個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品種作為示例，用于性狀級(jí)校準(zhǔn)，列入了附錄A； ⑥ 為確保性狀描述的準(zhǔn)確性，指南規(guī)定了性狀觀測(cè)的時(shí)期和方法：劃定6個(gè)生育階段來區(qū)分性狀的觀測(cè)時(shí)期，列人了附錄B；對(duì)附錄A（性狀表）中的18個(gè)性狀進(jìn)行解釋，以明確測(cè)試的具體方法細(xì)節(jié)，列人了附錄B; ⑦ 篩選出3個(gè)分組性狀、10個(gè)技術(shù)問卷性狀用于麥冬DUS測(cè)試，列入附錄C（麥冬DUS測(cè)試技術(shù)問卷）； ⑧ 設(shè)計(jì)問卷涵蓋申請(qǐng)人信息、植物學(xué)分類、品種來源、育種過程及繁殖材料保存要求等信息。

麥冬品種DUS測(cè)試指南的制定充分考慮了中國(guó)麥冬資源、遺傳育種現(xiàn)狀和生產(chǎn)實(shí)際，填補(bǔ)了國(guó)內(nèi)空白，達(dá)到國(guó)內(nèi)先進(jìn)水平，對(duì)促進(jìn)中國(guó)麥冬新品種選育、品種保護(hù)和特色產(chǎn)業(yè)發(fā)展具有重要意義。27個(gè)描述性狀中，質(zhì)量性狀（QL性狀）1個(gè)、假質(zhì)量性狀（PQ性狀）6個(gè)、數(shù)量性狀（QN性狀）20個(gè)，隨著麥冬育種水平的提高，指南會(huì)有修訂的需求，測(cè)試性狀可能會(huì)增減，測(cè)試方法也可能會(huì)改進(jìn)，這些都是正常的發(fā)展需求。

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（責(zé)任編輯 丁艷紅）