關(guān)鍵詞:楊梅(MorellarubraLour.);殺菌劑;農(nóng)藥殘留;檢測(cè)方法;免疫層析法;比對(duì)中圖分類號(hào):TS207 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼:A文章編號(hào):0439-8114(2025)07-0164-07DOI:10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2025.07.028開放科學(xué)(資源服務(wù))標(biāo)識(shí)碼(OSID):[
Comparative study of five fungicides multi-residue detection methods in Morella rubra Lour.
JIA Hui-yan,F(xiàn)U Yan,WANG Quan-sheng,WU Yin-liang (Ningbo Academy of Agricultural Sciences,Ningbo 315O4O,Zhejiang,China)
Abstract:Using MorellrubraLour.astheresearchsubject,fivefungicides withhighdetectionrates(carbendazim,difenocoazole, pyraclostrobin,azoxystrobin,tebuconazole)were srenedbasedonhistorical pesticideresidues monitoringdatafromthe Testing Centerof NingboAcademyof Agricultural Sciences.Asystematiccomparisonwas madeonthetechnicalperformanceoftwodetection methods:collidal goldimmunochromatographicrapiddetectionandultra-performanceliquidchromatography-tandemmasspectrometry(UPLC-MS/MS).Theresultsshowedthatthedetectionlimitsoftheimmunochromatographymethodforthefivefungicideswere (20 0.20mg/kg (carbendazim), 1.00mg/kg (difenoconazole), 5.00mg/kg (pyraclostrobin), 5.00mg/kg (azoxystrobin),and 1.00mg/kg (204 (tebuconazole),respectively.The detection limits of the UPLC-MS/MS method forallfive fungicides were 0.001mg/kg .When the spiked levels of the five fungicides in Morella rubra Lour. were 0.010~1.000mg/kg ,the UPLC-MS/MS method demonstrated good accuracy and precision. The average recoveries of the five fungicides ranged from 74.8% to 107.5% ,with relative standard deviations ( RSD )between 1.1% and 9.0% .The immunochromatography method exhibited good precision.The 1-negative rate for the five fungicides was O,the 1-positive rate was ?5% ,and the relative accuracy was ?97.5% .Although the detection limits of the immunochromatographymethodwere higher,theywereallbelowthe maximumresiduelimits.This methodwasfullyaplicableforqualitative screening of pesticide residues and met the timeliness and reliability requirements foron-site rapid detection.
KeyWords:MorellrubraLour.;fungicides;pesticideresidues;detectionmethods;immunochromatographycomparativestudy
楊梅(MorellarubraLour.是中國長江中下游地區(qū)重要的特色經(jīng)濟(jì)作物,果實(shí)風(fēng)味獨(dú)特,同時(shí)還有藥用價(jià)值,內(nèi)含多種抗氧化物和黃酮類化合物,具有消炎、抗過敏及對(duì)癌細(xì)胞的抑制等作用[12]。楊梅在中國種植廣泛,截至2021年底,全國楊梅種植面積約33.35萬 hm2 ,對(duì)幫助農(nóng)民脫貧致富具有重要的意義[3]。楊梅每年6、7月為成熟期,恰逢南方梅雨季節(jié),病蟲害易發(fā)生。絕大多數(shù)楊梅在生產(chǎn)時(shí)會(huì)罩上羅幔,這種方式能有效防蟲害,減少殺蟲劑的使用,但卻不能防菌[4]。根據(jù)王華弟等[5.6]對(duì)浙江楊梅主產(chǎn)區(qū)的監(jiān)測(cè)研究表明,嚴(yán)重危害楊梅生產(chǎn)的病害主要為白腐病、褐斑病和癌腫病。褐斑病導(dǎo)致葉片脫落,直接影響果實(shí)產(chǎn)量與品質(zhì);白腐病導(dǎo)致果實(shí)軟腐,后期干縮脫落,生產(chǎn)中常使用殺菌劑防治果實(shí)病害[7。由于楊梅屬于小品種作物,登記的殺菌劑較少,與其復(fù)雜的病蟲害發(fā)生狀況相比,可替代農(nóng)藥種類偏少,且安全用藥技術(shù)欠缺,不合理用藥引起的楊梅殺菌劑殘留超標(biāo)現(xiàn)象時(shí)有發(fā)生[8.9]。此外,楊梅為即食水果,沒有果皮,可食部分暴露于空氣中,再加上楊梅特殊的外表,很容易被農(nóng)藥污染,且殘留不易清除;很多消費(fèi)者習(xí)慣直接進(jìn)食[],增加了楊梅中殺菌劑殘留的膳食風(fēng)險(xiǎn)。
楊梅殺菌劑殘留不僅對(duì)消費(fèi)者身體健康與環(huán)境安全造成危害,還是限制中國楊梅出口的技術(shù)壁壘。因此,業(yè)內(nèi)學(xué)者非常關(guān)注楊梅中殺菌劑多殘留檢測(cè)方法的建立。張亮等和王天玉等分別建立了同時(shí)檢測(cè)楊梅中2種殺菌劑的高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法,前者檢出限均為 0.005mg/kg ,后者檢出限均為 0.010mg/kg 。平新亮等[13]和潘碧樞等[14]分別利用氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法建立同時(shí)檢測(cè)楊梅中多種農(nóng)藥的方法,前者可同時(shí)檢測(cè)5種殺菌劑,后者可同時(shí)檢測(cè)2種殺菌劑。Yang等[15]等和 Pan 等[16分別利用高效液相色譜-質(zhì)譜法建立同時(shí)檢測(cè)楊梅中多種農(nóng)藥的方法,前者可同時(shí)檢測(cè)7種殺菌劑,后者可同時(shí)檢測(cè)10種殺菌劑。上述色譜質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)檢測(cè)楊梅中殺菌劑的方法雖然具有靈敏度高、準(zhǔn)確性好的優(yōu)點(diǎn),但仍存在一些局限性。例如,上機(jī)檢測(cè)前,樣品處理步驟比較冗雜;儀器設(shè)備與相應(yīng)耗材昂貴;需要專業(yè)技術(shù)人員進(jìn)行操作[17-19]。因此,在政府監(jiān)管和生產(chǎn)經(jīng)營消費(fèi)者自查等方面,色譜質(zhì)譜聯(lián)用法仍不能滿足農(nóng)產(chǎn)品即時(shí)檢測(cè)的需求。
為提升食品安全監(jiān)管效能與檢驗(yàn)效率,建立快速、簡(jiǎn)便的農(nóng)藥殘留快速檢測(cè)方法迫在眉睫。膠體金免疫層析法融合了有機(jī)合成化學(xué)、免疫學(xué)、膠體化學(xué)、物理學(xué)和材料學(xué)等多學(xué)科優(yōu)勢(shì),實(shí)現(xiàn)了復(fù)雜檢測(cè)原理與便捷操作的完美結(jié)合。該方法簡(jiǎn)單快速,易于在農(nóng)場(chǎng)和市場(chǎng)普及推廣,而且開發(fā)成功的產(chǎn)品準(zhǔn)確性和特異性可滿足農(nóng)藥殘留限量標(biāo)準(zhǔn)的要求[20]基于寧波市農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量檢測(cè)中心歷年楊梅農(nóng)藥殘留監(jiān)測(cè)數(shù)據(jù),針對(duì)檢出頻次較高的多菌靈、苯醚甲環(huán)唑、吡唑醚菌酯、嘧菌酯和戊唑醇5種殺菌劑,分別開發(fā)符合限量要求的膠體金試紙條,并組裝成楊梅五聯(lián)殺菌劑速測(cè)卡。通過比較膠體金免疫層析法與超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法(UPLC-MS/MS)的檢出限、精密度及實(shí)際樣品檢測(cè)結(jié)果,驗(yàn)證該技術(shù)的可靠性。
1 材料與方法
1.1 材料與試劑
楊梅由寧波市農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量檢測(cè)中心提供,楊梅產(chǎn)地為寧波市慈溪市、余姚市等。
多菌靈、苯醚甲環(huán)唑、吡唑醚菌酯、嘧菌酯和戊唑醇完全抗原與單克隆抗體由中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院農(nóng)業(yè)質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)與檢測(cè)技術(shù)研究所王靜教授課題組贈(zèng)送。
40nm 單分散性金納米顆粒(南京基科生物科技有限公司);檸檬酸三鈉(分析純,國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司);乙晴(德國Merck公司);QuEChERS鹽包(美國安捷倫公司);N-丙基乙二胺(primarysec-ondaryamine,PSA)填料 40~63μm (北京安譜公司);硝酸纖維素膜(美國Millipore公司)。
1.2 儀器與設(shè)備
BlueStarB型紫外-可見分光光度計(jì)(北京萊伯泰科儀器有限公司);噴膜機(jī)(杭州峰航科技有限公司);AcquityXevo TQ-S型高效液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀(配有電噴霧離子源及Masslynx數(shù)據(jù)處理系統(tǒng),美國Waters公司)。
1.3 方法
1.3.1膠體金標(biāo)記單克隆抗體采用分光光度法確定膠體金標(biāo)記單克隆抗體的最適穩(wěn)定量與最適pH[21] 。將單克隆抗體在 0.005mol/L 的NaCl溶液中透析3次, 10000r/min 低溫離心 1h ,留上清液。參考Foubert等[22的方法,在固定蛋白含量的條件下,采用 K2CO3 溶液調(diào)節(jié)膠體金溶液的 pH ,加人不同濃度的透析純化單克隆抗體,反應(yīng) 15min 后分析金標(biāo)抗體的穩(wěn)定性。最適條件下制備的金標(biāo)抗體用 1% 蔗糖和 1% BSA的Tris緩沖液溶解,備用。
1.3.2試紙條制備與組裝
1)硝酸纖維素膜的處理。選擇Millipore135硝酸纖維素膜進(jìn)行檢測(cè)線(T線)與對(duì)照線(C線)的劃線[23.24]。檢測(cè)線上的抗原用碳酸鹽緩沖液(0.01mol/L.pH 9.6) 稀釋成 1mg/mL[25] ,質(zhì)控線上的羊抗兔 IgG 二抗用磷酸鹽緩沖液 (0.01mol/L.pH7.4)稀釋成 1mg/mL 。兩線相距 6mm ,并做標(biāo)記。用劃膜儀將T線與C線樣品劃于硝酸纖維素膜上,37°C 烘箱干燥 2h ,備用。
2)樣品墊處理。將樣品墊浸泡于 50mmol/L Tris-HCl(pH8.0),0.15mmol/LNaCl,0.25% 曲拉通的樣品墊處理液中, 2h 后, 37°C 烘箱干燥 2h ,備用[26]
3)金標(biāo)結(jié)合墊處理。將金標(biāo)結(jié)合墊置于含0.5%BSA,0.05% Triton X-100、5.0% 蔗糖的PB處理液中,均勻浸濕 1h,37°C 干燥 3h 后,用噴膜儀將金標(biāo)抗體按 0.01mL/cm 的量均勻噴涂在金標(biāo)墊上,37°C 干燥1h,備用[27]。
4試紙條組裝。用金標(biāo)結(jié)合墊壓住硝酸纖維素膜,再粘貼樣品墊和吸水墊,如圖1所示。
圖1試紙條裝配示意圖
1.3.3 樣品前處理
1)UPLC-MS/MS法。稱取已去核并勻漿的楊梅空白樣品 5.00g 于離心管中,加入 20.0mL 乙腈,置于振蕩器中提取 30min ,加入QuEChERS鹽包劇烈振蕩 1min ,離心機(jī) 4°C 下離心 3min 0 9500r/min) 。吸取 5mL 上清液,加入 100mg PSA和 200mg 無水硫酸鎂,漩渦振蕩 5min 后離心。吸 0.5mL 上清液至2mL 離心管中,加入 0.5mL0.1% 甲酸溶液,混合均勻, 0.22μm 濾膜過濾后待測(cè)。
2)免疫層析法。樣品提取液為添加 20% 甲醇溶液的 0.01mol/L 的PBS( ΦpH7.4) 。稱取已去核并勻漿的楊梅空白樣品 2.50g 于 5mL 樣品提取液中,漩渦振蕩 2min 后靜置 3min ,上清液為待測(cè)液。
1.3.4 檢測(cè)方法
1)UPLC-MS/MS法。質(zhì)譜參數(shù):離子源為電噴霧離子源,掃描方式為正離子掃描,檢測(cè)方式為多反應(yīng)監(jiān)測(cè),電離電壓為 2.50kV ,霧化氣流速為 1000L/h 錐孔氣流速為 50L/h ,離子源溫度為 150qC ,霧化溫度為 500°C ,質(zhì)譜參數(shù)如表1所示。液相參數(shù):流動(dòng)相A為 0.1% 甲酸溶液,流動(dòng)相B為乙腈,色譜柱為AcquityUPLCBEHC18,柱溫為 35°C ,樣品室溫度為 15°C ,進(jìn)樣量為 10μL ,液相參數(shù)和梯度洗脫程序如表2所示。
表1質(zhì)譜參數(shù)
注:“*”為定量離子
表2液相參數(shù)和梯度洗脫程序
2)免疫層析法。將試紙條水平放置,用移液器吸取前處理中的上清液,滴入加樣孔中,反應(yīng)8~10min。結(jié)果判讀:T線顯色,為陰性(未檢出);T線不顯色,為陽性(有檢出);T、C線均不顯色,為無效。
1.3.5 檢出限確認(rèn)
1)UPLC-MS/MS法。以 0.1% 甲酸溶液與楊梅基質(zhì)空白溶液按1:1體積比混合作為定容溶液,將多菌靈、苯醚甲環(huán)唑、吡唑醚菌酯、嘧菌酯和戊唑醇5種殺菌劑的混合標(biāo)準(zhǔn)溶液配制成 0.001,0.005 、0.010,0.050,0.100,0.500mg/kg 系列濃度標(biāo)準(zhǔn)溶液,繪制基質(zhì)匹配標(biāo)準(zhǔn)曲線。
2)免疫層析法。選取楊梅空白樣品,分為5組,分別添加5種殺菌劑標(biāo)準(zhǔn)品至終濃度為0.01、0.05、0.20,1.00,5.00,25.00mg/kg ,同時(shí)設(shè)置空白對(duì)照。采用適配免疫層析技術(shù)的樣品前處理方法處理待測(cè)樣品,通過免疫層析檢測(cè)系統(tǒng)進(jìn)行分析,確定該方法的檢出限(LOD)。
1.3.6精密度與準(zhǔn)確度確認(rèn)
1)UPLC-MS/MS法。用3個(gè)濃度梯度的添加回 收試驗(yàn)確認(rèn)UPLC-MS/MS方法的精密度與準(zhǔn)確度, 每個(gè)濃度重復(fù)5次。5種殺菌劑的添加濃度均為 0.010、0.100、1.000mg/kgo
2)免疫層析法。 ① 精密度確認(rèn)。稱取60份楊梅空白樣品,每份的重量為 5.0g 。分為5組,每組12個(gè)樣品,3個(gè)樣品作為空白對(duì)照,另外9個(gè)樣品平行加入檢出限濃度的殺菌劑標(biāo)準(zhǔn)品。每組設(shè)置3個(gè)批次試紙條,每批次平行檢測(cè)3次,按照免疫層析檢出流程操作。 ② 準(zhǔn)確度確認(rèn)。根據(jù)《食品快速檢測(cè)方法評(píng)價(jià)技術(shù)規(guī)范》,采用假陰性率和假陽性率作為核心指標(biāo),評(píng)價(jià)快速檢測(cè)方法與標(biāo)準(zhǔn)儀器檢測(cè)法的一致性。在20份楊梅空白樣品中添加大于等于檢測(cè)限濃度的5種殺菌劑標(biāo)準(zhǔn)品作為陽性樣品,用于檢測(cè)假陰性率;另外準(zhǔn)備20份楊梅空白樣品,用于檢測(cè)假陽性率,以此確認(rèn)免疫層析法的相對(duì)準(zhǔn)確度。
2 結(jié)果與分析
2.1殺菌劑特異性單克隆抗體被膠體金標(biāo)記時(shí)的最適穩(wěn)定濃度與最適pH
采用自測(cè)法初步檢測(cè)膠體金標(biāo)記殺菌劑特異性單抗的最適宜濃度與 pH ,然后根據(jù)目測(cè)法的結(jié)果設(shè)計(jì)分光光度法的單抗?jié)舛扰c pH 檢測(cè)范圍,最終以分光光度法的結(jié)果為準(zhǔn)。圖2展示了殺菌劑特異性單克隆抗體被膠體金標(biāo)記時(shí)最適穩(wěn)定濃度的目測(cè)法與分光光度法檢測(cè)結(jié)果(以多菌靈為例)。膠體金溶液 pH 均為8.5,單抗?jié)舛确謩e為 0.10,25,50,100,200μg/mL 當(dāng)單抗?jié)舛鹊陀?50μg/mL 時(shí)膠體金顏色不再改變,初步認(rèn)為單抗的最適穩(wěn)定濃度為 50μg/mL 。設(shè)計(jì)6.25?12.50?25.00?40.00?50.00?100.00?200.00μcg/mL 濃度梯度進(jìn)行分光光度法檢測(cè),結(jié)果表明,單抗的最適穩(wěn)定濃度為 50.00μg/mL 號(hào)
圖3展示了殺菌劑特異性單克隆抗體被膠體金標(biāo)記時(shí)最適 pH 的目測(cè)法與分光光度法檢測(cè)結(jié)果(以多菌靈為例)。單抗?jié)舛染鶠?50.00μg/mL ,膠體金溶液的 pH 分別為 5.5、6.5、7.5、8.5、9.0 ,當(dāng)膠體金溶液 pH 低于8.5時(shí)膠體金顏色不再改變,初步認(rèn)為最適 pH 為8.5。設(shè)計(jì)5個(gè) pH 梯度(5.5、6.5、7.5、9.0)進(jìn)行分光光度法檢測(cè),結(jié)果表明,膠體金溶液的最適pH為7.5。8.5、
圖2膠體金標(biāo)記多菌靈的最適穩(wěn)定濃度
圖3膠體金標(biāo)記多菌靈的最適pH
以分光光度法的膠體金最適 pH 為標(biāo)記條件,通過分光光度法的單抗最適穩(wěn)定濃度計(jì)算 120μL 體系中單抗實(shí)際用量,結(jié)果如表3所示, 120μL 體系中多菌靈、苯醚甲環(huán)唑、吡唑醚菌酯、嘧菌酯、戊唑醇的實(shí)際用量分別為 6.0,6.0,7.2,6.0,4.8μog 。
2.2UPLC-MS/MS法與免疫層析法檢測(cè)5種殺菌劑的檢出限結(jié)果
1)UPLC-MS/MS法。使用定容溶液( 0.1% 甲酸溶液·楊梅基質(zhì)空白溶液 =1:1 ,體積比)將多菌靈、苯醚甲環(huán)唑、吡唑醚菌酯、嘧菌酯和戊唑醇5種殺菌劑的混合標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)行系列梯度稀釋,濃度分別為0.001?0.005?0.010?0.050?0.100?0.500mg/kg° 由圖4可知,5種殺菌劑濃度與對(duì)應(yīng)峰面積均呈線性關(guān)系,相關(guān)系數(shù) (r) 為 0.9994~0.9999,5 種殺菌劑的檢出限均為 0.001mg/kg 。
表3膠體金標(biāo)記單抗的最適 pH 、最適穩(wěn)定濃度和單抗實(shí)際用量
2)免疫層析法。在楊梅空白樣品中加入系列濃度的殺菌劑標(biāo)準(zhǔn)品,按照“1.3.3\"和\"1.3.4\"進(jìn)行檢測(cè),確定5種殺菌劑的檢出限,如表4所示。多菌靈、苯醚甲環(huán)唑、吡唑醚菌酯、嘧菌酯、戊唑醇的檢出限分別為 0.20,1.00,5.00,5.00,1.00mg/kgo
2.3UPLC-MS/MS法與免疫層析法檢測(cè)5種殺菌劑準(zhǔn)確度與精密度
1)UPLC-MS/MS法。由表5可知,UPLC-MS/MS法表現(xiàn)出良好的準(zhǔn)確度與精密度,5種殺菌劑的平均回收率為 74.8%~107.5% ,相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD)為1.1%~9.0% 。5種殺菌劑在楊梅中的添加水平均為0.010~1.000mg/kg ,多菌靈的平均回收率為 89.3% 105.4% ,RSD為 2.9%~5.1% ;苯醚甲環(huán)唑的平均回收率為 91.4%~107.5% , RSD 為 1.1%~2.1% ;吡唑醚菌酯的平均回收率為 89.5%~106.5% , RSD 為 5.0%~ 9.0% ;嘧菌酯的平均回收率為 78.8%~91.7%,RSL 為2.5%.5.7% ;戊唑醇的平均回收率為 74.8%~78.9% ,RSD 為 2.1%1.4% 。楊梅中5種殺菌劑在 0.010mg/kg 添加水平時(shí)的總離子流如圖5所示。5種殺菌劑在楊梅中的添加水平為 0.010~1.000mg/kg 時(shí),UPLC-MS/MS法的準(zhǔn)確度與精密度均良好。
圖4UPLC-MS/MS法檢測(cè)5種殺菌劑的標(biāo)準(zhǔn)曲線
a.多菌靈;b.苯醚甲環(huán)唑;c.吡唑醚菌酯;d.嘧菌酯;e.戊唑醇
表4免疫層析法檢測(cè)楊梅中殺菌劑的檢出限
注:“-\"表示陰性;‘ ?+ ”表示陽性。表6同
表5UPLC-MS/MS法測(cè)定楊梅中5種殺菌劑的添加回收率及相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差 n=5 1
圖5楊梅中5種殺菌劑在 0.010mg/kg 添加水平時(shí)的總離子流
2)免疫層析法。楊梅空白樣品中分別加入檢出限濃度的多菌靈、苯醚甲環(huán)唑、吡唑醚菌酯、嘧菌酯、戊唑醇5種殺菌劑標(biāo)準(zhǔn)品,檢測(cè)3個(gè)批次的試紙條,每個(gè)批次3個(gè)重復(fù),結(jié)果(表6)表明,免疫層析法精密度良好。
表6免疫層析法檢測(cè)楊梅中5種殺菌劑的精密度 (n=3)
根據(jù)《食品快速檢測(cè)方法評(píng)價(jià)技術(shù)規(guī)范》,對(duì)楊梅樣品中多菌靈、苯醚甲環(huán)唑、吡唑醚菌酯、嘧菌酯和戊唑醇5種殺菌劑的免疫層析法檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行方法學(xué)評(píng)價(jià),重點(diǎn)考察相對(duì)準(zhǔn)確度、假陰性率及假陽性率。楊梅樣品共40份,其中陰性楊梅樣品20份,陽性楊梅樣品20份,結(jié)果如表7所示。5種殺菌劑的假陰性率均為0;多菌靈、苯醚甲環(huán)唑的假陽性率均為 5% ,吡唑醚菌酯、嘧菌酯和戊唑醇的假陽性率均為0;多菌靈和苯醚甲環(huán)唑的相對(duì)準(zhǔn)確度均為 97.5% ,吡唑醚菌酯、嘧菌酯和戊唑醇的相對(duì)準(zhǔn)確度均為 100% O
表7免疫層析法檢測(cè)5種殺菌劑的相對(duì)準(zhǔn)確度、假陰性率及假陽性率
3小結(jié)與討論
選取楊梅種植中常用且殘留風(fēng)險(xiǎn)較高的5種殺菌劑(多菌靈、苯醚甲環(huán)唑、吡唑醚菌酯、嘧菌酯、戊唑醇),分別建立超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜(UPLC-MS/MS)法和膠體金免疫層析快速檢測(cè)法,通過靈敏度、準(zhǔn)確度、精密度等關(guān)鍵指標(biāo)的系統(tǒng)比對(duì),評(píng)估2種方法的差異。2種方法檢出限對(duì)比結(jié)果顯示,UPLC-MS/MS法展現(xiàn)出更高的靈敏度,5種殺菌劑的檢出限均為 0.001mg/kg ;免疫層析法的檢出限分別為多菌靈 0.20mg/kg 、苯醚甲環(huán)唑 1.00mg/kg 、吡唑醚菌酯 5.00mg/kg 、嘧菌酯 5.00mg/kg 、戊唑醇1.00mg/kg 。根據(jù)GB2763—2021《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)食品中農(nóng)藥最大殘留限量》的規(guī)定,多菌靈、嘧菌酯和戊唑醇在楊梅中尚未制定最大殘留限量(MRL),草莓中多菌靈、嘧菌酯和戊唑醇的最大殘留限量分別為 0.5,10.0,2.0mg/kg ;而苯醚甲環(huán)唑和吡唑醚菌酯在楊梅中的最大殘留限量則分別規(guī)定為5.0,10.0mg/kg 。雖然免疫層析法的檢出限較高,但均小于最大殘留限量,完全適用于農(nóng)藥殘留的定性篩查,能夠有效滿足農(nóng)產(chǎn)品生產(chǎn)源頭自檢和居民居家自檢等現(xiàn)場(chǎng)快速檢測(cè)的需求。免疫層析法檢測(cè)農(nóng)藥殘留的優(yōu)點(diǎn)在于簡(jiǎn)單、快速、靈敏且檢測(cè)產(chǎn)品攜帶方便,是現(xiàn)場(chǎng)即時(shí)篩查的理想手段[28-30]。免疫層析法可在 15min 內(nèi)快速完成檢測(cè),其方法學(xué)驗(yàn)證結(jié)果顯示,5種殺菌劑的假陰性率為0,假陽性率 45% ,相對(duì)準(zhǔn)確度 ?97.5% 。該方法展現(xiàn)出優(yōu)異的篩查性能,完全滿足現(xiàn)場(chǎng)快速檢測(cè)的時(shí)效性和可靠性要求。
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