摘要：鮮濕豆絲中水分含量高，易使微生物生長(zhǎng)繁殖，導(dǎo)致鮮濕豆絲腐敗變質(zhì)。為延長(zhǎng)鮮濕豆絲的貨架期，延緩微生物的生長(zhǎng)速率，采用平板劃線法從腐敗鮮濕豆絲中分離出7株腐敗菌，經(jīng)鑒定為4株枯草芽孢桿菌（X1、X2、X3、X6）、1株蘇云金芽孢桿菌（X4）、1株阿氏腸桿菌（X5）、1株考氏科薩克氏菌（X7）。將無(wú)菌鮮濕豆絲接種分離出的腐敗菌，以菌落總數(shù)與酸度為檢測(cè)指標(biāo)，評(píng)價(jià)腐敗菌的致腐能力。結(jié)果表明，接種了腐敗菌的樣品，其菌落總數(shù)與酸度均大于對(duì)照組，表明7株腐敗菌均有較強(qiáng)的致腐能力。通過(guò)濾紙片法測(cè)定抑菌圈大小，研究不同濃度復(fù)配抑菌劑（ε-PL與CP）對(duì)7株腐敗菌的抑菌效果。其中，40% ε-PL+60% CP、20% ε-PL+80% CP兩種抑菌劑對(duì)腐敗菌有較好的抑制作用。

關(guān)鍵詞：鮮濕豆絲；腐敗菌；致腐能力；分離與鑒定

中圖分類號(hào)：TS214""""" 文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A""""" 文章編號(hào)：1000-9973（2024）08-0017-05

Isolation and Identification of Dominant Spoilage Bacteria from Fresh and Wet

Bean Shreds and Study on Antibacterial Activity of ε-Polylysine

Hydrochloride Combined with Calcium Propionate

CAO Yang1，3， HUANG Ya-qi2， XU Ping1，3， SHEN Zhang-yan4， CHEN Lei1，3*

（1.School of Food Science and Engineering， Wuhan Polytechnic University， Wuhan 430048， China;

2.College of Food Science and Technology， Wuhan Business University， Wuhan 430056， China;

3.Key Laboratory for Deep Processing of Major Grain and Oil， Ministry of Education，

Wuhan 430048， China; 4.Wuhan Laoqianji Food Co.， Ltd.， Wuhan 430072， China）

Abstract： The high moisture content in fresh and wet bean shreds can easily promote the growth and reproduction of microorganisms， leading to the spoilage and deterioration of fresh and wet bean shreds. In order to extend the shelf life of fresh and wet bean shreds and slow down the growth rate of microorganisms， seven strains of spoilage bacteria are isolated from spoiled fresh and wet bean shreds by streak plate method， and they are identified as four strains of Bacillus subtilis（X1，X2，X3，X6）， a strain of Bacillus thuringiensis（X4）， a strain of Enterobacter asburiae（X5） and a strain of Kosakonia cowanii（X7）. The isolated spoilage bacteria are inoculated onto sterile fresh and wet bean shreds， and the total number of colonies and acidity are used as the detection indexes to evaluate the spoilage ability of the spoilage bacteria. The resultsSymbol`@@show that the total number of colonies and acidity of the samples inoculated with spoilage bacteria

DOI：10.3969/j.issn.1000-9973.2024.08.004

引文格式：曹楊，黃雅琪，徐平，等.鮮濕豆絲中優(yōu)勢(shì)腐敗菌的分離鑒定及ε-聚賴氨酸鹽酸鹽/丙酸鈣復(fù)配抑菌研究.中國(guó)調(diào)味品，2024，49（8）：17-21，38.

CAO Y， HUANG Y Q， XU P， et al. Isolation and identification of dominant spoilage bacteria from fresh and wet bean shreds and study on antibacterial activity of ε-polylysine hydrochloride combined with calcium propionate.China Condiment，2024，49（8）：17-21，38.

收稿日期：2024-02-06

基金項(xiàng)目：中央引導(dǎo)地方專項(xiàng)（2022BGE247）；湖北省自然科學(xué)青年基金項(xiàng)目（2023AFB304）

作者簡(jiǎn)介：曹楊（1987—），女，實(shí)驗(yàn)師，碩士，研究方向：谷物科學(xué)。

*通信作者：陳磊（1992—），男，講師，博士，研究方向：谷物科學(xué)。

are all higher than those of the control group， indicating that the seven strains of spoilage bacteria have strong spoilage ability. The size of the antibacterial zone is measured by filtering paper method to study the antibacterial effects of different concentrations of compound antibacterial agents （ε-PL and CP） on seven strains of spoilage bacteria. Among them， 40% ε-PL+60% CP， 20% ε-PL+80% CP have good antibacterial effects on spoilage bacteria.

Key words： fresh and wet bean shreds; spoilage bacteria; spoilage ability; isolation and identification

豆絲是長(zhǎng)江中下游地區(qū)的農(nóng)家傳統(tǒng)美食，主要分布在湖北、安徽、江西等地。制作原料主要以大米為主，也可混合小麥或蕎麥等，以豆類為輔，如黃豆、綠豆、紅豆、豌豆、蠶豆等食用豆子的一種或幾種。原料經(jīng)浸泡、磨漿、燙制、攤涼、切絲、晾曬制成豆絲。成品色澤微黃，滋味鮮美，口感綿軟，營(yíng)養(yǎng)豐富。目前，市售豆絲包括干豆絲與濕豆絲兩種，其中鮮濕豆絲的口感細(xì)膩，風(fēng)味濃郁，備受人們歡迎。

然而，因鮮濕豆絲水分含量高，微生物極易生長(zhǎng)繁殖。微生物的大量繁殖是導(dǎo)致鮮濕豆絲腐敗變質(zhì)的主要原因。為延長(zhǎng)鮮濕豆絲的貨架期，需采取有效的抑菌和殺菌措施，抑制鮮濕豆絲中腐敗微生物的生長(zhǎng)繁殖，延緩其生長(zhǎng)速率，達(dá)到延長(zhǎng)鮮濕豆絲貨架期的作用。在適宜的貯藏環(huán)境下，微生物互相競(jìng)爭(zhēng)、拮抗、互惠共生，促進(jìn)自身的生長(zhǎng)和繁殖。一種或多種微生物會(huì)成為導(dǎo)致產(chǎn)品腐敗變質(zhì)的主要優(yōu)勢(shì)腐敗菌。優(yōu)勢(shì)腐敗菌的分離鑒定有助于發(fā)現(xiàn)指標(biāo)菌，為后續(xù)有針對(duì)性地選擇抑菌劑提供依據(jù)。

ε-聚賴氨酸鹽酸鹽（ε-polylysine hydrochloride，ε-PL）是鏈霉菌屬發(fā)酵過(guò)程中的代謝產(chǎn)物經(jīng)分離提取精制而獲得的一種生物防腐劑，水溶性好、熱穩(wěn)定性強(qiáng)，具有廣譜性，對(duì)革蘭氏陰性菌、革蘭氏陽(yáng)性菌和真菌均有抑制作用，通過(guò)破壞細(xì)胞膜和細(xì)胞壁的完整性，造成物質(zhì)外滲，影響蛋白質(zhì)合成等正常生理功能，抑制微生物生長(zhǎng)。丙酸鈣（calcium propionate，CP）是一種新型食品添加劑，為安全、可靠的食品防霉劑，具有抑制微生物增殖和消滅微生物的作用，是天然防腐劑的重要組成部分，能參與人體正常新陳代謝，對(duì)人體無(wú)害，用于食品的防腐和防霉，在作為防腐保鮮劑的同時(shí)能為人體提供必需的鈣質(zhì)，起到強(qiáng)化食品營(yíng)養(yǎng)的作用。對(duì)革蘭氏陰性桿菌、好氧芽孢桿菌及各類霉菌有較強(qiáng)的抑制作用，是一種被廣泛應(yīng)用在富含淀粉和蛋白質(zhì)的食品中的抑菌劑。根據(jù)柵欄原理，將不同種類的防腐劑綜合應(yīng)用，可發(fā)揮其協(xié)同效應(yīng)，在增強(qiáng)抑菌效果的同時(shí)可降低單一防腐劑的使用量。

因此，本文擬對(duì)鮮濕豆絲中的優(yōu)勢(shì)腐敗微生物進(jìn)行分離與初步鑒定，同時(shí)選用ε-PL與CP兩種防腐劑復(fù)配成不同濃度梯度的抑菌劑，對(duì)分離出來(lái)的優(yōu)勢(shì)腐敗菌進(jìn)行抑菌實(shí)驗(yàn)。為進(jìn)一步有針對(duì)性地尋找關(guān)于鮮濕豆絲有效的防腐保鮮措施、延長(zhǎng)鮮濕豆絲的貨架期提供理論依據(jù)。

1" 材料和方法

1.1" 材料

大米、黃豆、綠豆：武漢老謙記食品有限公司。

1.2" 試劑

平板計(jì)數(shù)瓊脂：北京陸橋技術(shù)股份有限公司；葡萄糖發(fā)酵培養(yǎng)基：杭州微生物試劑有限公司；可溶性淀粉瓊脂、芽孢染色液：青島海博生物技術(shù)有限公司；革蘭氏染色液：常德比克曼生物科技有限公司；丙酸鈣：河南萬(wàn)邦實(shí)業(yè)有限公司；ε-聚賴氨酸鹽酸鹽：浙江諾一生物科技有限公司；NaCl、香柏油：國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司；75%酒精：武漢東湖星科技有限公司。

1.3" 主要儀器設(shè)備

SW-CJ-1FD超凈化工作臺(tái)" 蘇州凈化設(shè)備有限公司；YXQ-50SⅡ立式壓力蒸汽滅菌鍋、SPX-250B-Z生化培養(yǎng)箱" 上海博迅實(shí)業(yè)有限公司醫(yī)療設(shè)備廠；SOPTOP CX40電子顯微鏡" 北京悅昌行科技有限公司；JM-L50立式膠體磨" 上海諾尼輕工機(jī)械有限公司；MC-JCN30S電餅鐺" 廣東美的生活電器制造有限公司；QL-866均質(zhì)器" 海門(mén)市其林貝爾儀器制造有限公司；DZ-280/2SD多功能真空包裝機(jī)" 東莞市益健包裝機(jī)械有限公司。

1.4" 方法

1.4.1" 鮮濕豆絲的制備

1.4.1.1" 生產(chǎn)工藝流程

秈米、黃豆、綠豆→清洗→浸泡→磨漿→燙制→攤涼→切絲→包裝→貯藏。

1.4.1.2" 操作要點(diǎn)

浸泡：將秈米、黃豆、綠豆（干基比10∶2∶1）分別用水浸泡4，8，4 h。

磨漿：將浸泡后的秈米、黃豆、綠豆瀝干、混合，以1∶1.2（原料干基∶水，質(zhì)量比）的比例加入清水后使用膠體磨磨漿10 min，得豆絲漿料。

燙制：在電餅鐺中倒入定量漿料，于180 ℃燙制50 s后成型。

攤涼、切絲與包裝：將燙好的豆絲在室溫下通風(fēng)設(shè)備中放置1 h，隨后切成條狀，進(jìn)行真空包裝。

貯藏：在25 ℃下貯藏。

1.4.2" 鮮濕豆絲的腐敗處理

將1.4.1中的鮮濕豆絲進(jìn)行普通封口包裝，在25 ℃貯藏3 d至腐敗變質(zhì)。

1.4.3" 腐敗菌的分離純化

在無(wú)菌條件下取1.4.2中的鮮濕豆絲25 g放入225 mL無(wú)菌生理鹽水中，用均質(zhì)器拍打1.5 min，隨后取1 mL鮮濕豆絲的懸濁液進(jìn)行10倍梯度稀釋，稀釋至10-7，取上述稀釋梯度為10-4，10-5，10-6，10-7的稀釋液1 mL涂布于PCA培養(yǎng)基上，在37 ℃培養(yǎng)48 h后，挑取菌落形態(tài)不同的菌落，采用平板劃線法進(jìn)行純化培養(yǎng)，連續(xù)純化4～5次，直至長(zhǎng)出單個(gè)菌落，將純化后所得的菌種斜面培養(yǎng)后于4 ℃保存，備用。

1.4.4" 腐敗菌的鑒定

1.4.4.1" 形態(tài)學(xué)鑒定

觀察并記錄分離純化腐敗菌菌株的菌落形態(tài)，包括單菌落的顏色、質(zhì)地、形狀、大小、表面、透明度、隆起度。挑取細(xì)菌培養(yǎng)物制成載片標(biāo)本，觀察細(xì)胞形態(tài)并記錄。

1.4.4.2" 生理生化鑒定

通過(guò)革蘭氏染色、芽孢染色、鞭毛染色、葡萄糖產(chǎn)酸、葡萄糖產(chǎn)氣和淀粉水解實(shí)驗(yàn)對(duì)分離的細(xì)菌菌株進(jìn)行生理生化鑒定。

1.4.4.3" 16S rDNA鑒定

將所得菌株送至武漢擎科生物技術(shù)有限公司進(jìn)行測(cè)序。將所得16S rDNA序列提交至NCBI的GenBank基因庫(kù)中進(jìn)行同源比對(duì)，選取與目的基因序列同源性較高的菌株的16S rDNA基因序列，使用MEGA 7.0軟件構(gòu)建系統(tǒng)發(fā)育樹(shù)，進(jìn)一步確定菌株的種屬性質(zhì)。

1.4.5" 腐敗菌致腐能力測(cè)定

1.4.5.1" 無(wú)菌豆絲制備

將1.4.1中制得的鮮濕豆絲在75%的酒精中浸泡1 min，用無(wú)菌風(fēng)風(fēng)干酒精，在紫外燈下照射30 min，得無(wú)菌豆絲。

1.4.5.2" 菌懸液制備

將1.4.3中保存的已純化的7種腐敗菌分別接種于PCA培養(yǎng)基上，放入生化培養(yǎng)箱中37 ℃培養(yǎng)48 h，在無(wú)菌環(huán)境下分別挑取一定量的7種腐敗菌加入250 mL無(wú)菌水中，充分搖勻，得到待試腐敗菌菌懸液。

1.4.5.3" 無(wú)菌豆絲染菌

將制得的無(wú)菌鮮濕豆絲置于菌懸液中浸泡30 s后取出，在無(wú)菌風(fēng)下放置10 min，待晾干鮮濕豆絲表面多余的水分后，用無(wú)菌包裝袋包裝，即得經(jīng)腐敗菌接種處理過(guò)的鮮濕豆絲，每株腐敗菌設(shè)置3個(gè)平行實(shí)驗(yàn)組。同時(shí)，取無(wú)菌水代替菌懸液作為空白對(duì)照組（CK）。

1.4.5.4" 致腐能力評(píng)價(jià)

將所有處理好的樣品放入25 ℃恒溫箱中貯藏72 h，每隔24 h取樣，測(cè)定待測(cè)樣品的菌落總數(shù)與酸度，以評(píng)價(jià)7株腐敗細(xì)菌對(duì)鮮濕豆絲的致腐能力。

1.4.6" 鮮濕豆絲菌落總數(shù)測(cè)定

參照GB 4789.2—2016進(jìn)行菌落總數(shù)測(cè)定。

1.4.7" 鮮濕豆絲酸度測(cè)定

參照GB 5009.239—2016中第一法酚酞指示劑法進(jìn)行酸度測(cè)定。

1.4.8" 抑菌實(shí)驗(yàn)

1.4.8.1" 抑菌劑濃度梯度的選擇

根據(jù)GB 2760—2014中的規(guī)定，所選兩種抑菌劑的最大使用限量見(jiàn)表1，將兩種抑菌劑復(fù)配使用，復(fù)配方案見(jiàn)表2，符合食品添加劑復(fù)配原則。將各組添加劑溶于無(wú)菌水中，得抑菌劑備用。對(duì)照組（CK）使用無(wú)菌水取代抑菌劑。

1.4.8.2" 抑菌圈法測(cè)定抑菌劑對(duì)腐敗菌的抑制效果

采用濾紙片法測(cè)定抑菌圈大小。分別取一定量的腐敗菌株加入225 mL無(wú)菌生理鹽水中充分搖勻，制得7株供試腐敗菌菌液。吸取1 mL菌液至無(wú)菌培養(yǎng)皿中，然后向培養(yǎng)皿中傾注15～20 mL冷卻至50 ℃左右的PCA培養(yǎng)基，混合均勻，水平靜置，凝固后備用。選用質(zhì)地均勻的濾紙，用直徑為10 mm的打孔器將濾紙打成相同大小的圓片，滅菌后備用。

待平板上的水分被瓊脂完全吸收后，吸取45 μL抑菌劑滴加到濾紙片上，將含有抑菌液的濾紙片貼到平板表面，并用鑷子輕壓，使其貼平，不再移動(dòng)位置。隨后，將上述平板放入4 ℃冰箱中預(yù)擴(kuò)散2 h，使濾紙片中的抑菌液擴(kuò)散到培養(yǎng)基中。預(yù)擴(kuò)散結(jié)束后，將平板取出，待恢復(fù)至室溫后放置于35 ℃生化培養(yǎng)箱中培養(yǎng)18 h，測(cè)量抑菌圈大小。

1.4.9" 數(shù)據(jù)分析

采用Origin 8.5進(jìn)行數(shù)據(jù)處理及作圖，采用SPSS Statistics 19.0進(jìn)行數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析（Duncan法），采用MEGA 7.0構(gòu)建系統(tǒng)發(fā)育樹(shù)。顯著差異水平取Plt;0.05。所有數(shù)據(jù)均為3次平行測(cè)量的平均值。

2" 結(jié)果與分析

2.1" 優(yōu)勢(shì)腐敗菌的鑒定

2.1.1" 形態(tài)學(xué)與生理生化鑒定

采用平板劃線法分離純化鮮濕豆絲中的腐敗細(xì)菌。從鮮濕豆絲中獲得7種腐敗菌，分別編號(hào)為X1、X2、X3、X4、X5、X6、X7。對(duì)所獲得的7株腐敗菌株的菌落形態(tài)進(jìn)行觀察鑒定，并進(jìn)行生理生化特性實(shí)驗(yàn)，結(jié)果見(jiàn)表3。將結(jié)果與《常見(jiàn)細(xì)菌系統(tǒng)鑒定手冊(cè)》和《伯杰細(xì)菌鑒定手冊(cè)》進(jìn)行對(duì)比，初步鑒定X1、X2、X3、X4、X6為芽孢桿菌屬，X5、X7為腸桿菌屬，進(jìn)一步采用分子生物學(xué)技術(shù)對(duì)7株腐敗細(xì)菌進(jìn)行菌種鑒定。

2.1.2" 分子生物學(xué)鑒定

將篩選得到的7種主要腐敗細(xì)菌進(jìn)行16S rDNA序列鑒定。從中選取若干個(gè)基因序列相似性高的菌株序列，使用軟件MEGA 7.0構(gòu)建系統(tǒng)發(fā)育樹(shù)，見(jiàn)圖1。

由圖1可知，菌株X1、X2、X3、X6與Bacillus subtilis聚為一支，親緣關(guān)系最近。菌株X4與Bacillus proteolyticus聚為一支，菌株X5與Enterobacter asburiae聚為一支，X7與Enterobacter sp.聚為一支。

將各個(gè)菌種的16S rDNA序列在NCBI基因庫(kù)中進(jìn)行同源性比較，結(jié)果見(jiàn)表4。

由表4可知，7株菌種的序列與已知序列的同源性均在99%以上，說(shuō)明鑒定結(jié)果可靠。結(jié)果顯示，X1、X6為枯草芽孢桿菌（Bacillus subtilis），X2、X3為芽孢桿菌屬（Bacillus sp.），X4為蘇云金芽孢桿菌（Bacillus thuringiensis），X5為阿氏腸桿菌（Enterobacter asburiae），X7為考氏科薩克氏菌（Kosakonia cowanii）。

2.2" 腐敗微生物致腐能力測(cè)定

分別接種7種腐敗菌的鮮濕豆絲在貯藏期間均出現(xiàn)腐敗氣味，判定7種腐敗菌均有較強(qiáng)的致腐能力，為優(yōu)勢(shì)腐敗菌。以菌落總數(shù)與酸度為致腐能力評(píng)價(jià)指標(biāo)，判斷腐敗菌致腐能力的強(qiáng)弱。

2.2.1" 菌落總數(shù)

微生物的生長(zhǎng)繁殖所產(chǎn)生的代謝產(chǎn)物是引起鮮濕豆絲腐敗的主要因素之一。菌落總數(shù)的變化是其中最明顯的品質(zhì)指標(biāo)之一。接種7株腐敗菌的鮮濕豆絲在25 ℃條件下貯藏過(guò)程中菌落總數(shù)的變化趨勢(shì)見(jiàn)圖2。

wet bean shreds inoculated with spoilage bacteria

由圖2可知，隨著貯藏時(shí)間的延長(zhǎng)，菌落總數(shù)呈上升趨勢(shì)。其中接種菌株X2的菌落總數(shù)增長(zhǎng)幅度最大，由貯藏0 h時(shí)的3.66 lg CFU/g增長(zhǎng)到貯藏第72 h時(shí)的8.67 lg CFU/g，其次依次是接種X3、X6、X1、X4、X5、X7的樣品。

隨著貯藏時(shí)間的延長(zhǎng)，不同菌株的生長(zhǎng)狀況呈現(xiàn)出一定的差異。實(shí)驗(yàn)組的鮮濕豆絲在0～24 h貯藏期間，菌落總數(shù)上升速率較快，隨后增長(zhǎng)速率減緩，這可能是因?yàn)橘A藏前期營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)充足，微生物大量生長(zhǎng)繁殖，而在24 h后，胺類、酸類等代謝產(chǎn)物增多，從而抑制了微生物生長(zhǎng)，且可利用的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)減少，微生物數(shù)量達(dá)到相對(duì)飽和狀態(tài)，致使增長(zhǎng)速率減慢。實(shí)驗(yàn)組初始菌落總數(shù)相差不大，但后期差異較大，這可能是由于不同微生物的生長(zhǎng)代謝速度和致腐機(jī)制不同，從而造成了菌落總數(shù)的差異，其結(jié)果與7種腐敗菌對(duì)鮮濕豆絲酸度影響的結(jié)果大致相同。

2.2.2" 酸度

接種腐敗菌的鮮濕豆絲在25 ℃條件下貯藏過(guò)程中酸度變化見(jiàn)圖3。

由圖3可知，接種了不同腐敗菌株的鮮濕豆絲的酸度差異較大，且實(shí)驗(yàn)組的酸度值遠(yuǎn)大于CK組。隨著貯藏時(shí)間的延長(zhǎng)，所有樣品的酸度均呈上升趨勢(shì)，在貯藏0～24 h內(nèi)，酸度上升速率最快，貯藏24 h后，上升速率減緩，在貯藏72 h時(shí)達(dá)到最大值。其中接種X2的鮮濕豆絲酸度變化幅度最大，在貯藏72 h時(shí)達(dá)最大值2.40 mL/10 g，其次依次為接種X3、X1、X6、X7、X4、X5的樣品。酸度與微生物的生長(zhǎng)呈正相關(guān)，這是因?yàn)樵谫A藏期間，微生物生長(zhǎng)代謝會(huì)產(chǎn)生酸類物質(zhì)，導(dǎo)致鮮濕豆絲的酸度升高。

2.3" 抑菌劑對(duì)腐敗菌的抑制作用

于35 ℃培養(yǎng)18 h后，CK組（0% ε-PL+0% CP）濾紙片周圍及與培養(yǎng)基接觸面均未出現(xiàn)抑菌圈。不同濃度抑菌液對(duì)7株腐敗菌的抑制作用見(jiàn)圖4。

由圖4可知，抑菌劑對(duì)7株腐敗菌均有抑制作用，且使用復(fù)配抑菌劑的抑菌效果優(yōu)于單一抑菌劑。隨著丙酸鈣含量的增大，7株腐敗菌的抑菌圈直徑整體呈現(xiàn)先增大后減小的趨勢(shì)。復(fù)配抑菌劑濃度為40% ε-PL+60% CP（實(shí)驗(yàn)序號(hào)4）時(shí)，菌株X1、X3、X2的抑菌圈較大。復(fù)配抑菌劑濃度為20% ε-PL+80% CP（實(shí)驗(yàn)序號(hào)5）時(shí)，菌株X1、X3、X2、X5的抑菌圈較大，對(duì)腐敗菌株的抑制效果較好。ε-PL主要通過(guò)破壞細(xì)胞膜和細(xì)胞壁的完整性，造成物質(zhì)外滲，影響蛋白質(zhì)合成等正常生理功能，從而抑制微生物生長(zhǎng)。丙酸鈣的作用機(jī)制主要是丙酸通過(guò)抑制微生物細(xì)胞內(nèi)酶的活動(dòng)，使微生物蛋白質(zhì)變性，從而達(dá)到抑制微生物生長(zhǎng)的作用。

3" 結(jié)論

采用平板劃線法從腐敗鮮濕豆絲中分離出7株腐敗細(xì)菌，經(jīng)鑒定為4株枯草芽孢桿菌（X1、X2、X3、X6）、1株蘇云金芽孢桿菌（X4）、1株阿氏腸桿菌（X5）、1株考氏科薩克氏菌（X7）。將無(wú)菌鮮濕豆絲接種分離出的腐敗菌，以菌落總數(shù)與酸度為檢測(cè)指標(biāo)，評(píng)價(jià)腐敗菌的致腐能力。結(jié)果顯示，接種了腐敗菌的樣品，其菌落總數(shù)與酸度均大于對(duì)照組，表明7株腐敗菌均有較強(qiáng)的致腐能力。通過(guò)濾紙片法測(cè)定抑菌圈大小，研究不同濃度復(fù)配抑菌劑（ε-PL與 CP）對(duì)7株腐敗菌的抑菌效果。其中，40% ε-PL+60% CP、20% ε-PL+80% CP兩種抑菌劑對(duì)腐敗菌有較好的抑制作用。

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