摘要：原料藥中的未知雜質(zhì)對藥品質(zhì)量和安全性具有重要影響。因此，對這些雜質(zhì)的分離和鑒定技術(shù)的研究至關(guān)重要。概述了原料藥中未知雜質(zhì)分離技術(shù)的常用方法，包括色譜技術(shù)、質(zhì)譜技術(shù)以及核磁共振波譜技術(shù)。這些技術(shù)在未知雜質(zhì)的檢測、結(jié)構(gòu)解析和含量測定中發(fā)揮著關(guān)鍵作用。通過這些技術(shù)的應(yīng)用，確保原料藥的質(zhì)量和安全性，為藥品監(jiān)管和質(zhì)量控制提供科學(xué)依據(jù)。

關(guān)鍵詞：原料藥;未知雜質(zhì);分離技術(shù)原料藥作為藥品生產(chǎn)的基礎(chǔ)，其質(zhì)量直接影響到最終產(chǎn)品的安全性和有效性。在原料藥的生產(chǎn)過程中，不可避免地會引入一些未知雜質(zhì)，這些雜質(zhì)的存在可能會對藥品的療效和安全性產(chǎn)生不利影響。因此，對原料藥中未知雜質(zhì)的分離和鑒定技術(shù)的研究顯得尤為重要。

1原料藥中未知雜質(zhì)的重要性

原料藥中未知雜質(zhì)是不可忽視的，它的存在會顯著地影響藥物的療效、安全性和穩(wěn)定性。未知雜質(zhì)可源于原料藥合成工藝，如反應(yīng)不完全、副反應(yīng)、原料不純或者在生產(chǎn)中受到污染等。這些雜質(zhì)可能使藥品療效下降甚至出現(xiàn)不良反應(yīng)。如一些雜質(zhì)可能有毒性，含雜質(zhì)藥品的長時間或大劑量攝入可嚴(yán)重威脅人體健康。未知雜質(zhì)可能會對藥品穩(wěn)定性造成影響。某些雜質(zhì)在貯存、運輸中可能促使藥品降解、失效或生成新的有害物質(zhì)。另外，雜質(zhì)存在也會對藥品外觀、氣味、溶解度等物理性質(zhì)產(chǎn)生影響，進而影響患者用藥依從性及藥品市場接受度。再者，未知雜質(zhì)的出現(xiàn)也給藥品監(jiān)管及質(zhì)量控制帶來更多考驗。藥品監(jiān)管機構(gòu)一般都制定了嚴(yán)格的雜質(zhì)管控標(biāo)準(zhǔn)，規(guī)定藥品生產(chǎn)企業(yè)必須對原料藥進行細致的雜質(zhì)檢測與識別，以保證藥品安全有效。所以，研究未知雜質(zhì)分離鑒定技術(shù)，以滿足監(jiān)管要求，提高藥品質(zhì)量顯得尤為重要，如圖1所示。

2原料藥中未知雜質(zhì)分離技術(shù)的常用方法

2.1色譜技術(shù)

2.1.1高效液相色譜（HPLC）

高效液相色譜（HPLC）是一種常用的分離和檢測未知雜質(zhì)的技術(shù)。其基本原理是將樣品通過高壓推動，經(jīng)過填充固定相的柱子，利用固定相與流動相（溶劑）之間的相互作用來分離混合物中的成分。在HPLC中，通過調(diào)節(jié)流動相的組成、柱溫和壓力等參數(shù)，實現(xiàn)對不同化合物的分離。高效液相色譜具有分離效率高、分析速度快、靈敏度高和操作簡便等優(yōu)點，因此在藥物分析中得到廣泛應(yīng)用［1］。

2.1.2氣相色譜（GC）

氣相色譜（GC）被廣泛認為是一種有效的分離方法，特別是在分析易揮發(fā)物質(zhì)時。樣本首先會蒸發(fā)為氣態(tài)，接著通過柱內(nèi)的載氣（通常是惰性氣體）推進，利用樣本與固定相之間的互動來實現(xiàn)分離。通過調(diào)整柱溫、載氣流速及固定相類型，實現(xiàn)不同化合物分離。氣相色譜因其高分辨率、高靈敏度和快速圖1原料藥中的未知雜質(zhì)分離技術(shù)分析

的分析能力，在藥物分析領(lǐng)域也獲得了廣泛的應(yīng)用。對未知雜質(zhì)分析時，可將未知雜質(zhì)與標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)保留時間進行比對，做定性定量分析，這對確保藥品的安全、有效至關(guān)重要。目前常用方法主要包括：化學(xué)分析法、質(zhì)譜分析法和電化學(xué)法。但這幾種手段均需花費一定的時間來完成試樣的前處理，且無法完全取得預(yù)期的效果。

2.1.3毛細管電泳（CE）

毛細管電泳（CE）是一種電動力驅(qū)動的分離方法，在藥物分析中有著廣泛的應(yīng)用，尤其是在分離和檢測帶電性化合物方面表現(xiàn)尤為出色。其原理是基于電場的作用，帶電的粒子（通常是離子或分子）在毛細管中的移動速度是由其電荷量、大小和電場的強度決定的。不同化合物因其電荷性質(zhì)及尺寸不一樣，在電場作用下遷移速率亦不相同，從而達到分離混合物之目的。毛細管電泳技術(shù)擁有眾多的優(yōu)點，如高效的分離能力、快速的分析速度以及對樣本的低消耗。毛細管內(nèi)徑較小，減小對流動性及擴散的影響，從而提高了分離效率，便于復(fù)雜樣品分析。另外，因毛細管中流動阻力很小，所以分析速度很快，一般僅需數(shù)分鐘至數(shù)十分鐘就能完成一個分析。

2.2質(zhì)譜技術(shù)

2.2.1液相色譜質(zhì)譜聯(lián)用

液相色譜質(zhì)譜聯(lián)用（LCMS）融合了液相色譜與質(zhì)譜兩大技術(shù)的優(yōu)勢，是一種高效的分析手段。LCMS中，樣品先被液相色譜分離后再進入質(zhì)譜檢測定性分析。液相色譜是用于從復(fù)雜混合物中分離化合物并按它們在柱體上的滯留時間進行分離，質(zhì)譜是用來測定化合物分子結(jié)構(gòu)及其相對豐度。兩種技術(shù)相結(jié)合，使LCMS兼具高分辨率、高靈敏度及高選擇性。當(dāng)未知雜質(zhì)被解析后，可將待測化合物質(zhì)譜圖譜與數(shù)據(jù)庫標(biāo)準(zhǔn)質(zhì)譜比對，以判斷化合物結(jié)構(gòu)及性能。除此之外，LCMS技術(shù)還能夠利用多級質(zhì)譜技術(shù)（MS/MS）進行精確的定量分析和雜質(zhì)結(jié)構(gòu)的推測，這為藥物的研發(fā)和生產(chǎn)過程中的質(zhì)量控制提供了一種可靠的方法［2］。

2.2.2氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用

質(zhì)譜聯(lián)用（GCMS）是一種常用的分析技術(shù)，結(jié)合了氣相色譜和質(zhì)譜兩種技術(shù)的優(yōu)勢。在GCMS中，樣品首先通過氣相色譜進行分離，然后進入質(zhì)譜進行檢測和定性分析。氣相色譜用于分離易揮發(fā)性化合物，根據(jù)其在柱上的保留時間進行分離，而質(zhì)譜則用于確定化合物的分子結(jié)構(gòu)和相對豐度。GCMS具有分辨率高、靈敏度高和選擇性強的特點，可用于分析復(fù)雜混合物中的微量雜質(zhì)。在分析未知雜質(zhì)時，可以通過比較待測化合物的質(zhì)譜圖譜與數(shù)據(jù)庫中的標(biāo)準(zhǔn)質(zhì)譜進行匹配，從而確定其結(jié)構(gòu)和性質(zhì)。

2.3核磁共振波譜技術(shù)

2.3.11HNMR

質(zhì)子核磁共振波譜（1HNMR）是一項在化合物結(jié)構(gòu)和性質(zhì)分析方面具有廣泛應(yīng)用的高效技術(shù)。這一原理是基于核磁共振的觀察，當(dāng)樣本被置于高強度的磁場中，其中的質(zhì)子核會因磁場的影響而產(chǎn)生共振現(xiàn)象。1HNMR譜圖上不同化學(xué)環(huán)境下質(zhì)子會表現(xiàn)出不同共振頻率，從而在譜圖上出現(xiàn)特定的信號峰。對1HNMR譜圖進行分析，可得到大量信息用于化合物結(jié)構(gòu)與性能的鑒定。首先，化學(xué)位移提供了關(guān)于質(zhì)子環(huán)境的信息，即特定質(zhì)子相對于標(biāo)準(zhǔn)化合物（通常是四甲基硅烷）的位移程度。其次，信號峰上的積分值能夠給出每一個質(zhì)子所關(guān)聯(lián)的相對個數(shù)，進而推斷出分子內(nèi)各個部分所占的相對比例。最后，通過對信號峰形狀及相對位置的觀察還可判斷質(zhì)子間的耦合模式——鄰近質(zhì)子間的相互作用，對推測分子構(gòu)象及立體結(jié)構(gòu)有重要意義。1HNMR技術(shù)有很多的優(yōu)勢，包括非破壞性、不需要對樣品進行前處理、靈敏度高、分辨率好等。這就決定了樣品在被分析的同時結(jié)構(gòu)不會受到損傷，而且樣品制備過程無需繁瑣的步驟。

3原料藥中未知雜質(zhì)分離技術(shù)的應(yīng)用

3.1未知雜質(zhì)的檢測與鑒定

對于原料藥而言，由于其可能對藥品的安全性、有效性以及穩(wěn)定性造成不利影響，對于未知雜質(zhì)進行檢測和識別就顯得尤為重要。針對未知雜質(zhì)的檢測與鑒定，常用的技術(shù)包括色譜技術(shù)（如高效液相色譜、氣相色譜等）、質(zhì)譜技術(shù)（如質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)）以及核磁共振波譜技術(shù)（如質(zhì)子核磁共振波譜、13CNMR等）。這些技術(shù)能有效而敏感地分離檢測樣品，以精確地識別未知雜質(zhì)類型及含量。其中，色譜技術(shù)能夠?qū)崿F(xiàn)未知雜質(zhì)分離與定性分析，質(zhì)譜技術(shù)能夠為未知雜質(zhì)分子結(jié)構(gòu)提供數(shù)據(jù)支持，核磁共振波譜技術(shù)能夠進一步證實其結(jié)構(gòu)［3］。

3.2未知雜質(zhì)的結(jié)構(gòu)解析

解析未知雜質(zhì)的結(jié)構(gòu)可以幫助理解其來源、合成路徑以及對藥物質(zhì)量的影響，從而采取相應(yīng)的控制措施。通常，結(jié)構(gòu)解析的過程包括樣品的分離、提純和結(jié)構(gòu)鑒定。色譜技術(shù)（如高效液相色譜、氣相色譜）可以實現(xiàn)對未知雜質(zhì)的分離和純化，質(zhì)譜技術(shù)（如質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)）則可以提供未知雜質(zhì)的分子質(zhì)量和結(jié)構(gòu)信息。此外，核磁共振波譜技術(shù)（如質(zhì)子核磁共振波譜、13CNMR）可以提供未知雜質(zhì)的分子結(jié)構(gòu)和構(gòu)象信息。綜合運用這些技術(shù)，可以對未知雜質(zhì)的結(jié)構(gòu)進行全面、準(zhǔn)確的解析。

4結(jié)語

原料藥中未知雜質(zhì)的分離和鑒定技術(shù)是確保藥品質(zhì)量和安全性的關(guān)鍵環(huán)節(jié)。色譜技術(shù)、質(zhì)譜技術(shù)以及核磁共振波譜技術(shù)等現(xiàn)代分析技術(shù)的發(fā)展，為原料藥中未知雜質(zhì)的檢測和結(jié)構(gòu)解析提供了強有力的工具。通過這些技術(shù)的應(yīng)用，有效地監(jiān)控原料藥的質(zhì)量，為藥品監(jiān)管和質(zhì)量控制提供科學(xué)依據(jù)，保障公眾用藥安全。

參考文獻：

［1］彭秀玲，李文強，王茴茴，等.撲熱息痛原料藥中的未知雜質(zhì)分離及結(jié)構(gòu)鑒定［J］.化學(xué)研究與應(yīng)用，2023，35（7）：17901795.

［2］計小凡，歐陽輝，馮育林，等.多中心切割2DHPLCQTOF法對表柔比星脂質(zhì)體制劑中未知雜質(zhì)的分離與結(jié)構(gòu)推斷［J］.中國抗生素雜志，2023，48（1）：7986.

［3］孟祥燕，馮傳威，樊偉明，等.羅紅霉素未知雜質(zhì)的分離鑒定與抗菌活性研究［J］.中國抗生素雜志，2022，47（4）：361365.

作者簡介：滕麗華，女，河北保定人，工程師，本科，研究方向：藥品分析與國際注冊。