【摘 要】 目的：對(duì)維吾爾藥材阿勃勒進(jìn)行系統(tǒng)的生藥學(xué)鑒別研究。方法：采用性狀鑒別、顯微鑒別及薄層色譜鑒別的方法進(jìn)行定性鑒別，按照2020年版《中國(guó)藥典》的方法對(duì)水分、總灰分和浸出物進(jìn)行檢查；并利用高效液相色譜法測(cè)定阿勃勒中大黃酸的含量。結(jié)果：阿勃勒的藥材性狀、顯微特征明顯，薄層色譜斑點(diǎn)清晰，有專屬的鑒別特征。HPLC法測(cè)得大黃酸標(biāo)準(zhǔn)曲線方程為：Y=45829X-24617，R2=0.9999，大黃酸在5.19～51.9 μg范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系，平均回收率為102.79%，RSD為2.28%。結(jié)論：該方法準(zhǔn)確穩(wěn)定，重復(fù)性好，可為維吾爾藥材阿勃勒的鑒別、質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的制定提供參考依據(jù)。

【關(guān)鍵詞】 維吾爾藥材阿勃勒；生藥學(xué)；顯微鑒別；TLC；HPLC；大黃酸

【中圖分類號(hào)】R932

【文獻(xiàn)標(biāo)志碼】 A""" 【文章編號(hào)】1007-8517（2024）14-0044-04

DOI：10.3969/j.issn.1007-8517.2024.14.zgmzmjyyzz202414008

Pharmacognosy Study on the Uyghur Medicine Abole

WANG Yunfei PAYIMAN·Haimiti YU Ning*

Xinjiang Institute of" Meteria" Medica/Xinjiang Uyghur Pharmaceutical Laboratory，Urumqi 830000， China

Abstract：Objective To study systematically the pharmacognosy identification of the Uyghur herb Abrol. Methods Character identification， microscopic identification and TLC identification were used， and the content of rhein in Abrol was determined by HPLC. Results The characters" of" Abole medicinal and microscopic characteristics ofAbrol powder were obvious， the spots of thin layer chromatography were clear， and it had special identification characteristics. The standard curve equation of rhein by HPLC was Y=45829X-24617，R2=0.9999. Rhein showed a good linear relationship in the range of 5.19-51.9 μg. The average recovery was102.79%， RSD were 2.28%. Conclusion This study can provide reference for the identification and quality standard of Uyghur medicine Abole.

Key words：Fructus cassiae fistulae; Pharmacognosy;Microscopic Identification;TLC; HPLC; Rhein

阿勃勒Fructus Cassiae fistulae 為豆科植物臘腸樹(shù)（Cassia fistula L.）的干燥莢果。9月間果實(shí)成熟時(shí)采收，曬干［1］。阿勃勒是維吾爾醫(yī)藥習(xí)用品種，維吾爾名為黑亞爾先拜爾，異名為清瀉山扁豆、波斯皂莢。收載于《中華本草·維吾爾藥》《新疆維吾爾自治區(qū)藥材標(biāo)準(zhǔn)》《新疆維吾爾自治區(qū)中藥維吾爾藥飲片炮制規(guī)范》，一級(jí)濕熱，微甜、微酸，具有清熱消炎、潤(rùn)腸通便、散氣通經(jīng)等作用，用于干性炎癥、目赤眼痛、干咳氣喘、腸阻氣痛、喉干便秘、關(guān)節(jié)灼痛、閉經(jīng)腹痛等［2］。臨床經(jīng)典驗(yàn)方如復(fù)方夏塔熱合劑、復(fù)方合牙日仙拜爾蜜膏等，常用于清除異常膽液質(zhì)、潤(rùn)腸通便、清理血液、開(kāi)通阻滯等［3］。此外，阿勃勒在我國(guó)藏醫(yī)和傣醫(yī)的書(shū)籍文獻(xiàn)中均有記載［4-6］。原植物臘腸樹(shù)生長(zhǎng)于熱帶，雨水豐富地區(qū)，原產(chǎn)緬甸、印度、馬來(lái)西亞等地［7］，在我國(guó)廣東、云南等地均有栽培，是一種常見(jiàn)的觀賞樹(shù)木。據(jù)研究［8］報(bào)道，阿勃勒中主要的化學(xué)成分為蒽醌類、黃酮類及揮發(fā)油等?，F(xiàn)代藥理學(xué)研究［9］表明，阿勃勒具有顯著的潤(rùn)腸通便、抗菌殺蟲(chóng)、保護(hù)肝腎、抗炎解熱等作用。阿勃勒在維藥、藏藥和傣藥中均有記載，但其生藥學(xué)相關(guān)研究少見(jiàn)報(bào)道，質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究相對(duì)簡(jiǎn)單。因此，本研究利用生藥學(xué)方法，篩選藥材性狀、顯微組織等方面的特征，同時(shí)建立薄層色譜鑒別和高效液相色譜法，為阿勃勒質(zhì)量評(píng)價(jià)提供科學(xué)依據(jù)。

1 儀器與試藥

OLYMPUS CX31型顯微鏡（日本奧林巴斯公司）；SPD-10AVP型高效液相色譜儀（日本島津制造所）；BS110S型電子天平 （德國(guó)賽多利斯公司）；KQ-I00DE型數(shù)控超聲波發(fā)生器（昆山市超聲儀器有限公司）；沃特浦超純水機(jī)（四川水處理有限公司）；紫外線分析攝影儀（武漢藥科新技術(shù)開(kāi)發(fā)公司）。乙腈為色譜純（美國(guó)Fisher公司）、磷酸（天津市致遠(yuǎn)化學(xué)試劑有限公司，批號(hào)20230401410）、甲醇（天津市致遠(yuǎn)化學(xué)試劑有限公司，批號(hào)：20230301）、鹽酸（天津福晨化學(xué)試劑有限公司，批號(hào)20220115）、乙醚（天津市致遠(yuǎn)化學(xué)試劑有限公司，批號(hào)20230201413）、甲苯（成都市科隆化學(xué)品有限公司，批號(hào)2023032001）、乙酸乙酯（天津市致遠(yuǎn)化學(xué)試劑有限公司，20220401408）、甲酸（天津市北聯(lián)精細(xì)化學(xué)品開(kāi)發(fā)有限公司，批號(hào)20210920）、三氯甲烷（天津福晨化學(xué)試劑有限公司，批號(hào)20220114）、石油醚30-60（天津市致遠(yuǎn)化學(xué)試劑有限公司，批號(hào)20221201）均為國(guó)產(chǎn)分析純。大黃酸對(duì)照品（批號(hào)：111901-201102）購(gòu)自中國(guó)食品藥品檢定研究院；硅膠H、硅膠G 薄層板（青島海洋化工有限公司）。

2 方法與結(jié)果

2.1 性狀鑒別 莢果呈圓柱形，長(zhǎng)約30～60 cm，直徑1.5～2 cm，兩端尖；表面深褐色，具有明顯的腹縫和背縫。果皮木質(zhì)狀，硬而薄。內(nèi)有數(shù)個(gè)橫隔，每個(gè)橫隔有一粒種子，附著于腹縫。種子呈扁卵圓形，紅褐色，光滑質(zhì)地堅(jiān)硬，內(nèi)為淺黃色。味甜而微酸。如圖1所示。

2.2 顯微鑒定 粉末呈棕褐色，果皮表皮細(xì)胞呈長(zhǎng)圓形、類圓形或多角形，壁銷厚，胞腔內(nèi)含棕色或橙紅色物，有的呈顆粒狀斑紋。石細(xì)胞：較多，成群或單個(gè)散在，近黃棕色。呈類長(zhǎng)圓形、長(zhǎng)條形、類三角形或不規(guī)則形，有的邊緣突起，也有一端銳尖，大小不一。層紋明顯，孔溝較粗，有分叉。有的含橙黃色物。較小的石細(xì)胞有時(shí)排列成行，并與纖維相連，壁較厚，孔溝細(xì)。種皮巨細(xì)胞較多見(jiàn)，為種皮下皮細(xì)胞，有時(shí)與種皮石細(xì)胞相連，黃色或棕黃色。細(xì)胞扁薄，表面觀有類多角形或不規(guī)則形，近似石細(xì)胞；斷面觀呈扁長(zhǎng)方形。纖維成束，有時(shí)上下層交錯(cuò)排列，少數(shù)散在，淡黃色。纖維較長(zhǎng)，末端多圓鈍，厚薄不一，木化，常有不規(guī)則縱裂紋，孔溝不甚明顯。導(dǎo)管為網(wǎng)紋、螺紋導(dǎo)管，無(wú)色或淡黃色或淡棕色。種皮柵狀細(xì)胞成片，淡黃色或接近無(wú)色。側(cè)壁上部較厚，下部漸薄，內(nèi)壁薄，光輝帶位于上端；頂面觀呈多角形，胞腔極小，孔溝細(xì)而清晰；底面觀呈類多角形或類圓形，壁薄，胞腔較大。如圖2所示。

2.3 薄層色譜鑒別 取本品粉末2 g，加甲醇50 mL，浸泡1 h，濾過(guò)，取濾液10 mL，蒸干，殘?jiān)铀?0 mL使溶解，再加鹽酸2 mL，加熱回流30 min，立即冷卻，用乙醚分2次振搖提取，每次30 mL，合并乙醚液，蒸干，殘?jiān)尤燃淄? mL使溶解，作為供試品溶液。取大黃酸對(duì)照品加甲醇制成每1 mL含50 μg的對(duì)照品溶液。按照2020年版中國(guó)藥典四部通則0502薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述供試品溶液和對(duì)照品溶液各5 μL，點(diǎn)于同一硅膠H薄層板上，以甲苯-乙酸乙酯-甲酸（3∶[KG-*3/5]5∶[KG-*3/5]0.5）為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，在日光下下檢視。供試品色譜中，在與對(duì)照品相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的黃色斑點(diǎn)。如圖3所示。

2.4 水分、灰分、浸出物檢查 參考2020版《中國(guó)藥典》四部通則0832水分測(cè)定法項(xiàng)下第二法（烘干法）、通則2302灰分測(cè)定法、通則2201浸出物測(cè)定法，進(jìn)行水分、灰分和浸出物測(cè)定。結(jié)果見(jiàn)表2。

2.5 阿勃勒藥材大黃酸的含量測(cè)定

2.5.1 對(duì)照品溶液的制備 精密稱取大黃酸對(duì)照品適量，置于50 mL容量瓶，加甲醇制成濃度為51.9 μg·mL-1對(duì)照品儲(chǔ)備液。精密吸取儲(chǔ)備液5 mL，置于10 mL量瓶中，甲醇定容至刻度，搖勻，既得濃度為26.0 μg·mL-1對(duì)照品溶液。

2.5.2 供試品溶液的制備 取本品粉末（過(guò)3號(hào)篩）約1 g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇25 mL，稱定重量，加熱回流30 min，放冷，再稱定重量，用甲醇補(bǔ)足減失重量，搖勻，0.45 μm濾膜過(guò)濾，取續(xù)濾液，即得。

2.5.3 色譜條件 采用SHIMADZU-C18色譜柱（4.6 mm×250 mm，5 μm）。流動(dòng)相：0.1%磷酸水溶液∶[KG-*3/5]乙腈（50∶[KG-*3/5]50）；流速：1 mL/min；檢測(cè)波長(zhǎng)：254 nm，柱溫：35 ℃；進(jìn)樣量10 μL。大黃酸對(duì)照品及供試品色譜圖如圖4所示。

2.5.4 線性關(guān)系考察 分別配制不同濃度的大黃酸對(duì)照品溶液，按“2.5.3”項(xiàng)下色譜條件，分別進(jìn)樣10 μL，測(cè)定峰面積，以濃度為橫坐標(biāo)（X），峰面積為縱坐標(biāo)（Y），得到大黃酸的標(biāo)準(zhǔn)回歸方程為Y=45829X-24617，R2=0.9999，結(jié)果表明大黃酸在5.19～51.9 μg/mL范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系。

2.5.5 精密度試驗(yàn) 取大黃酸對(duì)照品溶液10 μL，在“2.5.3”項(xiàng)色譜條件下，連續(xù)進(jìn)樣6次，計(jì)算精密度，結(jié)果大黃酸峰面積平均值為1175936，RSD為1.65%，表明儀器精密度良好。

2.5.6 重復(fù)性試驗(yàn) 精密稱取同一批阿勃勒藥材6份，按“2.5.2”項(xiàng)下方法制備供試品溶液。在“2.5.3”項(xiàng)色譜條件下分別進(jìn)樣，測(cè)定大黃酸的峰面積，結(jié)果大黃酸平均峰面積為864052，RSD為1.64%，表明該方法重復(fù)性良好。

2.5.7 穩(wěn)定性試驗(yàn) 取同一供試品溶液，在“2.5.3”項(xiàng)色譜條件下，分別于0 h、2 h、4 h、6 h、8 h、10 h測(cè)定大黃酸的峰面積，平均值為842679，RSD為0.85%。結(jié)果表明樣品在10 h內(nèi)穩(wěn)定性良好。

2.5.8 加樣回收率試驗(yàn) 精密稱取已知含量的供試品共6份，每份約0.5 g，分別加入適量的大黃酸對(duì)照品溶液，按“2.5.2”項(xiàng)下方法制備供試品溶液，在“2.5.3”項(xiàng)色譜條件下進(jìn)樣。結(jié)果見(jiàn)表1。

2.5.9 樣品的測(cè)定 精密稱取各批次阿勃勒樣品，每批平行處理2份，按“2.5.2”項(xiàng)下方法制備供試品溶液，在“2.5.3”項(xiàng)色譜條件下進(jìn)樣。結(jié)果見(jiàn)表2。

3 討論

新疆維吾爾自治區(qū)藥材標(biāo)準(zhǔn)記載阿勃勒具有軟便、強(qiáng)筋、開(kāi)通阻滯的功效。用于口臭、咽喉腫痛、腸道熱性引起的疾病等。中華本草·傣藥卷［10］記載臘腸樹(shù)，傣藥名為“鍋攏良”。具有清熱解毒、利水化石、消腫止痛等功效，主治便秘、小便熱澀疼痛、咽喉腫痛、口舌生瘡等。蒙藥卷［11］記載臘腸果，蒙藥名為“烏日?qǐng)D-東嘎”，具有瀉下、消腫、解毒的功效，主治肝病、水腫、關(guān)節(jié)腫痛等。藏藥卷［12］記載臘腸樹(shù)，藏藥名為“同噶”，為豆科植物臘腸樹(shù)的干燥成熟果實(shí)。具有清肝熱、攻下、解毒、消腫的功效。主治肝熱、便秘、四肢腫脹等。阿勃勒主要含有蒽醌類化合物，成分是大黃酸、蘆薈苷等。大黃酸具有瀉下攻積、抗菌抗炎等作用［13］。所以大黃酸也是阿勃勒中的主要活性成分。本研究參照文獻(xiàn)［14］，利用高效液相色譜法測(cè)定阿勃勒藥材中大黃酸的含量，供試品的處理方法考察了甲醇和50%乙醇作為提取溶媒，以及超聲和回流的提取方法，結(jié)果證明甲醇回流提取時(shí)，大黃酸的含量較高。預(yù)實(shí)驗(yàn)以0.1%磷酸水溶液-乙腈（15∶[KG-*3/5]85）為流動(dòng)相時(shí)，大黃酸出峰時(shí)間太早，與溶劑峰重疊，所以調(diào)整流動(dòng)相比例為0.1%磷酸水溶液-甲醇（50∶[KG-*3/5]50），在此條件下對(duì)照品和樣品的對(duì)稱因子和分離度良好。

建立大黃酸薄層鑒別方法時(shí)，分別以石油醚（30-60）-甲酸乙酯-甲酸（15∶[KG-*3/5]5∶[KG-*3/5]1）的上層溶液、甲苯-乙酸乙酯-甲酸（5∶[KG-*3/5]4.5∶[KG-*3/5]0.5）為展開(kāi)劑，發(fā)現(xiàn)薄層板上對(duì)應(yīng)斑點(diǎn)邊緣效應(yīng)明顯，所以降低極性較高的展開(kāi)劑比例，調(diào)整展開(kāi)劑為甲苯-乙酸乙酯-甲酸（3∶[KG-*3/5]5∶[KG-*3/5]0.5）時(shí)，樣品和對(duì)照品在相應(yīng)的位置上有黃色的斑點(diǎn)。

本研究利用系統(tǒng)的生藥學(xué)方法對(duì)維吾爾習(xí)用藥材阿勃勒進(jìn)行了研究。結(jié)果表明，藥材性狀、粉末顯微特征以及薄層色譜鑒別等方面均存在特有的鑒別特征，由實(shí)驗(yàn)結(jié)果可以看出不相同產(chǎn)地，不同批號(hào)的阿勃勒藥材水分、灰分和浸出物的相差不大，但大黃酸含量差異較大。本研究可為阿勃勒鑒別和質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的建立提供參考依據(jù)。

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（收稿日期：2023-10-26 編輯：陶希睿）