【摘要】目的 研究呼吸道感染患者病原菌檢測(cè)結(jié)果，探討晶芯呼吸道病原菌核酸檢測(cè)的價(jià)值，為臨床提供參考。方法 回顧性分析2021年4月至2023年10月甘肅醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院收治的98例呼吸道感染患者的臨床資料。以痰培養(yǎng)結(jié)果為金標(biāo)準(zhǔn)，觀察呼吸道感染病原菌檢測(cè)結(jié)果，分析晶芯呼吸道病原菌核酸檢測(cè)與痰培養(yǎng)結(jié)果的一致性，分析晶芯呼吸道病原菌核酸檢測(cè)診斷革蘭氏陰性菌、革蘭氏陽(yáng)性菌和真菌感染的價(jià)值。結(jié)果 98例患者均獲得檢測(cè)標(biāo)本，檢測(cè)結(jié)果顯示，98例患者共檢測(cè)出病原菌株112株，以銅綠假單胞菌、肺炎克雷伯菌等革蘭氏陰性菌為主。一致性分析結(jié)果顯示，晶芯呼吸道病原菌核酸檢測(cè)結(jié)果與痰培養(yǎng)結(jié)果一致性高（Kappa值=0.788）。晶芯呼吸道病原菌核酸檢測(cè)診斷革蘭氏陰性菌的靈敏度為90.54%，特異度為86.84%，準(zhǔn)確率為89.29%；晶芯呼吸道病原菌核酸檢測(cè)診斷革蘭氏陽(yáng)性菌的靈敏度為90.00%，特異度為89.02%，準(zhǔn)確率為89.29%；晶芯呼吸道病原菌核酸檢測(cè)診斷真菌的靈敏度為75.00%，特異度為90.38%，準(zhǔn)確率為89.29%。結(jié)論 呼吸道感染患者病原菌以革蘭氏陰性菌為主，晶芯呼吸道病原菌核酸檢測(cè)用于病原菌檢測(cè)準(zhǔn)確率高，具有較高臨床應(yīng)用價(jià)值。

【關(guān)鍵詞】呼吸道感染；病原菌分布；晶芯呼吸道病原菌核酸檢測(cè)；診斷價(jià)值

【中圖分類(lèi)號(hào)】R446 【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】A 【文章編號(hào)】2096-2665.2024.15.0123.03

DOI：10.3969/j.issn.2096-2665.2024.15.041

呼吸道感染是臨床常見(jiàn)病，多為細(xì)菌和真菌等病原菌感染呼吸道所致，可表現(xiàn)為與普通感冒相似癥狀，嚴(yán)重情況可導(dǎo)致急性病毒性咽炎、肺炎等?？垢腥局委熓呛粑栏腥镜闹饕委煼桨福陙?lái)，隨著臨床技術(shù)進(jìn)步，呼吸道感染的治療方案不斷優(yōu)化，患者的預(yù)后得到顯著改善，但部分患者的病情仍會(huì)遷延發(fā)展，導(dǎo)致呼吸衰竭等不良預(yù)后[1]。早期病原菌檢測(cè)對(duì)指導(dǎo)臨床治療至關(guān)重要，痰培養(yǎng)是目前呼吸道感染患者病原菌檢測(cè)的金標(biāo)準(zhǔn)，但其所需時(shí)間較長(zhǎng)，可能會(huì)延誤治療時(shí)機(jī)[2]。因此，優(yōu)化病原菌測(cè)定方案?jìng)涫荜P(guān)注。晶芯呼吸道病原菌核酸檢測(cè)技術(shù)根據(jù)恒溫?cái)U(kuò)增微流控原理，進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光分析，可檢測(cè)痰液標(biāo)本中的病原菌情況，該技術(shù)在臨床逐漸得到推廣應(yīng)用[3]?；诖?，本研究探討呼吸道感染患者病原菌分布情況，并分析晶芯呼吸道病原菌核酸檢測(cè)技術(shù)的臨床價(jià)值，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 回顧性分析2021年4月至2023年10月甘肅醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院收治的98例呼吸道感染患者的臨床資料。98例患者中男性56例，女性42例；年齡25～64歲，平均年齡（49.12±10.45）歲；BMI 17.20～27.50 kg/m2，平均BMI（21.87±2.15）kg/m2；病情程度[4]：輕度35例，中度42例，重度21例。本研究經(jīng)甘肅醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。納入標(biāo)準(zhǔn)：⑴符合呼吸道感染的診斷標(biāo)準(zhǔn)[5]；⑵年齡gt;18歲，且臨床資料完整。排除標(biāo)準(zhǔn)：⑴合并溶血性貧血、急性髓系白血病和小板減少性紫癜等血液系統(tǒng)疾病者；⑵妊娠期、哺乳期者或正在備孕者；⑶合并惡性腫瘤者；⑷合并心力衰竭、腦出血、肝硬化和肺結(jié)核等嚴(yán)重基礎(chǔ)疾病者；⑸合并精神分裂癥、抑郁癥、精神意識(shí)障礙、不能配合檢查者。

1.2 研究方法 采用吸痰器（東莞東冠電子制品有限公司，粵械注準(zhǔn)20192141060，型號(hào)：SU-DC01）吸取兩組患者痰液3 mL。采用微流控蝶式芯片進(jìn)行反應(yīng)，以熒光染料滲入法進(jìn)行熒光分析，形成“S”形擴(kuò)增曲線(xiàn)，完成擴(kuò)增檢測(cè)，記錄檢測(cè)結(jié)果。另以相同方法吸取痰液3 mL送檢，將痰液標(biāo)本接種至巧克力瓊脂平面，在37 ℃下培養(yǎng)24 h，挑選優(yōu)勢(shì)菌落，采用手工涂片、染色，鑒定呼吸道感染病原菌的形態(tài)和種類(lèi)[采用全自動(dòng)微生物鑒定及藥敏分析系統(tǒng)（生物梅里埃美國(guó)股份有限公司，國(guó)械注進(jìn)20162222277，型號(hào)：VITEK 2 Compact）和革蘭氏陽(yáng)性細(xì)菌藥敏卡片（生物梅里埃美國(guó)股份有限公司，國(guó)械注進(jìn)20172401374，規(guī)格：20測(cè)試/盒）進(jìn)行鑒定]。

1.3 觀察指標(biāo) ⑴分析呼吸道感染病原菌檢測(cè)結(jié)果。⑵分析晶芯呼吸道病原菌核酸檢測(cè)與痰培養(yǎng)結(jié)果的一致性。⑶分析晶芯呼吸道病原菌核酸檢測(cè)診斷革蘭氏陰性菌、革蘭氏陽(yáng)性菌和真菌的價(jià)值。記錄晶芯呼吸道病原菌核酸檢測(cè)技術(shù)診斷病原菌種類(lèi)的靈敏度、特異度與準(zhǔn)確率。靈敏度=真陽(yáng)性例數(shù)/（真陽(yáng)性例數(shù)+假陰性例數(shù)）×100%；特異度=真陰性例數(shù)/（真陰性例數(shù)+假陽(yáng)性例數(shù)）×100%；準(zhǔn)確率=（真陽(yáng)性例數(shù)+真陰性例數(shù)）/總例數(shù)×100%。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 采用SPSS 18.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件分析數(shù)據(jù)。計(jì)數(shù)資料以例或百分率（%）表示；一致性分析采用Kappa檢驗(yàn)，以Kappa值gt;0.75為一致性好。以Plt;0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 呼吸道感染病原菌檢測(cè)結(jié)果 98例患者均獲得檢測(cè)標(biāo)本，檢測(cè)結(jié)果顯示，98例患者共檢測(cè)出病原菌株112株，含銅綠假單胞菌、肺炎克雷伯菌、鮑曼不動(dòng)桿菌、大腸埃希菌、金黃色葡萄球菌、肺炎鏈球菌、屎腸球菌、曲霉菌及白假絲酵母菌共9類(lèi)菌株，其中以銅綠假單胞菌、肺炎克雷伯菌、鮑曼不動(dòng)桿菌等革蘭氏陰性菌為主，見(jiàn)表1。

2.2 晶芯呼吸道病原菌核酸檢測(cè)與痰培養(yǎng)結(jié)果的一致性分析 一致性分析結(jié)果顯示，晶芯呼吸道病原菌核酸檢測(cè)結(jié)果與痰培養(yǎng)結(jié)果一致性高（Kappa值=0.788），見(jiàn)表2。

2.3 晶芯呼吸道病原菌核酸檢測(cè)診斷革蘭氏陰性菌的價(jià)值分析 晶芯呼吸道病原菌核酸檢測(cè)診斷革蘭氏陰性菌的靈敏度為90.54%，特異度為86.84%，準(zhǔn)確率為89.29%；晶芯呼吸道病原菌核酸檢測(cè)診斷革蘭氏陽(yáng)性菌的靈敏度為90.00%，特異度為89.02%，準(zhǔn)確率為89.29%；晶芯呼吸道病原菌核酸檢測(cè)診斷真菌的靈敏度為75.00%，特異度為90.38%，準(zhǔn)確率為89.29%，見(jiàn)表3、表4、表5。

3 討論

呼吸道感染是臨床常見(jiàn)感染性疾病，發(fā)病后不僅會(huì)出現(xiàn)咳嗽、咽痛和畏寒發(fā)熱等臨床癥狀，還可降低機(jī)體免疫防御能力和肺功能[6]，甚至影響患者遠(yuǎn)期預(yù)后。及時(shí)有效的抗感染治療能避免病情惡化，而在疾病早期進(jìn)行準(zhǔn)確的病原菌檢測(cè)對(duì)指導(dǎo)抗生素的應(yīng)用至關(guān)重要。因此，長(zhǎng)期以來(lái)如何快速準(zhǔn)確地對(duì)呼吸道感染進(jìn)行診斷，并檢出病原菌一直是臨床關(guān)注焦點(diǎn)。目前，臨床多以痰培養(yǎng)結(jié)果為金標(biāo)準(zhǔn)，但痰培養(yǎng)檢測(cè)操作步驟繁瑣，耗時(shí)略長(zhǎng)，可能錯(cuò)過(guò)最佳治療時(shí)機(jī)，且部分患者可能發(fā)生假陰性結(jié)果，影響臨床診療方案的制訂。晶芯呼吸道病原菌核酸檢測(cè)利用等溫?cái)U(kuò)增技術(shù)進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光反應(yīng)，對(duì)病原菌進(jìn)行定性檢測(cè)，具有快速、準(zhǔn)確和低廉的特點(diǎn)，在呼吸道感染病原菌檢測(cè)中具有顯著優(yōu)勢(shì)[7]。與痰培養(yǎng)檢測(cè)比較，晶芯呼吸道病原菌核酸檢測(cè)時(shí)間更短，可在2 h內(nèi)得到檢測(cè)報(bào)告，縮短檢驗(yàn)周期[8]。

本研究結(jié)果顯示，98例患者均獲得檢測(cè)標(biāo)本，檢測(cè)結(jié)果顯示，98例患者共檢測(cè)出病原菌株112株，以銅綠假單胞菌、肺炎克雷伯菌等革蘭氏陰性菌為主，這與宋昱晨等[9]結(jié)果一致，提示革蘭氏陰性菌是呼吸道感染主要病原菌。在臨床干預(yù)中，可早期進(jìn)行經(jīng)驗(yàn)性抗生素干預(yù)，在獲得病原菌檢測(cè)結(jié)果后針對(duì)性地調(diào)整用藥，以提高抗菌效果，改善預(yù)后。本研究一致性分析結(jié)果顯示，晶芯呼吸道病原菌核酸檢測(cè)結(jié)果與痰培養(yǎng)結(jié)果一致性高，提示晶芯呼吸道病原菌核酸檢測(cè)具有較高的準(zhǔn)確性。晶芯呼吸道病原菌核酸檢測(cè)應(yīng)用環(huán)介導(dǎo)恒溫?cái)U(kuò)增技術(shù)，該技術(shù)操作簡(jiǎn)單，在65 ℃狀態(tài)下使DNA聚合酶復(fù)制擴(kuò)增后檢測(cè)出痰液中的病原菌[10]。趙溜[11]的研究結(jié)果也顯示，晶芯呼吸道病原菌核酸檢測(cè)技術(shù)穩(wěn)定性強(qiáng)、特異度和敏感度均較高，能早期識(shí)別病原菌種類(lèi)，且該技術(shù)檢測(cè)成本和檢測(cè)設(shè)備要求均較低，適宜在基層醫(yī)院應(yīng)用。因此，晶芯呼吸道病原菌核酸檢測(cè)對(duì)呼吸道感染病原菌篩查和臨床治療中具有重要指導(dǎo)和實(shí)用價(jià)值。

本研究結(jié)果還顯示，晶芯呼吸道病原菌核酸檢測(cè)對(duì)革蘭氏陰性菌、革蘭氏陽(yáng)性菌和真菌的診斷均具有較高的靈敏度、特異度和準(zhǔn)確率，這可能是因該技術(shù)可在痰液標(biāo)本中準(zhǔn)確提取病原菌DNA，進(jìn)而為鑒別病原菌種類(lèi)提供依據(jù)[12]。另外，晶芯呼吸道感染病原菌采用等溫?cái)U(kuò)增技術(shù)，通過(guò)促進(jìn)病原菌DNA增殖復(fù)制，從而提高病原菌的檢出率[13]。但在臨床應(yīng)用的過(guò)程中，其檢測(cè)結(jié)果可能受痰液標(biāo)本保存條件、操作流程、擴(kuò)增條件等因素影響[14]。因此，今后應(yīng)注意痰液標(biāo)本的保護(hù)，堅(jiān)持無(wú)菌操作原則，按步驟進(jìn)行檢測(cè)操作，以避免結(jié)果誤差，進(jìn)一步提高檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性。另外，本研究的樣本量較小，且為回顧性分析，今后將開(kāi)展更大樣本量的前瞻性對(duì)照研究進(jìn)一步驗(yàn)證研究結(jié)論。

綜上所述，呼吸道感染患者病原菌以革蘭氏陰性菌為主，晶芯呼吸道病原菌核酸檢測(cè)技術(shù)用于病原菌檢測(cè)的準(zhǔn)確性高，具有較高臨床應(yīng)用價(jià)值。

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