摘 要：為探明一次性施用緩控釋肥和常規(guī)施肥方式（基肥+追肥）對稻蝦綜合種養(yǎng)模式小龍蝦（Procambarus clarkii）肌肉品質(zhì)的影響，分別從采用上述2種施肥方式的稻蝦綜合種養(yǎng)稻田，隨機采樣小龍蝦，對其肌肉樣品進行常規(guī)營養(yǎng)成分分析、氨基酸和脂肪酸成分分析。結(jié)果表明，相較于常規(guī)施肥方式，一次性施肥顯著降低了小龍蝦肌肉中粗脂肪和粗蛋白含量，其中粗脂肪含量下降20.62%，粗蛋白含量下降4.31%；小龍蝦肌肉中11種氨基酸、總氨基酸、必需和非必需氨基酸含量顯著降低，僅胱氨酸顯著升高。一次性施肥方式下，檢測到12種脂肪酸，較常規(guī)施肥減少2種，肌肉脂肪酸含量顯著降低。在不投餌的前提下，一次性施肥不利于小龍蝦肌肉品質(zhì)的提升。

關(guān)鍵詞：施肥方式；稻蝦綜合種養(yǎng)；小龍蝦（Procambarus clarkii）；營養(yǎng)品質(zhì)

2020年我國小龍蝦（Procambarus clarkii）養(yǎng)殖總面積達到145.64萬hm2，養(yǎng)殖總產(chǎn)量達到239.37萬t，其中稻蝦綜合種養(yǎng)模式小龍蝦產(chǎn)量占養(yǎng)殖總產(chǎn)量的86.15%，已成為小龍蝦主要養(yǎng)殖模式[1]。稻蝦綜合種養(yǎng)將水稻種植和小龍蝦養(yǎng)殖結(jié)合在一起，充分利用稻田空間和生態(tài)資源，具備改良土壤、提升稻與蝦產(chǎn)量及品質(zhì)、提高農(nóng)民收益等優(yōu)點，實現(xiàn)了一田兩用、一水雙收[2]。但稻與蝦同時空管理給農(nóng)藝管理措施提出新的要求，其中，肥料施用方式仍存在較大的爭議，不適宜的施肥會導致小龍蝦死亡或大幅度減產(chǎn)[3]。現(xiàn)有研究多從水稻產(chǎn)量[4]、土壤改良[5]、溫室氣體排放[6]等方面開展，而以其肌肉品質(zhì)評判稻蝦綜合種養(yǎng)施肥方式的研究則較少。因此，本文以小龍蝦肌肉品質(zhì)為研究對象，探討一次性施用緩控釋肥（下文簡稱一次性施肥）和常規(guī)施肥方式（基肥+追肥）的影響，為提升稻蝦綜合種養(yǎng)生產(chǎn)技術(shù)提供參考。

1 材料與方法

1.1 試驗材料及樣品處理

試驗地點位于山東省濟寧市魚臺縣王魯鎮(zhèn)，所選試驗地已開展稻蝦綜合種養(yǎng)3年以上。選取兩塊試驗稻田，單塊面積為2 hm2，其中田面面積為1.8 hm2，環(huán)溝面積為0.2 hm2。6月前完成稻前小龍蝦采捕工作，晾田至田面輕微開裂。6月10日上水，放入蝦苗，蝦苗由其它非試驗地塊轉(zhuǎn)入，蝦苗規(guī)格約為5.0 g/尾，放養(yǎng)密度為60 000 尾/hm2。6月20日施用基肥，其中對照組為常規(guī)施肥模式，復合肥375 kg/hm2作為基肥，分別在返青、分蘗和幼穗分化階段施用150 kg/hm2尿素追肥；試驗組則為一次性施用緩控釋肥，用量600 kg/hm2。6月23日移栽水稻秧苗。種養(yǎng)期間，除施肥方式外，兩組管理方式一致，不進行投喂。

2021年8月25日，試驗組和對照組每3個地籠中的樣品混合后作為一個重復，每組3個重復，于每重復中隨機選取體格健壯、附肢完好、規(guī)格均一的小龍蝦30只，其中10只小龍蝦肌肉樣品混合后用于常規(guī)營養(yǎng)成分分析，其余20只小龍蝦肌肉混合后用于后續(xù)的氨基酸和脂肪酸成分分析。

1.2 檢測方法

小龍蝦肌肉樣品常規(guī)營養(yǎng)成分測定：使用直接干燥法測定肌肉含水量，灼燒法測定肌肉粗灰分含量，凱氏定氮法測定肌肉粗蛋白含量，索氏抽提法測定肌肉粗脂肪含量。

小龍蝦肌肉樣品氨基酸和脂肪酸含量的測定：氨基酸采用氨基酸分析儀進行測定，脂肪酸按照GB 5009.168-2016 進行測定。

1.3 營養(yǎng)品質(zhì)的評定方法

根據(jù)聯(lián)合國糧食及農(nóng)業(yè)組織（FAO）和世界衛(wèi)生組織（WHO）1973年建議的氨基酸評分標準模式和中國預防醫(yī)學科學院營養(yǎng)與食品衛(wèi)生所提出的全雞蛋蛋白質(zhì)的氨基酸模式計算氨基酸評分（Amino acid score， AAS）、化學評分（Chemical score， CS）：

AAS=樣品氨基酸含量（mg/gN）/FAO評分模式氨基酸含量（mg/gN）

CS=樣品氨基酸含量（mg/gN）/全雞蛋蛋白質(zhì)中同種氨基酸含量（mg/gN）

式中，氨基酸含量是指每克氮中氨基酸的毫克量。

氨基酸含量（mg/g N） = 肌肉氨基酸百分含量×6.25×1 000/肌肉蛋白質(zhì)的百分含量。

1.4 數(shù)據(jù)處理

用SPSS 21.0軟件進行統(tǒng)計分析，使用獨立樣本t檢驗分析試驗組和對照組樣本間的差異性，描述性統(tǒng)計值使用平均值±標準差。

2 結(jié)果

2.1 小龍蝦肌肉常規(guī)營養(yǎng)成分

如表1所示，一次性施肥小龍蝦肌肉粗蛋白和粗脂肪含量顯著低于常規(guī)施肥方式（Plt;0.05），其中粗脂肪含量下降20.62%，粗蛋白含量下降4.31%；而粗灰分和含水量無顯著性差異（Pgt;0.05）。

2.2 小龍蝦肌肉氨基酸組成

2種施肥方式小龍蝦肌肉中共檢測出17種氨基酸（表2），氨基酸總含量分別為14.42%和13.93%。常規(guī)施肥方式下小龍蝦肌肉中氨基酸總量、必需氨基酸總量、非必需氨基酸總量、必需氨基酸總含量與氨基酸總量（WEAA/WTAA）的比值和必需氨基酸總含量與非必需氨基酸總量（WEAA/WNEAA）的比值均顯著高于一次性施肥（Plt;0.05），而鮮味氨基酸總含量與氨基酸總量（WDAA/WTAA）的比值顯著低于一次性施肥（Plt;0.05）。

2.3 小龍蝦肌肉營養(yǎng)品質(zhì)評價

通過計算得出2種方式下小龍蝦肌肉的AAS和CS值（表3），常規(guī)施肥方式下小龍蝦肌肉中必需氨基酸的AAS在0.01～1.28；一次性施肥方式下小龍蝦肌肉中必需氨基酸的AAS在0.01～1.25。根據(jù)AAS評分和CS評分，2種施肥方式下小龍蝦肌肉的第一限制氨基酸均為甲硫氨酸＋胱氨酸；第二限制氨基酸為纈氨酸。

2.4 小龍蝦肌肉脂肪酸組成

小龍蝦肌肉中共檢測出14種脂肪酸，包括飽和脂肪酸（Saturated fatty acid， SFA）5種，單不飽和脂肪酸（Monounsaturated fatty acid， MUFA）2種，多不飽和脂肪酸（Polyunsaturated fatty acid， PUFA）7種（表4）。其中，常規(guī)施肥方式下肌肉SFA、MUFA和PUFA占肌肉濕重的1.98%、1.55%和1.93%，均顯著高于一次性施肥方式下的1.12%、0.82%和0.47%（Plt;0.05）。

常規(guī)施肥方式下小龍蝦肌肉SFA含量最高的是棕櫚酸（C16：0），MUFA含量最高的是油酸（C18：1n9c），PUFA含量最高的是順式-5，8，11，14，17-二十碳烯酸（C20：5n3）；一次性施肥方式下則分別為硬脂酸（C18：0）、油酸（C18：1n9c）和亞油酸（C18：2n6c）含量最高。

3 討論

尾部肌肉是小龍蝦的主要可食部位，分析其營養(yǎng)組成是評判蝦肉品質(zhì)的重要手段，也是反映其生理代謝水平的關(guān)鍵指標[7]。本研究發(fā)現(xiàn)，小龍蝦尾部肌肉除水分外，以粗蛋白含量為主，粗脂肪次之，灰分含量最低，組成比例與陳健等[8]、田娟等[9]研究結(jié)果相似。相較于常規(guī)施肥方式，一次性施肥顯著降低了小龍蝦肌肉的粗脂肪和粗蛋白含量，其中粗脂肪含量下降20.62%，粗蛋白含量下降4.31%。施肥方式已對稻田養(yǎng)殖小龍蝦肌肉品質(zhì)產(chǎn)生了顯著影響。

為明確施肥方式對小龍蝦肌肉品質(zhì)的影響，本研究從氨基酸和脂肪酸層面進行了進一步研究。結(jié)果表明，兩種施肥方式下小龍蝦肌肉中均檢出17種氨基酸，其中：必需氨基酸8種、非必需氨基酸9種，施肥方式并未影響氨基酸的組成種類。常規(guī)施肥方式下小龍蝦肌肉中11種氨基酸、總氨基酸、必需和非必需氨基酸含量等均高于一次性施肥，其中谷氨酸和天冬氨酸為氨基酸含量前兩位，與吳雷明等[10]研究一致，是影響肉質(zhì)鮮味的主要氨基酸[11]，施肥方式已對小龍蝦肌肉氨基酸含量產(chǎn)生了顯著影響。根據(jù)AAS評分和CS評分，2種施肥方式下小龍蝦肌肉的第一限制氨基酸均為甲硫氨酸＋胱氨酸，與鄭丹等[12]研究結(jié)果一致。常規(guī)施肥方式下小龍蝦肌肉更接近接近世界衛(wèi)生組織（WHO）/聯(lián)合國糧農(nóng)組織（FAO）理想模式優(yōu)質(zhì)蛋白質(zhì)要求。

脂肪酸是機體主要能源之一，對蝦類的生長和生存起著重要作用。飽和脂肪酸（SFA）可為機體提供能量，是重要的能量來源；而不飽和脂肪酸（UFA）具有降低血脂、預防心血管疾病、促進生長發(fā)育的作用[13]。常規(guī)施肥方式檢測脂肪酸種類為14種，而一次性施肥方式下僅檢測到12種，低于羅雅婷等[14]研究中的20種脂肪酸和田娟等[9]研究中的15種脂肪酸，一次性施肥降低了脂肪酸種類。在改變脂肪酸種類的同時，一次性施肥方式顯著降低了肌肉脂肪酸含量，除C20：0含量差異不顯著，其他脂肪酸含量均顯著低于常規(guī)施肥。施肥方式同樣對小龍蝦肌肉脂肪酸產(chǎn)生了顯著影響。

生活環(huán)境和食物組成是影響肌肉品質(zhì)的主要因素[15]。施肥方式改變了稻田浮游植物[16]、底棲生物[17]、雜草[18]及昆蟲[19]等動植物組成的群落結(jié)構(gòu)，影響了稻田生態(tài)系統(tǒng)組成。小龍蝦以其為食物來源[20]，食物結(jié)構(gòu)的改變是影響小龍蝦肌肉品質(zhì)的主要原因之一。萬金娟等[7]研究發(fā)現(xiàn)，可能由于缺少餌料的原因，蓮田套養(yǎng)小龍蝦肌肉中必需氨基酸和鮮味氨基酸的含量相對較低，野生蝦肌肉中粗脂肪含量最低?？芟槊鞯萚21]研究中發(fā)現(xiàn)“藕蝦”共作系統(tǒng)中天然餌料能支撐一定產(chǎn)量的小龍蝦養(yǎng)殖，過度減少飼料和化肥的投入則會導致小龍蝦減產(chǎn)風險。另外一方面，施肥引起養(yǎng)殖水體銨態(tài)氮、硝態(tài)氮等指標劇烈變化[22]。常規(guī)施肥方式下會出現(xiàn)銨態(tài)氮等指標短期劇烈升高，影響小龍蝦生理代謝水平、消化活性和免疫活性等[23]，但隨著各脅迫指標的逐漸下降小龍蝦進入恢復期，各項生理指標逐步恢復正常[24]；而一次性施肥為滿足水稻需求，水體指標長期保持在較高濃度水平[25]，抑制了蝦的攝食及生長，從而影響了小龍蝦的肌肉品質(zhì)。

4 結(jié)論

在不投餌的前提下，相較于常規(guī)施肥，一次性施肥改變了小龍蝦脂肪酸種類，降低了氨基酸和脂肪酸含量，不利于提升小龍蝦肌肉品質(zhì)。本研究結(jié)果可為構(gòu)建合理的稻蝦綜合種養(yǎng)施肥技術(shù)提供參考。

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