摘要：為了找到高效且對(duì)環(huán)境污染小的福壽螺防治藥劑，利用不同來(lái)源60%、90%和98%的茶皂素原粉分別配制7種濃度劑液，采用浸殺法測(cè)定各劑液對(duì)福壽螺的室內(nèi)毒殺活性。試驗(yàn)結(jié)果表明：3種不同來(lái)源茶皂素原粉配置的5.000、2.500、1.250、0.625、0.312、0.156、0.078 mg/L茶皂素劑液處理對(duì)福壽螺均具有不同程度的毒殺效果，福壽螺死亡率隨著濃度的提高和浸殺時(shí)間的延長(zhǎng)而增加；以5 mg/L茶皂素的效果最好，60%原粉配置的處理浸殺60 h福壽螺死亡率達(dá)到100%，而90%、98%原粉配置的處理要浸殺72 h福壽螺死亡率才達(dá)到100%；3組試驗(yàn)中，浸殺72 h，5 mg/L茶皂素的毒殺效果（福壽螺死亡率100%）均高于8 mg/L四聚乙醛處理（72.5%～77.5%），而2.5 mg/L茶皂素的毒殺效果（62.5%～67.5%）低于8 mg/L四聚乙醛處理；茶皂素處理劑量過(guò)低對(duì)福壽螺的室內(nèi)毒殺效果不佳。通過(guò)對(duì)72 h處理的毒力回歸分析，不同來(lái)源60%、90%和98%茶皂素原粉對(duì)福壽螺的LC50分別為1.27，1.21和1.37 mg/L。

關(guān)鍵詞：福壽螺；茶皂素；毒殺活性

中圖分類號(hào)：S482.1 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A 文章編號(hào)：1006-060X（2024）09-0082-05

Toxicities of Different Concentrations of Tea Saponins to Pomacea canaliculata

LIU Dong-yuan1，CUI Feng-jin1，ZHANG Si-qi1，LIU Ming1，CHEN Hong-jun2，LI Yi-cheng1，

LIU Xiu1，JIN Chen-zhong1

（1. School of Agriculture and Biotechnology， Hunan University of Humanities， Science and Technology， Key Laboratory of Green Prevention and Control of Crop Pests in Hunan Higher Education， Loudi 417000， PRC; 2. School of Materials and Environmental Engineering， Hunan University of Humanities， Science and Technology， Loudi 417000， PRC）

Abstract： This study aims to find efficient and environmentally friendly pesticides for the prevention and control of Pomacea canaliculata. The 60%， 90%， and 98% raw powder of tea saponins from different sources was prepared into tea saponin agents at seven concentrations （5.000， 2.500， 1.250， 0.625， 0.312， 0.156， and 0.078 mg/L）. The indoor toxicity of each agent to P. canaliculata was determined with the immersion method. The results showed that all the tea saponin agents prepared in this study had toxic effects on P. canaliculata. The mortality rate of P. canaliculata increased with the increases in concentration and immersion time. The tea saponin agent at the concentration of 5 mg/L had the strongest toxicity. The tea saponin agent prepared with 60% raw powder led to a mortality rate of 100% for P. canaliculata after 60 h of immersion， and that prepared with 90% and 98% raw powder achieved a mortality rate of 100% after 72 h of immersion. After immersion for 72 h， 5 mg/L tea saponin agent demonstrated higher toxicity （with a mortality rate of 100%） than 8 mg/L metaldehyde （with a mortality rate of 72.5%-77.5%）， while 2.5 mg/L tea saponin agent （62.5%-67.5%） demonstrated lower toxicity than 8 mg/L metaldehyde. The tea saponins at low doses demonstrated poor indoor toxicity to P. canaliculata. The regression analysis showed that 60%， 90%， and 98% tea saponin raw powder had the median lethal concentrations （LC50） of 1.27， 1.21， and 1.37 mg/L， respectively， on P. canaliculata after 72 h of treatment.

Key words： Pomacea canaliculata; tea saponin; toxicity

福壽螺（Pomacea canaliculata）屬于軟體動(dòng)物門中腹足目瓶螺科的淡水螺類[1-2]，繁殖力強(qiáng)，一次受精可多次產(chǎn)卵，且具有較強(qiáng)的耐受能力[3-6]，擴(kuò)散蔓延速度非?？?，于2003年被認(rèn)定為首批入侵中國(guó)的16種危害最大的外來(lái)物種之一[7]。福壽螺喜食水稻等水生植物，入侵水體后會(huì)威脅本土物種生存[8]，同時(shí)也是廣州管圓線蟲(chóng)的中間宿主，對(duì)入侵地區(qū)的農(nóng)業(yè)生產(chǎn)、生態(tài)系統(tǒng)、人類健康等造成了嚴(yán)重的危害[9-11]。

福壽螺的主要防治方法為化學(xué)防治，但化學(xué)防治福壽螺的藥劑對(duì)環(huán)境污染大，不僅易導(dǎo)致非靶標(biāo)生物的死亡，而且容易造成環(huán)境污染[12]。人工物理防治采用煙草、石灰等材料與人工捕捉、田間管理等措施破壞福壽螺的生活場(chǎng)所[13]。生物防治福壽螺主要采用天敵，如飼養(yǎng)鴨群啄食福壽螺[14]，但在我國(guó)仍然缺少有效天敵控制福壽螺[15]。福壽螺生命力、繁殖力極強(qiáng)，現(xiàn)有的物理、生物防治方法都難以徹底有效地根除福壽螺危害[16]。

目前國(guó)內(nèi)關(guān)于福壽螺防控技術(shù)研究表明，植物源生物農(nóng)藥具有更高效、更經(jīng)濟(jì)、對(duì)非靶生物更安全等優(yōu)點(diǎn)，成為防治福壽螺的研究熱點(diǎn)[17]。茶皂素具有環(huán)保綠色無(wú)污染的特點(diǎn)，同時(shí)對(duì)福壽螺有較高的毒力。關(guān)于茶皂素對(duì)有害生物的作用方式與作用機(jī)理，李玉清[18]研究了茶皂素對(duì)福壽螺纖維素酶的影響，結(jié)果表明，高濃度茶皂素對(duì)內(nèi)切β-1，4葡聚糖酶（EG）的作用表現(xiàn)為抑制作用。在對(duì)福壽螺的藥效方面，王小藝等[19]用茶皂素對(duì)福壽螺進(jìn)行了藥效試驗(yàn)，結(jié)果表明在較低濃度下茶皂素即對(duì)福壽螺幼螺有很好的浸殺作用；麻程軍等[20]研究表明，茶皂素對(duì)福壽螺的田間防效良好，并且推薦2.03 kg/hm2作為茶皂素防控福壽螺的田間使用劑量；王志華等[21]研究結(jié)果表明，30%茶皂素水劑對(duì)福壽螺具有良好毒殺作用，且隨著處理藥劑濃度增加對(duì)福壽螺的毒殺作用效果逐漸增強(qiáng)。目前茶皂素防治福壽螺的實(shí)際應(yīng)用并不高，其主要原因是茶皂素的結(jié)構(gòu)多樣，同種植物不同部位的茶皂素會(huì)存在結(jié)構(gòu)差異，且茶皂素在環(huán)境中的熱穩(wěn)定性也較差[22]。

本研究采用浸殺法測(cè)定不同含量的茶皂素對(duì)福壽螺的室內(nèi)毒殺活性，以期為開(kāi)發(fā)茶皂素環(huán)保穩(wěn)定劑型打下基礎(chǔ)。

1 材料與方法

1.1 供試材料

1.1.1 供試藥劑 60%和90%茶皂素原粉（陜西隴北源生物工程有限公司）；98%茶皂素原粉（蘭州沃特萊斯生物科技有限公司）。80%四聚乙醛可濕性粉劑（山東秀邦生物科技有限公司）。

1.1.2 供試生物 試驗(yàn)所用福壽螺均在湖南省婁底市婁星區(qū)萬(wàn)寶鎮(zhèn)三角塘菜田溝內(nèi)自然繁殖，選用螺口直徑≤ 0.5 cm范圍內(nèi)的福壽螺幼螺為實(shí)驗(yàn)個(gè)體，用純凈水加空心蓮子草于實(shí)驗(yàn)室內(nèi)養(yǎng)殖一天供試驗(yàn)。

1.1.3 試驗(yàn)器材 燒杯、玻璃棒、吸耳球、移液管、量筒、容量瓶、紗布、皮筋、萬(wàn)分之一電子分析天平等。

1.2 試驗(yàn)方法

1.2.1 藥液配置 藥液配置參考賢振華等[23]的溶液配制方法。按有效成分含量計(jì)算，分別取含量60%、90%、98%的茶皂素原粉用純凈水溶解配成有效成分含量為1.000 g/L的3種母液，以純凈水將各母液分別稀釋成5.000、2.500、1.250、0.625、0.312、0.156、0.078 mg/L的7個(gè)不同濃度的試驗(yàn)用藥液，分3組進(jìn)行試驗(yàn)。80%四聚乙醛可濕性粉劑用純凈水配制成有效成分含量1.000 g/L的母液，再以純凈水稀釋為8 mg/L試驗(yàn)用藥液。試驗(yàn)用藥液現(xiàn)配現(xiàn)用。

1.2.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì) 試驗(yàn)以不同茶皂素含量原粉配置的濃度分為3組試驗(yàn)。每組按配置的濃度設(shè)7個(gè)處理，以8 mg/L四聚乙醛、純凈水處理分別為對(duì)照（CK1、CK2），共9個(gè)處理，每處理設(shè)4次重復(fù)。

茶皂素對(duì)福壽螺的毒殺活性采用浸殺法進(jìn)行測(cè)定，參照王志華等[21]方法具體操作如下：取500 mL試驗(yàn)用藥液于燒杯中，投幼螺10顆，投放幼螺后加蓋紗布并用皮筋系緊，防止福壽螺逃逸。分別于12、24、36、48、60、72 h調(diào)查死亡情況，并清除死螺。判斷福壽螺存活方法為：用小勺子挑福壽螺螺口，螺口不主動(dòng)縮回為死亡，主動(dòng)縮回為未死亡。

根據(jù)觀察結(jié)果計(jì)算并統(tǒng)計(jì)死亡率和校正死亡率，并以濃度對(duì)數(shù)和死亡率幾率值進(jìn)行毒力回歸分析。死亡率和校正死亡率計(jì)算公式（1）（2）如下：

（1）

（2）

1.3 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析

采用Excel軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理和毒力回歸分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 60%茶皂素原粉配置的不同濃度藥液處理對(duì)福壽螺的毒殺效果

如表1所示，相對(duì)于CK2，7個(gè)濃度處理對(duì)福壽螺均有明顯的毒殺效果，福壽螺死亡率隨濃度的提高和浸殺時(shí)間的延長(zhǎng)而增加；以5 mg/L的毒殺效果最好，浸殺60 h福壽螺死亡率達(dá)到100%，較CK1提高30.0%；2.5 mg/L的毒殺效果次之，浸殺72 h為67.5%，較CK1低10%；其他濃度處理低于40%。

2.2 90%茶皂素原粉配置的不同濃度藥液處理對(duì)福壽螺的毒殺效果

由表2可知，相對(duì)于CK2，90%茶皂素配置的7個(gè)濃度處理對(duì)福壽螺均有明顯的毒殺效果，福壽螺死亡率隨濃度的提高和浸殺時(shí)間的延長(zhǎng)而增加；以5 mg/L的毒殺速度快、效果最好，浸殺72 h福壽螺死亡率達(dá)到100%，較CK1提高25.0%；2.5 mg/L的毒殺效果次之，浸殺72 h為62.5%，較CK1低12.5%；其他濃度處理低于40%。

2.3 98%茶皂素原粉配置的不同濃度藥液處理對(duì)福壽螺的毒殺效果

由表3可知，相較于CK2，90%茶皂素配置的7個(gè)濃度處理對(duì)福壽螺均有明顯的毒殺效果，福壽螺死亡率隨濃度的提高和浸殺時(shí)間的延長(zhǎng)而增加；以5 mg/L的毒殺速度快、效果最好，浸殺60 h福壽螺死亡率達(dá)到97.5%，較CK1提高40.0%，浸殺72 h福壽螺死亡率達(dá)到100%，較CK1提高25.0%；2.5 mg/L的毒殺效果次之，浸殺72 h為62.5%，較CK1低10.0%；其他濃度處理低于40%。

3組試驗(yàn)結(jié)果表明，3種含量茶皂素原粉配置的7個(gè)濃度處理對(duì)福壽螺均有不同程度的毒殺效果，福壽螺死亡率隨著藥劑濃度的提高和浸殺時(shí)間的延長(zhǎng)而增加；以5 mg/L茶皂素的效果最好，60%原粉配置的處理浸殺60 h福壽螺死亡率達(dá)到100%，而90%、98%原粉配置的處理要浸殺72 h才達(dá)到100%；5 mg/L茶皂素的毒殺效果（福壽螺死亡率100%）高于8 mg/L四聚乙醛處理（72.5%～77.5%），而2.5 mg/L茶皂素的毒殺效果（62.5%～67.5%）低于8 mg/L四聚乙醛處理；茶皂素濃度低于1.25 mg/L及以下濃度的處理浸殺72 h后福壽螺死亡率在40%以下。由此可知茶皂素處理劑量過(guò)低對(duì)福壽螺的室內(nèi)毒殺效果不佳。

2.4 不同含量茶皂素對(duì)福壽螺的毒力測(cè)定結(jié)果

3種不同含量茶皂素原粉配置的7個(gè)不同劑量藥液浸殺處理24、48、72 h對(duì)福壽螺的毒力回歸分析結(jié)果見(jiàn)表4。結(jié)果表明，60%、90%和98%的茶皂素原粉配置的藥液處理福壽螺48 h的LC50＜5 mg/L，而處理24 h的LC50＜20 mg/L；處理24 h和48 h，這3種不同含量茶皂素原粉對(duì)福壽螺的毒力大小排序?yàn)?0%茶皂素原粉＞90%茶皂素原粉＞98%茶皂素原粉；處理72 h，60%、90%和98%茶皂素原粉對(duì)福壽螺的LC50分別為1.27，1.21和1.37 mg/L，90%茶皂素原粉對(duì)福壽螺的毒力最高，98%茶皂素原粉對(duì)福壽螺的毒力最低。

毒力測(cè)定結(jié)果表明，3種不同含量茶皂素原粉對(duì)福壽螺均具有較高的毒殺活性，可作為開(kāi)發(fā)茶皂素環(huán)保穩(wěn)定的劑型。

3 討論與結(jié)論

目前利用植物源生物農(nóng)藥防控福壽螺的研究成為熱點(diǎn)[17]，植物源殺螺藥物具有低毒、易降解等優(yōu)點(diǎn)，目前已發(fā)現(xiàn)的對(duì)福壽螺有抑制作用的天然產(chǎn)物有茶皂素、槲皮素、木犀草苷、芹菜素等[24]。本研究所選的植物源活性成分為茶皂素，它是一種天然非離子表面活性劑[25]，具有純天然且環(huán)保、作用方式多樣、殺蟲(chóng)針對(duì)性更強(qiáng)等諸多特點(diǎn)，大部分茶皂素是從油茶餅中提取的[26]，來(lái)源多且易提取。

實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，茶皂素對(duì)福壽螺幼螺的生長(zhǎng)有一定的抑制作用，無(wú)論60%茶皂素還是90%、98%茶皂素處理，對(duì)福壽螺幼螺的抑制強(qiáng)度隨處理濃度和處理時(shí)間提高而增強(qiáng)。72 h后，5 mg/L的3種不同含量茶皂素原粉處理福壽螺死亡率均為100%；但8 mg/L的80%四聚乙醛可濕性粉劑處理福壽螺死亡率平均值為72.5%～77.5%，均低于5 mg/L的茶皂素原粉處理，表明了茶皂素對(duì)福壽螺的毒殺活性要大于四聚乙醛。王志華等[23]研究發(fā)現(xiàn)30%茶皂素水劑對(duì)福壽螺的毒性比化學(xué)藥劑 6%四聚乙醛顆粒劑低，分析其原因可能一方面本實(shí)驗(yàn)所用的為茶皂素原粉，而不是水劑，另外四聚乙醛的劑型也不同。

另外，90%茶皂素原粉對(duì)福壽螺72 h致死中濃度LC50為1.21 mg/L，而98%茶皂素原粉為1.37 mg/L，略高于前者，處理24 h和48 h的60%茶皂素原粉對(duì)福壽螺毒殺活性均高于90%和98%茶皂素原粉，分析其原因一方面茶皂素來(lái)源不同，可能存在結(jié)構(gòu)差異，且含量不同，含量越低其他成分越多，可能對(duì)殺螺活性有協(xié)同作用。這與蔣麗[27]研究發(fā)現(xiàn)不同提取方法和工藝提取的茶皂素組成成分不同，其抗菌活性也會(huì)有差異的結(jié)果類似。

本研究的3種不同含量茶皂素原粉對(duì)福壽螺均具有較高的毒殺活性，可考慮作為開(kāi)發(fā)茶皂素環(huán)保穩(wěn)定劑型的原藥。

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（責(zé)任編輯：謝培庚）