［摘要］ 牙髓干細(xì)胞（DPSCs） 是一類具有廣泛應(yīng)用潛力的間充質(zhì)干細(xì)胞。DPSCs 因其多向分化潛能和易獲取的特點(diǎn)成為眼科領(lǐng)域研究的熱點(diǎn)。近年來，DPSCs 在角膜上皮損傷和視網(wǎng)膜退行性病變的治療中表現(xiàn)出潛在的臨床應(yīng)用前景。DPSCs 可以通過分化為角膜上皮細(xì)胞和抑制M1 巨噬細(xì)胞，促進(jìn)角膜上皮再生和重建。此外，DPSCs 也可以分化為視網(wǎng)膜光感受器樣細(xì)胞和視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)樣細(xì)胞，替換原有視神經(jīng)元，分泌神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子介導(dǎo)損傷修復(fù)，促進(jìn)視網(wǎng)膜的再生，改善視網(wǎng)膜原有功能。現(xiàn)系統(tǒng)地回顧近年來國(guó)內(nèi)外相關(guān)文獻(xiàn)，就DPSCs 的生物學(xué)特性及其在角膜和視網(wǎng)膜疾病治療中應(yīng)用的研究進(jìn)展進(jìn)行綜述，以期為DPSCs 在轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)和眼科相關(guān)疾病治療中應(yīng)用的研究提供思路及策略。

［關(guān)鍵詞］ 牙髓干細(xì)胞； 眼； 角膜； 視網(wǎng)膜； 旁分泌

［中圖分類號(hào)］ R774. 1 ［文獻(xiàn)標(biāo)志碼］ A

干細(xì)胞是一類具有自我更新和多向分化潛能的原始細(xì)胞，在特定條件下能夠產(chǎn)生一種或多種特殊細(xì)胞類型［1］。根據(jù)分化潛能的不同，干細(xì)胞可以分為全能干細(xì)胞、多能干細(xì)胞和單能干細(xì)胞［2］。GRONTHOS 等［3］ 首次從成人第三磨牙中分離出快速增殖的單克隆干細(xì)胞群，將其移植到免疫功能低下的小鼠背部皮下時(shí)， 會(huì)產(chǎn)生一種牙本質(zhì)樣結(jié)構(gòu)，內(nèi)層為成牙本質(zhì)細(xì)胞，外層包繞著牙髓樣間質(zhì)組織， 該細(xì)胞群被稱為牙髓干細(xì)胞（dental pulpstem cells，DPSCs）。與神經(jīng)干細(xì)胞和角膜緣干細(xì)胞等單能干細(xì)胞不同，DPSCs 具有多向分化能力，在不同的誘導(dǎo)條件下具有向牙本質(zhì)、神經(jīng)、骨和脂肪等譜系分化的潛能［4-9］。近年來，DPSCs 在再生醫(yī)學(xué)和轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)領(lǐng)域受到廣泛的關(guān)注。DPSCs 的分化、增殖及旁分泌等特性使其可以促進(jìn)角膜和視網(wǎng)膜疾病損傷的修復(fù)，但國(guó)內(nèi)外相關(guān)綜述類報(bào)道較少?，F(xiàn)對(duì)DPSCs 的生物學(xué)特性及其在角膜和視網(wǎng)膜疾病治療中的潛在應(yīng)用價(jià)值進(jìn)行綜述，為DPSCs在相關(guān)眼科疾病治療中的應(yīng)用及轉(zhuǎn)化提供科學(xué)依據(jù)。

1 DPSCs 的培養(yǎng)和鑒別

DPSCs 呈梭形， 具有干細(xì)胞的一般生物學(xué)特性，同時(shí)還具備來源廣泛、取材方便和低免疫原性等優(yōu)點(diǎn)； 其與骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞（bone marrowmesenchymal stem cells， BMSCs） 有較多相似之處。二者具有相似的免疫表型， 如CD14 （-）、CD45 （-） 和CD146 （-）， 同時(shí)分泌相似的細(xì)胞因子，如生肌決定因子（myogenic determingfactor， MyoD）（-）、 神 經(jīng) 微 絲（-）、 整合素β1 （+） 和基質(zhì)細(xì)胞抗原1 （stromal cellsantigen 1， STRO-1）（+） 等［10-11］。2 種細(xì)胞分化途徑相似，DPSCs 分化的成牙質(zhì)細(xì)胞與BMSCs 分化的成骨細(xì)胞表達(dá)相似的礦化基質(zhì)蛋白， 且DPSCs 在體外培養(yǎng)時(shí)較BMSCs 表現(xiàn)出更高的增殖速率。BMSCs 在體外形成鈣化沉積物的同時(shí)還形成豐富的脂肪細(xì)胞簇， 而DPSCs 在體外形成的鈣化結(jié)節(jié)中不含脂肪細(xì)胞。DPSCs 和BMSCs 受相似的細(xì)胞因子調(diào)節(jié)，具有相同的蛋白表達(dá)譜，但在體外增殖能力和發(fā)育潛力方面存在顯著差異。

2 DPSCs 的生物學(xué)特性

2. 1 DPSCs的免疫學(xué)特性

聶姍姍等［12］ 發(fā)現(xiàn)：在正常狀態(tài)下，DPSCs 表達(dá)組織相容性復(fù)合體（major histocompatibilitycomplex， MHC）- Ⅰ 類分子， 體外培養(yǎng)的第2 代DPSCs中未見MHC-Ⅱ類分子明顯表達(dá)。使用γ干擾素（ interferon-γ，IFN-γ）刺激DPSCs后，MHC-Ⅱ類分子表達(dá)明顯上調(diào)，但淋巴細(xì)胞未見明顯增殖，提示DPSCs 可能具有免疫調(diào)節(jié)功能。采用DPSCs 刺激異體淋巴細(xì)胞，異體淋巴細(xì)胞不產(chǎn)生增殖反應(yīng)，表明DPSCs 具有較低的抗原反應(yīng)性。DING 等［13］發(fā)現(xiàn)：DPSCs 不能刺激同種異體T 淋巴細(xì)胞增殖，且在與混合淋巴細(xì)胞的反應(yīng)中抑制T 淋巴細(xì)胞和B 淋巴細(xì)胞增殖。此外， DPSCs 上調(diào)白細(xì)胞介素（interleukin， IL）-10， 下調(diào)IL-2 和IL-17， 并阻礙IFN-γ 的產(chǎn)生。提示轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1 （transforminggrowth factor- β1， TGF- β1） 單克隆抗體可以恢復(fù)DPSCs 抑制的T 淋巴細(xì)胞增殖，TGF-β1 可能參與了DPSCs 抑制淋巴細(xì)胞增殖的過程。同時(shí)， 將DPSCs與人外周血單核細(xì)胞共培養(yǎng)，調(diào)節(jié)性T 淋巴細(xì)胞的數(shù)量明顯增加，輔助性T 淋巴細(xì)胞17 （T helpercell 17，Th17） 細(xì)胞明顯減少。

巨噬細(xì)胞由經(jīng)典激活的M1 巨噬細(xì)胞和選擇性激活的M2 巨噬細(xì)胞2 種表型組成。M1 巨噬細(xì)胞分泌腫瘤壞死因子α （tumor necrosis factor-α，TNF-α）等促炎細(xì)胞因子，具有促炎作用；相反，M2 巨噬細(xì)胞分泌IL-10 等抗炎細(xì)胞因子，具有抗炎作用。

DPSCs 具有抗炎作用。核因子κB （nuclearfactor kappa-B，NF-κB） 是調(diào)節(jié)免疫和炎癥反應(yīng)過程中的經(jīng)典信號(hào)通路，DPSCs 可以部分阻斷NF-κBP65 亞基的表達(dá)，下調(diào)NF-κB 和P38 絲裂原活化蛋白激酶（mitogen-activated protein kinase， MAPK）信號(hào)傳導(dǎo)的激活，導(dǎo)致M1 巨噬細(xì)胞分泌TNF-α 減少［14-15］。DPSCs 與巨噬細(xì)胞共培養(yǎng)時(shí)， DPSCs 通過抑制M1 巨噬細(xì)胞分泌TNF-α，對(duì)M1 巨噬細(xì)胞產(chǎn)生免疫抑制作用。將DPSCs 移植到糖尿病大鼠后肢骨骼肌后， 坐骨神經(jīng)中M2 巨噬細(xì)胞明顯增加，M1 巨噬細(xì)胞明顯減少，改善了坐骨神經(jīng)血供和軸突形態(tài)，神經(jīng)傳導(dǎo)速度得以恢復(fù)［16］。

研究［17-18］ 顯示： 干細(xì)胞來源的外泌體在調(diào)節(jié)巨噬細(xì)胞極化中發(fā)揮重要作用。SHEN 等［14］ 發(fā)現(xiàn)：DPSCs 外泌體中的微小RNA（microRNA，miR）-1246表達(dá)水平較高，且可以促進(jìn)巨噬細(xì)胞從促炎表型轉(zhuǎn)化為抗炎表型介導(dǎo)免疫調(diào)節(jié)。

2. 2 DPSCs和血管重建

功能性血管的形成需要內(nèi)皮細(xì)胞、巨噬細(xì)胞和周細(xì)胞等不同類型細(xì)胞之間相互作用， DPSCs 參與并促進(jìn)血管生成。DPSCs 不但能夠分化為內(nèi)皮細(xì)胞和周細(xì)胞，還可分泌促血管生成因子，如血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子（vascular endothelial growth factor，VEGF）［19-21］。DPSCs 還通過旁分泌途徑分泌VEGF、堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子（basicfibroblast growth factor，bFGF） 和血小板衍生生長(zhǎng)因子（platelet-derived growth factor，PDGF） 等神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子，以旁分泌方式誘導(dǎo)血管生成［22］。

3 DPSCs 眼科臨床應(yīng)用

3. 1 角膜損傷

角膜緣干細(xì)胞 （limbal stem cells，LSCs） 可以阻止結(jié)膜上皮侵入角膜， 保持角膜組織的透明性， 維持角膜上皮的動(dòng)態(tài)穩(wěn)定［23］。燒傷、化學(xué)損傷、感染和慢性炎癥可導(dǎo)致LSCs 損失或角膜緣生態(tài)破壞， 致使角膜緣干細(xì)胞缺陷（limbal stem celldeficiency， LSCD）［24-27］。LSCD 可導(dǎo)致持續(xù)性上皮缺損、角膜結(jié)膜化、新生血管形成、角膜瘢痕和慢性炎癥［28］。傳統(tǒng)的藥物治療可以控制炎癥， 改善淚膜，逐步恢復(fù)角膜緣微環(huán)境，促進(jìn)健康角膜上皮細(xì)胞的分化。但若LSCD 未改善，則需進(jìn)行羊膜移植手術(shù)， 但單純的羊膜移植手術(shù)不能修復(fù)嚴(yán)重LSCD 丟失的LSCs， LSCD 對(duì)角膜的損害仍會(huì)持續(xù)加重［29-30］。

3. 1. 1 DPSCs 向角膜上皮細(xì)胞的分化 KUSHNEREV 等［31］ 刮除人供體角膜的上皮層后， 將DPSCs 轉(zhuǎn)移至角膜接觸鏡（contact lens，CL） 的角膜接觸面，發(fā)現(xiàn)大部分DPSCs 附著在角膜表面，且陽性表達(dá)角蛋白（keratin，KRT） 3 和角膜上皮細(xì)胞標(biāo)志物KRT12， 并限制結(jié)膜細(xì)胞標(biāo)志物KRT19 陽性細(xì)胞向角膜中心遷移。由此可見，DPSCs 可以分化為角膜上皮細(xì)胞， 并且能夠限制結(jié)膜上皮細(xì)胞的侵入，阻止角膜結(jié)膜化［32］。

GOMES 等［33］ 將組織工程DPSCs 片移植至輕度化學(xué)灼傷（mild chemical burn，MCB） 和重度化學(xué)灼傷（severe chemical burn， SCB） 動(dòng)物模型的角膜床， 結(jié)果顯示： 未接受DPSCs 移植的對(duì)照組兔角膜完全結(jié)膜化和混濁， 接受DPSCs 移植的兔眼角膜透明度有所改善，MCB 組較SCB 組兔的角膜更清晰，新生血管形成也較少。SPILLER 等［34］發(fā)現(xiàn)：VEGF 主要由M1 巨噬細(xì)胞產(chǎn)生，炎癥反應(yīng)是血管形成的主要調(diào)節(jié)因素。DPSCs 既具有直接促進(jìn)血管重建的作用，又有抑制M1 巨噬細(xì)胞延緩新生血管形成的作用。

研究［33］ 發(fā)現(xiàn)：MCB 組重建角膜細(xì)胞中KRT3和角膜上皮細(xì)胞標(biāo)志物KRT18 染色呈強(qiáng)陽性，表明有角膜上皮細(xì)胞生成。ATP 結(jié)合家族亞家族G 亞型成員2 （ATP binding cassette subfamily G member 2，ABCG2）、腫瘤蛋白P63和抗人LSCs抗體β1-integrin在角膜上皮基底細(xì)胞層陽性表達(dá)，證實(shí)DPSCs可以向LSCs分化［35］。然而，由于SCB 組重建角膜的化學(xué)損傷嚴(yán)重，局部微環(huán)境的變化較大，KRT3 和P63表達(dá)呈陰性。組織工程DPSCs 片的成功移植為L(zhǎng)SCD 的治療提供了新的視角， 具有重要的臨床意義。

3. 1. 2 DPSCs 向角膜基質(zhì)細(xì)胞的分化 研究［36-37］發(fā)現(xiàn)： 誘導(dǎo)DPSCs 向角膜基質(zhì)細(xì)胞分化后醛脫氫酶3 家族成員A1 （aldehyde dehydrogenase 3 familymember A1，ALDH3A1）、碳水化合物磺基轉(zhuǎn)移酶6（carbohydrate sulfotransferase 6， CHST6） 和角膜基質(zhì)細(xì)胞特征性基因前列腺素D2 合酶（prostaglandin D2 synthase， PTGDS） 表達(dá)上調(diào)，4 周后觀察到DPSCs 產(chǎn)生排列整齊的膠原，并誘導(dǎo)出透明的角膜基質(zhì)樣結(jié)構(gòu)； 將DPSCs 注射到小鼠的角膜基質(zhì)中，使用光學(xué)相干斷層掃描（opticalcoherence tomogrophy， OCT） 評(píng)估小鼠角膜的光散射和基質(zhì)水腫程度，結(jié)果與陰性對(duì)照組小鼠無明顯差異， 提示DPSCs 移植并不影響角膜透明度，也不誘導(dǎo)免疫排斥反應(yīng)。由此證實(shí)DPSCs 可以向角膜基質(zhì)細(xì)胞進(jìn)行分化，且在角膜盲的個(gè)性化臨床治療中具有巨大的應(yīng)用潛力。

3. 1. 3 DPSCs 向角膜內(nèi)皮樣細(xì)胞的分化 WAGONER 等［38］ 先將誘導(dǎo)性多能干細(xì)胞（induced pluripotent stem cells， IPSCs） 分化為神經(jīng)嵴細(xì)胞，再誘導(dǎo)神經(jīng)嵴細(xì)胞分化為角膜內(nèi)皮樣細(xì)胞。BOSCH 等［39］ 據(jù)此提出了DPSCs 兩步誘導(dǎo)方案， 先誘導(dǎo)DPSCs 分化為神經(jīng)嵴干細(xì)胞， 再誘導(dǎo)其分化為閉鎖小帶蛋白1 （zonula occludens-1，ZO-1）、Na+/K+ATP 酶α1 亞基（ATPase Na+/K+transporting α1 polypetide，ATP1A1）、Ⅳ型膠原蛋白α2 （collagen type Ⅳ alpha2，COL4A2） 和角膜內(nèi)皮細(xì)胞特異性蛋白Ⅷ 型膠原A2 （collagen type Ⅷalpha2，COL8A2） 上調(diào)的角膜內(nèi)皮樣細(xì)胞，該細(xì)胞具有與角膜內(nèi)皮細(xì)胞相同的特征性六邊形結(jié)構(gòu)，證實(shí)DPSCs 可以分化為角膜內(nèi)皮樣細(xì)胞， 為角膜內(nèi)皮損傷治療提供了新的思路。

DPSCs 可以分化為角膜內(nèi)皮樣細(xì)胞、角膜基質(zhì)細(xì)胞、角膜上皮細(xì)胞和LSCs 等。移植的DPSCs可恢復(fù)受損角膜組織的透明性， 將DPSCs 應(yīng)用于角膜重建具有一定的可行性，但其具體機(jī)制尚未完全闡明。DPSCs 可能分化為單一種類的角膜細(xì)胞或同時(shí)分化為幾種角膜細(xì)胞參與角膜重建，并可通過DPSCs 抑制M1 巨噬細(xì)胞促進(jìn)角膜上皮再生。DPSCs 減少輕度化學(xué)灼傷眼新生血管形成的機(jī)制和利用DPSCs 分化的角膜細(xì)胞制作有功能性的全層角膜方法也是需要探索的問題。

3. 2 視網(wǎng)膜退行性疾病

視網(wǎng)膜退行性疾病主要包括青光眼、年齡相關(guān)性黃斑變性、糖尿病性視網(wǎng)膜病變和視網(wǎng)膜色素變性［40-44］。目前針對(duì)以上幾種視網(wǎng)膜退行性疾病的治療方法主要是對(duì)癥治療，從而緩解視網(wǎng)膜細(xì)胞變性及凋亡的進(jìn)展，尚缺乏有效的促進(jìn)視網(wǎng)膜細(xì)胞再生的方法。

3. 2. 1 DPSCs 向視網(wǎng)膜光感受器樣細(xì)胞的分化 DPSCs 與小鼠視網(wǎng)膜Müller 細(xì)胞在條件培養(yǎng)基共培養(yǎng)后，神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞標(biāo)志物膠質(zhì)纖維酸性蛋白（glial fibrillary acidic protein， GFAP） 和神經(jīng)前體細(xì)胞標(biāo)志物多聚唾液酸神經(jīng)細(xì)胞黏附分子（ polysialicacid neural cell adhesion molecule， PSA-NCAM）雙陽性的細(xì)胞數(shù)量增加，約44% 的DPSCs 視紫紅質(zhì)編碼基因視錐-視桿細(xì)胞同源異形框基因（conerodhomeobox containing gene， CRX） 上調(diào)且陽性表達(dá)視紫紅質(zhì)和神經(jīng)視網(wǎng)膜亮氨酸拉鏈（neuralretina leucine zipper， NRL） 蛋白， 腦源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子（brain-derived neurotrophic factor， BDNF）表達(dá)明顯增加。提示DPSCs 能夠?qū)Σ煌囊暰W(wǎng)膜條件培養(yǎng)液作出反應(yīng)， 誘導(dǎo)出神經(jīng)膠質(zhì)樣細(xì)胞和視網(wǎng)膜光感受器樣細(xì)胞， 且具有分泌BDNF 的能力［45］。

3. 2. 2 DPSCs 向視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)樣細(xì)胞的分化 ROOZAFZOON 等［46］ 將DPSCs 分化的視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)樣細(xì)胞置于3D 支架中培養(yǎng)，結(jié)果顯示：與常規(guī)二維細(xì)胞培養(yǎng)比較， 配對(duì)盒轉(zhuǎn)錄因子6 （pairedbox 6， Pax6）、無調(diào)性bHLH 轉(zhuǎn)錄因子7 （atonalbHLH transcription factor 7，Atoh7） 和視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞特異性標(biāo)記基因大腦特異性同源盒/POU 結(jié)構(gòu)域3B （brain specific homeobox/POU domainprotein 3B，Brn3B） 在3D 結(jié)構(gòu)中的表達(dá)分別增加了2. 307 倍、1. 624 倍和3. 140 倍，提示3D 纖維蛋白支架更有利于DPSCs 向視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)樣細(xì)胞分化，更接近自然的組織特性，為視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞的體外培養(yǎng)和利用提供了參考。

3. 2. 3 DPSCs 在視網(wǎng)膜退行性疾病動(dòng)物模型中的應(yīng)用 DPSCs 移植到視神經(jīng)鉗夾模型大鼠玻璃體后，可旁分泌腦源性神經(jīng)因子、神經(jīng)生長(zhǎng)因子和神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子3 等細(xì)胞因子，促進(jìn)視神經(jīng)損傷后神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子介導(dǎo)的視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞（retinalganglion cells， RGCs） 修復(fù)和軸突再生［47-49］ 。MEAD 等［50］ 將DPSCs 移植至RGCs 損傷大鼠玻璃體中，5 周后RGCs 存活率為95%，而對(duì)照組存活率為67%，證實(shí)DPSCs 可以保護(hù)RGCs 及其軸突，維持RGCs 功能， 提示應(yīng)用DPSCs 可以成為治療青光眼的新途徑。

ALSAEEDI 等［51］ 將DPSCs 注射至視網(wǎng)膜變性大鼠的玻璃體內(nèi)，結(jié)果顯示：與對(duì)照組比較，注射DPSCs 組大鼠b 波振幅減小程度較輕， 表明DPSCs 在視網(wǎng)膜中起保護(hù)作用，可以減輕碘酸鈉對(duì)視網(wǎng)膜組織的毒性， 但其保護(hù)作用是由于DPSCs分化細(xì)胞的替代作用或由分泌的神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子發(fā)揮神經(jīng)保護(hù)作用尚需進(jìn)一步探討。

DPSCs 在治療視網(wǎng)膜退行性疾病方面同樣具有巨大潛力，目前對(duì)其可能的作用機(jī)制有以下幾種觀點(diǎn)：①DPSCs 通過分化為視網(wǎng)膜光感受器樣細(xì)胞和視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)樣細(xì)胞以替代病變部位的細(xì)胞［46］；② DPSCs 通過旁分泌途徑分泌營(yíng)養(yǎng)因子， 保護(hù)神經(jīng)元存活， 促進(jìn)軸突再生和視網(wǎng)膜功能恢復(fù)［47］；③ 細(xì)胞分化和營(yíng)養(yǎng)因子同時(shí)作用， DPSCs 分化的神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞可以作為支持細(xì)胞并分泌營(yíng)養(yǎng)因子，進(jìn)而改善原有功能［52］。

神經(jīng)干細(xì)胞在視網(wǎng)膜退行性疾病方面的作用機(jī)制包括替換原有視神經(jīng)元及分泌神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子介導(dǎo)損傷修復(fù)，與DPSCs 的作用機(jī)制相似［53］。DPSCs是否先分化為神經(jīng)干細(xì)胞，再對(duì)視網(wǎng)膜退行性疾病進(jìn)行修復(fù)， 尚需進(jìn)一步研究。同時(shí)， DPSCs 分化后的細(xì)胞在替代病變部位的光感受器細(xì)胞和視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞后是否具有正常的細(xì)胞功能且如何安全地利用細(xì)胞分化或旁分泌途徑分泌神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子也需進(jìn)一步探討。

4 小結(jié)與展望

DPSCs 具有分化為角膜內(nèi)皮樣細(xì)胞、角膜基質(zhì)細(xì)胞和角膜上皮細(xì)胞等能力，移植后可恢復(fù)角膜透明性， 具備角膜重建的潛力。此外， DPSCs 可能通過細(xì)胞替代或分泌營(yíng)養(yǎng)因子在治療視網(wǎng)膜退行性疾病方面展現(xiàn)出潛在的臨床前景。盡管研究人員已經(jīng)取得了部分研究進(jìn)展，但仍然需要更多的實(shí)驗(yàn)和臨床研究來進(jìn)一步驗(yàn)證和探索牙髓干細(xì)胞在眼科相關(guān)疾病治療方面的機(jī)制、療效及安全性。

利益沖突聲明：所有作者聲明不存在利益沖突。

作者貢獻(xiàn)聲明：劉翔宇參與論文選題、文獻(xiàn)整理和論文撰寫，張夢(mèng)迪參與論文審校，王霽雪參與論文審校和論文撰寫指導(dǎo)，徐春玲參與論文選題和論文撰寫指導(dǎo)。

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