亚洲免费av电影一区二区三区,日韩爱爱视频,51精品视频一区二区三区,91视频爱爱,日韩欧美在线播放视频,中文字幕少妇AV,亚洲电影中文字幕,久久久久亚洲av成人网址,久久综合视频网站,国产在线不卡免费播放

        ?

        高效液相色譜法測定壯藥伊血安無糖型顆粒中異綠原酸A和異綠原酸B的含量

        2024-12-23 00:00:00韋德李修善李金雄黃小珊韋錦陽曾德興
        現(xiàn)代鹽化工 2024年4期

        摘要:目的:優(yōu)化伊血安無糖型顆粒檢驗(yàn)方法,并建立質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。方法:采用高效液相色譜法測定制劑中的異綠原酸A、異綠原酸B。結(jié)果:建立伊血安無糖型顆粒中的異綠原酸A、異綠原酸B含量測定方法,異綠原酸A在0.023 0~0.735 4 μg內(nèi)呈良好的線性關(guān)系,回收率在98.16%~103.25%,RSDlt;2.0%;異綠原酸B在0.025 3~0.809 3 μg內(nèi)呈良好的線性關(guān)系,回收率在98.83%~102.82%,RSDlt;2.0%。結(jié)論:優(yōu)化了伊血安無糖型顆粒質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn),含量測定操作方法簡單,準(zhǔn)確度高,重現(xiàn)性好,可有效控制本品質(zhì)量。

        關(guān)鍵詞:伊血安無糖型顆粒;滇桂艾納香;異綠原酸A;異綠原酸B;含量

        滇桂艾納香是伊血安無糖型顆粒的君藥,發(fā)揮活血止血作用的主藥材,現(xiàn)代研究資料表明,酚酸類化合物是滇桂艾納香的主要活性成分之一。滇桂艾納香具有活血、止血、利水的功效,而滇桂艾納香的止血活性[1]成分為乙酸乙酯提取物中的酚酸類化合物,說明異綠原酸A、異綠原酸B與滇桂艾納香止血功效密切相關(guān)。本研究以異綠原酸A、異綠原酸B作為伊血安無糖型顆粒中滇桂艾納香的指標(biāo)性成分,完善伊血安無糖型顆粒質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn),為更好地監(jiān)控和評(píng)價(jià)伊血安無糖型顆粒質(zhì)量提供科學(xué)依據(jù)。

        1儀器與試藥

        1.1儀器

        十萬分之一電子分析天平(XS205,瑞士Mettler Toledo公司);數(shù)控超聲波清洗器(KQ5200E型,昆山市超聲儀器有限公司);數(shù)顯恒溫水浴鍋(HH-S6,江蘇金怡儀器科技有限公司);高效液相色譜儀:Waters 1525二元梯度泵、Waters 2489型紫外檢測儀、Waters 2707自動(dòng)進(jìn)樣器、Breeze2色譜工作站;色譜柱:大連依利特C18柱(5 μm,4.6×250 mm)、Waters Xbridge-C18柱(5 μm,4.6×250 mm)和ECOSIL ODS-C18柱(5 μm,4.6×250 mm)。

        1.2試劑與試藥

        異綠原酸A(純度>98%、RFS-Y06801911011,供含量測定用,成都瑞芬思生物科技有限公司);異綠原酸B(純度≥98%、DST 210625—037,供含量測定用,樂美天醫(yī)藥/德思特生物技術(shù)有限公司);滇桂艾納香對(duì)照藥材(批號(hào)121647—201602,中國食品藥品檢定研究院);伊血安無糖型顆粒(批號(hào):220809、220810、220811、220812、220813、220814、220815、220816、220401、200301、220116),陰性對(duì)照樣品,均由廣西萬壽堂藥業(yè)有限公司提供;甲醇、乙腈、磷酸為色譜純,水為超純水。

        2含量測定

        2.1色譜條件

        色譜柱:Waters Xbridge-C18柱(5 μm,4.6×250 mm);流動(dòng)相:乙腈0.1%磷酸水溶液(13∶87);柱溫:25 ℃;最大檢測波長:330 nm;進(jìn)樣量:10 μL;理論板數(shù)按異綠原酸A峰計(jì)算不低于3 000。

        2.2溶液的制備

        稱取已研成細(xì)粉的伊血安無糖型顆粒0.5 g,精確稱定質(zhì)量,置于具塞錐形瓶中,精確加入60%的甲醇溶液50 mL,稱定質(zhì)量,置于超聲儀中超聲處理(功率320 W,頻率80 kHz)30 min,取出放冷至室溫,再稱定質(zhì)量,用60%甲醇溶液補(bǔ)足減失的質(zhì)量,振搖使均勻,過濾,濾液用微孔濾膜過濾,即得供試品溶液。

        分別取異綠原酸A、異綠原酸B對(duì)照品適量,加甲醇制成20 μg/mL的混合對(duì)照品溶液。

        取缺滇桂艾納香的陰性樣品,按供試品溶液的制備方法進(jìn)行提取制成陰性供試品溶液。

        2.3專屬性試驗(yàn)

        取“2.2”項(xiàng)下供試品溶液進(jìn)行測定,記錄色譜圖。結(jié)果顯示,異綠原酸A和異綠原酸B的含量測定均不受溶劑、其他藥材等因素干擾,表明方法專屬性良好。

        2.4線性關(guān)系考察[2]

        取適量異綠原酸A、異綠原酸B配制成6種不同濃度的混合對(duì)照品溶液進(jìn)行測定,記錄峰面積,分別以進(jìn)樣量為橫坐標(biāo)(X),峰面積為縱坐標(biāo)(Y)進(jìn)行線性回歸,得回歸方程Y1=3 229 409.863 5X1+6 523.860 7(R2=1);Y2=3 420 779.135 1X2+9 302.333 3(R2=0.999 68)。

        結(jié)果表明,異綠原酸A和異綠原酸B進(jìn)樣量分別在0.023 0~0.735 4 μg和0.025 3~0.809 3 μg范圍內(nèi)峰面積線性良好。

        2.5精密度試驗(yàn)

        分別取“2.2”項(xiàng)下供試品溶液,分別進(jìn)樣6次,記錄峰面積,計(jì)算RSD值。

        結(jié)果顯示,供試品中異綠原酸A和異綠原酸B峰面積的RSD分別為1.66%和1.24%(n=6),表明該方法精密度良好。

        2.6穩(wěn)定性試驗(yàn)[3]

        取伊血安無糖型顆粒(批號(hào):220813),制備成供試品溶液,分別在0 h、2 h、4 h、6 h、8 h、10 h時(shí)進(jìn)行測定,計(jì)算RSD值。

        結(jié)果顯示,異綠原酸A和異綠原酸B的峰面積RSD值為2.26%和0.94%(n=5),表明供試品溶液在10 h內(nèi)基本穩(wěn)定。

        2.7重復(fù)性試驗(yàn)

        取同一批伊血安無糖型顆粒(批號(hào):2208013)適量,研細(xì),分別取6份樣品,按“2.2”項(xiàng)下方法進(jìn)行提取、測定,計(jì)算供試品溶液中異綠原酸A和異綠原酸B的平均質(zhì)量分?jǐn)?shù)及RSD值。

        結(jié)果顯示,供試品中異綠原酸A和異綠原酸B平均質(zhì)量分?jǐn)?shù)分別為1.041 0 mg/g和1.810 2 mg/g,RSD值分別為2.47%和0.92%,表明方法重復(fù)性良好。

        2.8加標(biāo)回收率試驗(yàn)

        取已測知含量的伊血安無糖型顆粒(批號(hào)220813,異綠原酸A質(zhì)量分?jǐn)?shù)為1.041 0 mg/g、異綠原酸B質(zhì)量分?jǐn)?shù)為1.798 8 mg/g)各0.25 g,共6份。分別取0.34 mL異綠原酸A(質(zhì)量濃度為0.766 mg/mL)和0.54 mL異綠原酸B(質(zhì)量濃度為0.842 mg/mL)加入樣品中,混勻,制備成供試品溶液進(jìn)行測定,記錄峰面積,并計(jì)算加標(biāo)回收率。結(jié)果顯示,異綠原酸A加標(biāo)回收率為98.16%~103.25%,RSD 1.82%;異綠原酸B加標(biāo)回收率為98.83%~102.82%,RSD 1.31%。

        2.9耐用性試驗(yàn)

        取伊血安無糖型顆粒(批號(hào):220813)適量,制備成供試品溶液,分別考察Waters Xbridge-C18柱(5 μm,4.6×250 mm),ECOSIL ODS-C18柱(5 μm,4.6×250 mm),大連依利特C18柱(5 μm,4.6×250 mm)測定異綠原酸A、異綠原酸B的含量。結(jié)果顯示,異綠原酸A、異綠原酸B含量的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差的RSD分別為2.28%和2.02%,表明耐用性好。

        3討論

        3.1指標(biāo)成分選擇

        滇桂艾納香為伊血安無糖型顆粒中的君藥,是發(fā)揮活血止血作用的主藥材之一,主要含有酚酸類、黃酮類、甾醇類、多糖類及揮發(fā)性成分等化學(xué)成分[4],其主要活性成分為酚酸類化合物,主要包括原兒茶酸、原兒茶醛、咖啡酸、綠原酸、異綠原酸A、異綠原酸B、異綠原酸C等。蘇宏娜等研究推測異綠原酸A和異綠原酸B是滇桂艾納香的主要化學(xué)成分和活性成分,兩個(gè)化合物為同分異構(gòu)體,都具有抗血小板聚集、抗菌、消炎的作用[5]。同時(shí),采用LC-MS分析滇桂艾納香的化學(xué)成分。故本研究將異綠原酸A和異綠原酸B作為HPLC定量的研究指標(biāo)成分。

        3.2檢測波長的選擇

        用紫外可見分光光度計(jì)在200~400 nm進(jìn)行掃描,異綠原酸A、異綠原酸B在330 nm處均有最大吸收,根據(jù)測定結(jié)果,以330 nm為檢測波長時(shí)測定干擾最小,故將檢測波長定為330 nm。

        3.3提取溶劑的選擇

        考察了30%甲醇、60%甲醇、甲醇和無水乙醇對(duì)供試品中異綠原酸A、異綠原酸B的提取效率。結(jié)果表明,60%甲醇溶液提取效率最高,故選擇60%甲醇溶液為提取溶劑。

        3.4提取方法的選擇

        考察了60%甲醇作為溶劑超聲1 h、回流提取1 h和浸提過夜對(duì)供試品中異綠原酸A、異綠原酸B的提取效率。結(jié)果表明,用超聲提取效率最高,故選擇超聲為提取方式。

        3.5提取時(shí)間的選擇

        考察了超聲15 min、30 min、60 min、90 min和120 min對(duì)供試品中異綠原酸A、異綠原酸B的提取效率。結(jié)果表明,超聲提取60 min提取率最高,但與提取30 min得到的含量相差不大,故為了節(jié)約時(shí)間,選擇提取時(shí)間為30 min。

        4結(jié)論

        針對(duì)伊血安無糖型顆粒中的滇桂艾納香,建立異綠原酸A和異綠原酸B的HPLC定量測定方法,實(shí)驗(yàn)操作簡單、陰性無干擾、專屬性強(qiáng),重現(xiàn)性好,可用于伊血安無糖型顆粒的質(zhì)量控制。

        參考文獻(xiàn):

        [1]寧小清,李耀華,談遠(yuǎn)鋒,等.不同采收月份壯藥白花九里明中3種化學(xué)成分含量測定[J].中國中藥雜志,2011,36(12):16231625.

        [2]林雀躍,張榮林,甘勇強(qiáng),等.壯藥材滇桂艾納香及其易混品種東風(fēng)草和高艾納香比較研究[J].中國藥事,2020,34(2):169183.

        [3]姜建萍,王美琪,馬雯芳,等.基于多種分析模式構(gòu)建壯藥滇桂艾納香HPLC指紋圖譜[J].中藥材,2018,41(1):124128.

        [4]姜建萍,王美琪,馬雯芳,等.HPLC-DAD波長轉(zhuǎn)換法同時(shí)測定不同產(chǎn)地滇桂艾納香中4種成分的含量[J].中國實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志,2018,24(3):7276.

        [5]蘇宏娜,李學(xué)學(xué),楊正明,等.壯藥材滇桂艾納香的研究進(jìn)展及其質(zhì)量標(biāo)志物的預(yù)測分析[J].中草藥,2022,53(7):22552267.

        一本久道久久综合婷婷五月| 99国产精品久久久久久久成人热 | 999久久久精品国产消防器材| 国产视频嗯啊啊啊| 久久免费精品日本久久中文字幕| 真人做爰试看120秒| 全免费a级毛片免费看网站| 久久av高潮av喷水av无码 | 亚洲中文字幕精品久久a| 国产综合精品一区二区三区| 处破痛哭a√18成年片免费| 亚洲AVAv电影AV天堂18禁| 免费看片的网站国产亚洲| 亚洲av无码一区东京热| 久久久久国产精品熟女影院| 仙女白丝jk小脚夹得我好爽| 日本一区二区免费看片| 国内精品久久久久久99| 国精产品一品二品国在线| 久久国产精品超级碰碰热| 黑人玩弄极品人妻系列视频| 精品无码无人网站免费视频| 国产精品白浆视频免费观看| 中文字幕亚洲精品第一页| 午夜免费观看日韩一级视频| 四虎影视4hu4虎成人| 中文AV怡红院| 亚洲av手机在线观看| 亚洲精品色午夜无码专区日韩| 久久tv中文字幕首页| 91亚洲精品久久久蜜桃| 中文乱码字字幕在线国语| 一性一交一口添一摸视频| 国产成人免费一区二区三区| 国产av一区二区日夜精品剧情 | 在线亚洲免费精品视频| 欧美精品无码一区二区三区| 国产人妻精品一区二区三区不卡| 国产精品国产自线拍免费| 美女视频在线观看网址大全| 亚洲熟妇久久国产精品|