摘要：[目的]分析小葉楊PsWOX11基因?qū)?cè)根生長(zhǎng)發(fā)育的影響，為研究木本植物WOX11基因調(diào)控側(cè)根生長(zhǎng)發(fā)育的分子作用機(jī)制提供參考。[方法]利用生物信息學(xué)方法鑒定小葉楊PsWOX11基因，并對(duì)基因、蛋白結(jié)構(gòu)以及保守序列等進(jìn)行分析。利用qRT-PCR技術(shù)分析PsWOX11基因組織特異性表達(dá)模式。創(chuàng)制轉(zhuǎn)基因植株35S：：PsWOX11（OE）和35S：：PsWOX11-SRDX（DR），分析過(guò)表達(dá)和顯性抑制PsWOX11基因?qū)D(zhuǎn)基因楊樹側(cè)根生長(zhǎng)發(fā)育的影響。[結(jié)果]PsWOX11基因編碼區(qū)核苷酸序列長(zhǎng)度為768 bp，編碼255個(gè)氨基酸殘基，在楊樹主根和側(cè)根中表達(dá)豐度相對(duì)較高。創(chuàng)制了7個(gè)PsWOX11過(guò)表達(dá)轉(zhuǎn)基因楊樹株系和8個(gè)顯性抑制轉(zhuǎn)基因楊樹株系，對(duì)不同基因型楊樹進(jìn)行表型及顯微形態(tài)觀察發(fā)現(xiàn)，與非轉(zhuǎn)基因84K楊相比，過(guò)表達(dá)PsWOX11轉(zhuǎn)基因楊樹的側(cè)根長(zhǎng)度、直徑均顯著增加，而顯性抑制轉(zhuǎn)基因楊樹表型相反。[結(jié)論] PsWOX11基因參與調(diào)控楊樹的側(cè)根的生長(zhǎng)發(fā)育，促使側(cè)根的長(zhǎng)度和直徑增加，該研究為進(jìn)～步揭示W(wǎng)OX11基因參與調(diào)控小葉楊根系生長(zhǎng)提供了參考依據(jù)。

關(guān)鍵詞：小葉楊；PsWOX11；側(cè)根；根生長(zhǎng)；根直徑

中圖分類號(hào)：S718.46 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A 文章編號(hào)：1001-1498（2024）06-0054-08

wox（ WUSCHEL-related homeobox）是植物特有的一類轉(zhuǎn)錄因子，包含由65～66個(gè)氨基酸殘基組成的同源異型結(jié)構(gòu)域（ Homeodomain，HD）。不同wox成員通過(guò)在轉(zhuǎn)錄水平上調(diào)控下游靶基嗣的表達(dá)，參與植物的生長(zhǎng)發(fā)育，包括植物胚胎建成、干細(xì)胞維持和器官發(fā)生等，還響應(yīng)干旱、鹽和冷脅迫等非生物脅迫。

wox家族基因?qū)τ谥参锏厣喜糠稚L(zhǎng)發(fā)育的調(diào)控研究，主要包括參與芽、莖、葉、花、果實(shí)、種子等器官、組織形成等，例如，楊樹（ PopulusalbaxP.glandulosa）PagWOX11轉(zhuǎn)錄因子通過(guò)激活促芽因子和分生組織調(diào)節(jié)因子，如PiCUC2、PiCUC3和PiWUS等基因的表達(dá)，促進(jìn)芽的從頭再生。WOX4轉(zhuǎn)錄因子作為莖部形成層活性調(diào)控的樞紐，能夠響應(yīng)多種激素、小肽等信號(hào)，進(jìn)而維持形成層細(xì)胞的分裂和分化。煙草（NIcotiana sylvestris）NsWOX9轉(zhuǎn)錄因子通過(guò)對(duì)STF和LAM1的拮抗作用調(diào)控葉片發(fā)育，維持正確的葉片結(jié)構(gòu)和模式。擬南芥（Arabidopsis thaliana）和水稻（Oryza sat/vaL japonica）WOX13轉(zhuǎn)錄因子在花序組織形成過(guò)程中被誘導(dǎo)表達(dá)，影響花的發(fā)育。黃瓜（Cucumis sativus L.） CsWOX9轉(zhuǎn)錄因子在發(fā)育的果實(shí)中表達(dá)，且過(guò)表達(dá)Cs WOX9導(dǎo)致轉(zhuǎn)基因擬南芥的角果變短。WOX2轉(zhuǎn)錄因子在胚胎發(fā)育早期的原表皮形成中發(fā)揮著重要作用，且功能相對(duì)保守。然而，對(duì)于植物地下部分，毛白楊（Populus tomentosa Carri6re） PtoWOX5a轉(zhuǎn)錄因子參與楊樹不定根的發(fā)育，過(guò)表達(dá)PtoWOX5a基因?qū)е罗D(zhuǎn)基因楊樹不定根數(shù)量增加，但長(zhǎng)度相對(duì)減少。機(jī)械損傷誘導(dǎo)的生長(zhǎng)素可以激活擬南芥AtWOX11/12基因的表達(dá)，進(jìn)而調(diào)控AtLBD16和AtLBD29基因的轉(zhuǎn)錄，介導(dǎo)了離體葉片再生潛能細(xì)胞向根創(chuàng)始細(xì)胞轉(zhuǎn)變。AtWOX11/12蛋白還可以直接激活A(yù)tWOX5/7基因的表達(dá)，促進(jìn)根創(chuàng)始細(xì)胞到根原基的轉(zhuǎn)變。水稻OsWOX11/12基因促進(jìn)過(guò)表達(dá)轉(zhuǎn)基因水稻冠根分生組織的細(xì)胞增殖、伸長(zhǎng)等，導(dǎo)致不定根的數(shù)量和生長(zhǎng)增加，提高了根系生物量。

近年來(lái)，研究人員對(duì)wox轉(zhuǎn)錄因子的研究多集中在草本植物中，而對(duì)于林木研究較少。由于樹木生理、形態(tài)結(jié)構(gòu)及生長(zhǎng)發(fā)育等方面有著明顯的區(qū)別，所以木本植物wox家族成員的功能可能更加多元化，尤其是在影響莖段形成層活動(dòng)、莖段不定根的發(fā)生和生長(zhǎng)發(fā)育以及側(cè)根的形成等方面。楊樹是重要的速生造林樹種，也是木本植物分子生物學(xué)研究的模式樹種。小葉楊（Populus simonn Carriere）屬青揚(yáng)派，是我國(guó)北方地區(qū)的主要鄉(xiāng)土樹種，具有抗逆性強(qiáng)、適應(yīng)性廣、易繁殖和壽命長(zhǎng)等特點(diǎn)，因其根系發(fā)達(dá)、抗性優(yōu)良被廣泛用于防風(fēng)固沙，改善生態(tài)環(huán)境。因此，wox家族成員可能在側(cè)根形成方面發(fā)揮著重要功能。本研究以小葉楊為研究材料，克隆和分析了小葉楊PsWOX11的基因序列和組織表達(dá)特異性，并以銀腺楊（Populus albaxP.glandulosa，‘84K’）為遺傳轉(zhuǎn)化材料，創(chuàng)制PsWOX11過(guò)表達(dá)和顯性抑制的轉(zhuǎn)基因楊樹，探討PsWOX11基因?qū)?cè)根生長(zhǎng)發(fā)育的影響，為進(jìn)一步闡明wox基因在木本植物側(cè)根發(fā)生和生長(zhǎng)發(fā)育中的作用機(jī)制提供幫助，也為后續(xù)林木分子設(shè)計(jì)育種提供理論指導(dǎo)。

1材料與方法

1.1研究材料

小葉楊用于基因克隆和基因表達(dá)分析，銀腺楊用于穩(wěn)定遺傳轉(zhuǎn)化和功能分析。小葉楊組培苗培養(yǎng)于固體培養(yǎng)基中，其成分包括MS基礎(chǔ)培養(yǎng)基，0.4 mg·L-1 IBA，5g·L-1瓊脂粉和20 g·L-1蔗糖，pH5.8-6.0；84K楊組培苗培養(yǎng)于固體培養(yǎng)基中，其成分包括1/2MS基礎(chǔ)培養(yǎng)基，0.05 mg·L-1 IBA，0.02 mg·L-1 NAA，5 g·L-1瓊脂粉和30 g·L-1蔗糖，pH5.8～6.0。所有植物材料均由中國(guó)林業(yè)科學(xué)研究院林木遺傳育種全國(guó)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室保存，人工氣候室條件為25℃，16 h/8h光照，黑暗，50 umol·m-2 s-1光照強(qiáng)度。組培苗在培養(yǎng)基中生長(zhǎng)3周后，將組培苗轉(zhuǎn)入營(yíng)養(yǎng)土（土壤：珍珠巖=3：1）中，并置于溫室繼續(xù)培養(yǎng)。

1.2研究方法

1.2.1基因序列分析 使用在線網(wǎng)站ExPASy（https：//web.expasy.org/protparam/）分析Ps-WOX11蛋白的理化性質(zhì)。利用DNAMAN軟件進(jìn)行多序列比對(duì)分析，所有物種的WOX11蛋白氨基酸序列都來(lái)源于GenBank數(shù)據(jù)庫(kù)。

1.2.2基因組織表達(dá)特異性分析 利用植物總RNA提取試劑盒（TIANGEN，中國(guó)）提取3周齡小葉楊組培苗不同組織的總RNA，包括主根、側(cè)根、莖和幼葉，提取方法參照說(shuō)明書。將總RNA去除基因組DNA污染后，利用PrimeScriptRT reagent Kit（TaKaRa，日本）反轉(zhuǎn)錄成cDNA，反應(yīng)體系及條件參照說(shuō)明書。利用Primer5軟件設(shè)計(jì)PsWOX11的定量引物PsWOX11-RT-F和PsWOX11-RT-R（表1）。利用SYBR PremixEx Taq Kit（TaKaRa，日本）定量試劑及實(shí)時(shí)熒光PCR儀器Light Cycler 480（Roche Applied Science，Penzberg，德國(guó)）進(jìn)行qRT-PCR分析。選用PsActin作為內(nèi)參基因，且進(jìn)行3次生物學(xué)重復(fù)和3次技術(shù)重復(fù)，根據(jù)2-△△方法進(jìn)行計(jì)算基因相對(duì)表達(dá)量。

1.2.3植物表達(dá)栽體構(gòu)建和遺傳轉(zhuǎn)化 以小葉楊根部總RNA反轉(zhuǎn)錄成的cDNA為模板，使用PrimeSTAR HS DNA Polymerase（TaKaRa，日本）對(duì)PsWOX11基因編碼區(qū)全長(zhǎng)序列進(jìn)行擴(kuò)增，將其與克隆載體pMD 19-T（TaKaRa，日本）相連接，并進(jìn)行測(cè)序、比對(duì)和鑒定。以含有PsWOX11基因的pMD 19-T質(zhì)粒為模板，利用GATEWAY技術(shù)，設(shè)計(jì)正向和反向引物序列（表1），擴(kuò)增PsWOX11基因編碼區(qū)全長(zhǎng)核苷酸序列，通過(guò)BP反應(yīng)將其與中間載體pDNOR207相連接，再通過(guò)LR反應(yīng)與強(qiáng)啟動(dòng)子CaMV35S（Cauliflower mosaic virus 35S）融合，構(gòu)建到植物過(guò)表達(dá)載體pMDC32中；同時(shí)，設(shè)計(jì)帶有EAR（ERF-associated amphiphilic repression）抑制結(jié)構(gòu)域的反向引物序列（SRDX序列）（表1），與構(gòu)建過(guò)表達(dá)載體同樣的方式構(gòu)建顯性抑制植物表達(dá)載體。

利用農(nóng)桿菌電擊轉(zhuǎn)化法，將獲得的PsWOX11基因植物過(guò)量表達(dá)載體和顯性抑制植物表達(dá)載體分別轉(zhuǎn)至農(nóng)桿菌感受態(tài)細(xì)胞GV3101中（上海唯地生物技術(shù)有限公司，中國(guó)）。采用農(nóng)桿菌侵染楊樹愈傷組織的遺傳轉(zhuǎn)化方法轉(zhuǎn)化84K楊，簡(jiǎn)言之，愈傷組織經(jīng)過(guò)農(nóng)桿菌侵染后，置于含有200 mg·L-3特美汀和3 mg·L-1潮霉素的芽分化誘導(dǎo)培養(yǎng)基上誘導(dǎo)、篩選抗性芽，再將不定芽移至含有同樣濃度潮霉素和特美汀的生根培養(yǎng)基中誘導(dǎo)生根，形成完整植株。摘取幼苗葉片，提取基因組總DNA和總RNA作為模板，利用表1中引物通過(guò)PCR擴(kuò)增和qRT-PCR技術(shù)對(duì)其進(jìn)行分子鑒定，包括基因組DNA水平和RNA水平。

1.2.4轉(zhuǎn)基因植株側(cè)根表型鑒定 選取大小一致（高度約3 cm，帶有2～3片幼葉）的非轉(zhuǎn)基因84K楊、PsWOX11基因過(guò)表達(dá)和顯性抑制的轉(zhuǎn)基因楊樹頂端，分別扦插于1/2 MS固體培養(yǎng)基中培養(yǎng)3周，觀察PsWOX11對(duì)側(cè)根長(zhǎng)度的影響，并截取距離根尖頂端相同距離（1 cm）的側(cè)根進(jìn)行橫切解剖，統(tǒng)計(jì)側(cè)根直徑。每次試驗(yàn)至少設(shè)置3個(gè)生物學(xué)重復(fù)，每個(gè)基因型楊樹至少包含10株個(gè)體。

1.2.5數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì) 使用軟件IBM SPSS Statistics23對(duì)統(tǒng)計(jì)的數(shù)據(jù)進(jìn)行分析，使用f檢驗(yàn)法分析差異顯著水平。

2結(jié)果與分析

2.1PsWOX11基因克隆和序列分析

根據(jù)小葉楊基因組信息（http：//www.populus-superpangenome.com/species/Populus__ simonii），從小葉楊中克隆了一個(gè)wox基因，其全長(zhǎng)編碼區(qū)核苷酸序列長(zhǎng)度為768 bp，可編碼255個(gè)氨基酸殘基，該蛋白的分子量約為28.12 kDa，等電點(diǎn)為5.69。多序列比對(duì)顯示，不同物種的核苷酸和氨基酸序列相似性較高，編碼的WOX11蛋白質(zhì)序列在N端都有一個(gè)高度保守的61個(gè)氨基酸殘基組成的同源盒結(jié)構(gòu)域，其中該基因與毛果楊PtWOX11基因的核苷酸序列相似度為99.61％，蛋白質(zhì)序列相似度為99.22％，與84K楊PagWOX11基因的核苷酸序列相似度為98.31％，蛋白質(zhì)序列相似度為97.25％（圖1），因此命名為PsWOX11。

2.2PsWOX11基因組織表達(dá)特異性分析

為探究PsWOX11基因在小葉楊不同組織中的表達(dá)情況，分別提取生長(zhǎng)3周齡小葉楊組培苗的主根、側(cè)根、莖和幼葉的總RNA，采用qRT-PCR技術(shù)進(jìn)行檢測(cè)。結(jié)果表明，PsWOX11基因在各個(gè)部位巾均有不同程度的表達(dá)，尤其在主根和側(cè)根中表達(dá)量較高，在葉片及莖段中也有一定的表達(dá)量，相對(duì)較低（圖2）。

2.3PsWOX11轉(zhuǎn)基因楊樹的獲得

為了進(jìn)一步研究PsWOX11基因在楊樹側(cè)根生長(zhǎng)發(fā)育中的作用，構(gòu)建了植物過(guò)表達(dá)載體35S：：PsWOX11和顯性抑制表達(dá)載體35S：：PsWOX11-SRDX（圖3A、B），采用農(nóng)桿菌侵染楊樹愈傷組織的遺傳轉(zhuǎn)化方法轉(zhuǎn)化84K楊，經(jīng)過(guò)誘導(dǎo)、再生培養(yǎng)，再通過(guò)抗生素篩選和基因組DNA分子檢測(cè)鑒定陽(yáng)性轉(zhuǎn)基因植株，共鑒定了過(guò)表達(dá)轉(zhuǎn)基因株系7個(gè)（OE1-OE7）和顯性抑制轉(zhuǎn)基因株系8個(gè)（SRDX1-SRDX8）（圖3C、D）。利用qRT-PCR檢測(cè)PsWOX11基因在各轉(zhuǎn)基因和非轉(zhuǎn)基因84K楊中的相對(duì)表達(dá)水平，結(jié)果顯示，與非轉(zhuǎn)基因84K楊相比，PsWOX11在各轉(zhuǎn)基因株系中的相對(duì)表達(dá)量水平均有不同程度的提高，表明PsWOX11基因已成功轉(zhuǎn)入84K楊中，并能夠過(guò)量表達(dá)。其中，PsWOX11基因在過(guò)表達(dá)轉(zhuǎn)基因株系OE1和OE3中的表達(dá)量分別是非轉(zhuǎn)基因84K楊的14.4和12.1倍，在顯性抑制轉(zhuǎn)基因株系SRDX2和SRDX6中的表達(dá)量分別是非轉(zhuǎn)基因84K楊的10.2和13.1倍（圖3E），選擇該4個(gè)轉(zhuǎn)基因株系用于后續(xù)的表型比較和功能分析。

2.4轉(zhuǎn)基因植株側(cè)根表型分析

選取大小一致（高度約3 cm，帶有2～3片幼葉）的非轉(zhuǎn)基因84K楊、過(guò)量表達(dá)（OE1和OE3）和顯性抑制PsWOX11基因（SRDX2和SRDX6）的轉(zhuǎn)基因楊樹頂端，將其分別扦插在1/2 MS固體培養(yǎng)基中，置于人工氣候室內(nèi)培養(yǎng)3周后，觀察PsWOX11基因?qū)?cè)根生長(zhǎng)發(fā)育的影響，包括側(cè)根長(zhǎng)度以及直徑等。與非轉(zhuǎn)基因84K楊相比，過(guò)表達(dá)轉(zhuǎn)基因楊樹的每條主根上所有側(cè)根的總長(zhǎng)度（LLR）明顯增加，均顯著高于非轉(zhuǎn)基因84K楊46.4％和41.2％，而顯性抑制轉(zhuǎn)基因楊樹相對(duì)較小，均顯著低于非轉(zhuǎn)基因84K楊48.1％和41.9％（圖4）。以上結(jié)果表明，PsWOX11基因促進(jìn)了轉(zhuǎn)基因楊樹側(cè)根的生長(zhǎng)，增加了側(cè)根長(zhǎng)度。

為進(jìn)一步揭示PsWOX11基因在楊樹側(cè)根生長(zhǎng)發(fā)育中的作用，選擇培養(yǎng)3周的非轉(zhuǎn)基因84K楊、過(guò)量表達(dá)和顯性抑制PsWOX11基因的轉(zhuǎn)基因楊樹的側(cè)根，截取距離根尖頂端相同距離（1 cm）的側(cè)根進(jìn)行橫切解剖分析，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，三者側(cè)根的內(nèi)部結(jié)構(gòu)沒(méi)有明顯的差異，但是過(guò)表達(dá)PsWOX11轉(zhuǎn)基因楊樹的側(cè)根直徑明顯大于非轉(zhuǎn)基因84K楊，高達(dá)37.7％和30.4％，而顯性抑制PsWOX11轉(zhuǎn)基因楊樹相反，顯著低于非轉(zhuǎn)基因84K楊27.1％和25.1％，（圖5）。以上結(jié)果表明，PsWOX11基因影響了轉(zhuǎn)基因楊樹的側(cè)根直徑，促進(jìn)了側(cè)根徑向生長(zhǎng)。

3討論

根系是高等植物的重要營(yíng)養(yǎng)器官，水分、養(yǎng)分的吸收利用以及干旱、鹽等非生物脅迫的耐受性等諸多生命活動(dòng)在不同程度上都依賴根系的生長(zhǎng)發(fā)育。側(cè)根是植物根系的重要組成部分，它們從主根或不定根上側(cè)向生長(zhǎng)出來(lái)，對(duì)于形成龐大的植物支根系統(tǒng)具有重要意義。

側(cè)根的發(fā)生是一個(gè)復(fù)雜的生物學(xué)過(guò)程，受多種植物內(nèi)源激素和環(huán)境因素所調(diào)控，并有多種轉(zhuǎn)錄因子參與整個(gè)過(guò)程中，其中不同wox轉(zhuǎn)錄因子家族成員在調(diào)控側(cè)根的生長(zhǎng)發(fā)育過(guò)程中發(fā)揮著重要作用。例如，擬南芥AtWOX14基因在側(cè)根形成的早期特異性地表達(dá)，woxf4突變株系表現(xiàn)出初生根生長(zhǎng)遲緩。AtWOX7以糖依賴的方式影響側(cè)根的發(fā)育，過(guò)表達(dá)AtWOX7基因能夠直接抑制AtCYCD6;1基因的表達(dá)，進(jìn)而調(diào)節(jié)側(cè)根的發(fā)育，導(dǎo)致側(cè)根原基數(shù)量減少，恰恰相反，wox7突變體側(cè)根原基的數(shù)量顯著增加。在楊樹中，過(guò)表達(dá)和顯性抑制WOX11轉(zhuǎn)基因楊樹的側(cè)根數(shù)量明顯減少剛，但是過(guò)表達(dá)該基因后，轉(zhuǎn)基因植株的側(cè)根總長(zhǎng)度明顯高于非轉(zhuǎn)基因84K楊。與以上wox基因家族成員相比，小葉楊PsWOX11基因與毛果楊、84K楊WOX11基因的核苷酸、蛋白質(zhì)序列相似度極高，但部分氨基酸殘基的不同可能導(dǎo)致基因在影響側(cè)根發(fā)生和生長(zhǎng)發(fā)育方面功能上的差異。小葉楊PsWOX11基因與84K楊PagWOX11基因在根和葉中表達(dá)高于莖中，尤其在主根和側(cè)根中組織特異性表達(dá)豐度相對(duì)較高，而毛白楊PtoWOX11基因僅限于根中表達(dá)，且在不定根根冠后的小區(qū)域有表達(dá)。當(dāng)這些基因在轉(zhuǎn)基因84K楊中表達(dá)時(shí)都能促進(jìn)不定根的發(fā)生和生長(zhǎng)，表明這些WOX11基因在調(diào)控不定根發(fā)育過(guò)程中有保守的功能。本研究中小葉楊PsWOX11基因也直接影響著轉(zhuǎn)基因植株根系的生長(zhǎng)發(fā)育，過(guò)表達(dá)PsWOX11轉(zhuǎn)基因楊樹中每條主根上側(cè)根的長(zhǎng)度明顯高于非轉(zhuǎn)基因84K楊，而顯性抑制轉(zhuǎn)基因楊樹的表型恰恰相反，研究結(jié)果與PagWOX11基因基本一致刪，表明PsWOX11基因調(diào)控了側(cè)根的生長(zhǎng)發(fā)育。

另外有研究發(fā)現(xiàn)，PtoWOX5a和PtoWUSa參與了毛白楊不定根和側(cè)根的發(fā)育，過(guò)表達(dá)兩基因均會(huì)導(dǎo)致轉(zhuǎn)基因植株不定根數(shù)量增加，長(zhǎng)度減少，且不定根和側(cè)根根尖腫脹變大。水稻QHB/OsWOX5基因的qhb突變體植株無(wú)法形成S型側(cè)根，僵切除根尖后產(chǎn)生的L型側(cè)根數(shù)量增加，且在輕度干旱脅迫條件下，OsWOX10基因在qhb突變體的側(cè)根原基中表達(dá)量增加，進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)QHB通過(guò)負(fù)調(diào)控OsWOX10來(lái)抑制側(cè)根直徑的增加。在本研究中，過(guò)表達(dá)PsWOX11轉(zhuǎn)基因楊樹的側(cè)根直徑明顯大于非轉(zhuǎn)基因84K楊，而顯性抑制PsWOX11轉(zhuǎn)基因楊樹相反，表明PsWOX11基因影響了轉(zhuǎn)基因楊樹的側(cè)根直徑發(fā)育。然而，PsWOX11基因受哪些上游轉(zhuǎn)錄因子調(diào)控、PsWOX11蛋白與哪些蛋白相互作用，PsWOX11蛋白又調(diào)控哪些下游相關(guān)基因的表達(dá)，進(jìn)而調(diào)控側(cè)根的生長(zhǎng)發(fā)育，包括側(cè)根根尖細(xì)胞分裂和分化，細(xì)胞的大小以及管胞直徑與胞壁厚度等，其具體上、下游分子調(diào)控機(jī)制尚不清楚，有待進(jìn)一步探究，這些研究結(jié)果也將有助于深入了解楊樹側(cè)根生長(zhǎng)發(fā)育機(jī)理，為后續(xù)林術(shù)分子設(shè)計(jì)育種提供理論指導(dǎo)。

4結(jié)論

本研究從小葉楊中克隆了一個(gè)wox基因家族成員PsWOX11，與毛果楊和黑楊WOX11具有較高的氨基酸序列相似性，在楊樹主根和側(cè)根中表達(dá)量相對(duì)較高，能夠參與調(diào)控楊樹的側(cè)根的生長(zhǎng)和發(fā)育，促使側(cè)根長(zhǎng)度和直徑增加。以上研究結(jié)果表明，PsWOX11基因參與小葉楊根系生長(zhǎng)發(fā)育，對(duì)木本植物根系生長(zhǎng)具有重要的影響，但其分子作用調(diào)控機(jī)制有待進(jìn)行深入解析。