摘 要：本文對(duì)認(rèn)證認(rèn)可行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)RB/T 151《食品微生物定量檢測(cè)的測(cè)量不確定度評(píng)估指南》的修訂內(nèi)容進(jìn)行了解讀。新標(biāo)準(zhǔn)遵循ISO 19036：2019的理念和思路，分別介紹了技術(shù)不確定度、基質(zhì)不確定度、分布不確定度三個(gè)分量的評(píng)估方案，以及合成不確定度、擴(kuò)展不確定度的計(jì)算公式和測(cè)量不確定度的表示方法，新增了表格示例和數(shù)據(jù)檢索表，便于實(shí)驗(yàn)室理解和應(yīng)用。修訂版RB/T 151對(duì)于指導(dǎo)我國(guó)食品微生物定量檢測(cè)方法不確定度評(píng)估、保證結(jié)果有效性具有重要的現(xiàn)實(shí)意義。

關(guān)鍵詞：食品，微生物學(xué)，測(cè)量不確定度

DOI編碼：10.3969/j.issn.1002-5944.2024.14.024

0 引 言

測(cè)量不確定度的評(píng)估是實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量管理體系的重要組成部分[1-3]，是測(cè)試實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制有效性的重要內(nèi)容。我國(guó)實(shí)驗(yàn)室認(rèn)證認(rèn)可文件GB/T 27025—2019《檢測(cè)和校準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)室能力的通用要求》和 RB/T214—2017《檢驗(yàn)檢測(cè)機(jī)構(gòu)資質(zhì)認(rèn)定評(píng)審準(zhǔn)則》均明確要求實(shí)驗(yàn)室建立和實(shí)施評(píng)估測(cè)量不確定度的程序。CNAS-CL01-A001：2022《檢測(cè)和校準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)室能力認(rèn)可準(zhǔn)則在微生物檢測(cè)領(lǐng)域的應(yīng)用說(shuō)明》也明確規(guī)定了檢測(cè)人員應(yīng)掌握測(cè)量不確定度評(píng)估方法，并在標(biāo)準(zhǔn)、技術(shù)規(guī)范有要求時(shí)或客戶有需求時(shí)正確運(yùn)用，有能力對(duì)定量微生物檢測(cè)方法進(jìn)行不確定度評(píng)估。

近三年國(guó)內(nèi)實(shí)驗(yàn)室對(duì)食品微生物測(cè)量不確定度的研究文獻(xiàn)明顯增加，在菌落總數(shù)、大腸菌群、霉菌、金黃色葡萄球菌等檢驗(yàn)項(xiàng)目[4-10]均有關(guān)于不確定度的論文發(fā)表，但這些文獻(xiàn)評(píng)定不確定度的方法各異，尚未形成統(tǒng)一意見(jiàn)。筆者承擔(dān)認(rèn)證認(rèn)可行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)RB/T151的修訂工作，參考ISO 19036：2019《Microbiology ofthe food chain — Estimation of measurement uncertainty forquantitative determinations》思路并進(jìn)行合理優(yōu)化，編制符合我國(guó)實(shí)際情況的食品微生物定量方法不確定度評(píng)估指南，有利于指導(dǎo)國(guó)內(nèi)實(shí)驗(yàn)室在同一原則下開(kāi)展食品微生物不確定度的評(píng)估工作。

1 標(biāo)準(zhǔn)修訂進(jìn)展

根據(jù)國(guó)家認(rèn)監(jiān)委國(guó)認(rèn)監(jiān)〔2022〕 3號(hào)文，RB/T 151《食品微生物定量檢測(cè)的測(cè)量不確定度評(píng)估指南》被列入認(rèn)證認(rèn)可行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)修訂計(jì)劃，由青島海關(guān)技術(shù)中心組織實(shí)施，目前已提交報(bào)批稿，即將發(fā)布實(shí)施。

2 標(biāo)準(zhǔn)修訂目的和意義

與化學(xué)和物理領(lǐng)域不同，微生物是活的生命體，在樣品中的分布不易均勻，檢測(cè)結(jié)果往往不具備重現(xiàn)性，因此微生物領(lǐng)域的不確定度評(píng)估一直是行業(yè)難點(diǎn)和痛點(diǎn)[11-15]?，F(xiàn)行標(biāo)準(zhǔn)RB/ T 151—2016《食品微生物定量檢測(cè)的測(cè)量不確定度評(píng)估指南》基于ISO 19036：20 06制定，采取的是“黑匣子”策略，通過(guò)計(jì)算最終結(jié)果的再現(xiàn)性標(biāo)準(zhǔn)偏差來(lái)評(píng)估測(cè)量不確定度，未明確區(qū)分食品基質(zhì)差異（即基質(zhì)不確定度）和微生物隨機(jī)分布差異（即分布不確定度）對(duì)結(jié)果產(chǎn)生的影響，未闡明基質(zhì)不確定度、分布不確定度與技術(shù)不確定度三者間的相互關(guān)系，在科學(xué)性、適用性上還有進(jìn)一步優(yōu)化的空間[16-17]。

修訂版RB/T 151是對(duì)最新國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行的國(guó)內(nèi)轉(zhuǎn)化，有利于統(tǒng)一國(guó)內(nèi)食品微生物測(cè)量不確定度的評(píng)估思路，對(duì)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的可靠性注釋、標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的定值和能力驗(yàn)證項(xiàng)目的評(píng)價(jià)具有重要指導(dǎo)意義，其他領(lǐng)域微生物定量檢測(cè)方法的不確定度評(píng)估也可參考本標(biāo)準(zhǔn)執(zhí)行。

3 主要技術(shù)內(nèi)容

3.1 關(guān)鍵技術(shù)因素的識(shí)別

現(xiàn)行食品微生物檢測(cè)國(guó)標(biāo)定量方法主要包括菌落計(jì)數(shù)法或最可能數(shù)法（Mo st P r ob a bleNu m b er，M PN），通過(guò)對(duì)實(shí)驗(yàn)步驟的分析，可以總結(jié)出可能影響這兩類方法的不確定度，并應(yīng)加以控制的關(guān)鍵技術(shù)因素包括：培養(yǎng)基和/或試劑的來(lái)源和類型、樣品稀釋、接種和培養(yǎng)過(guò)程、計(jì)數(shù)方法（人工計(jì)數(shù)或自動(dòng)計(jì)數(shù)）以及不同操作人員（操作團(tuán)隊(duì)）的變化等[18 -2 0 ]。當(dāng)以上關(guān)鍵技術(shù)因素發(fā)生重大變化時(shí)，通常需要重新評(píng)估測(cè)量不確定度。

從樣品堆中抽取實(shí)驗(yàn)室待測(cè)樣品產(chǎn)生的誤差可能對(duì)最終結(jié)果影響很大[21]，但它不屬于與測(cè)量本身相關(guān)的不確定度范疇，因此在新版RB/T 151中不予考慮。此外，本標(biāo)準(zhǔn)所評(píng)估的不確定度也不包括測(cè)量的系統(tǒng)誤差。

3.2 技術(shù)不確定度（utech）的評(píng)估

3.2.1 概述

技術(shù)不確定度是在食品微生物定量檢測(cè)過(guò)程中，由于操作技術(shù)的可變性而產(chǎn)生的不確定度，即實(shí)驗(yàn)人員在取樣、混勻、梯度稀釋、培養(yǎng)基的選擇以及整個(gè)培養(yǎng)過(guò)程中帶入的不確定度。技術(shù)不確定度被認(rèn)為是某一檢測(cè)方法的固有特征，例如，對(duì)GB 4789.2—2022《食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 食品微生物學(xué)檢驗(yàn) 菌落總數(shù)測(cè)定》開(kāi)展技術(shù)不確定度評(píng)估得到的結(jié)果，可用于該方法下所有食品基質(zhì)合成不確定度和擴(kuò)展不確定度的計(jì)算。

3.2.2 技術(shù)不確定度的評(píng)估方案

ISO 19036：2019中對(duì)于技術(shù)不確定度的評(píng)估提出了三種評(píng)估方案，按優(yōu)先級(jí)分別為基于實(shí)驗(yàn)室內(nèi)再現(xiàn)性標(biāo)準(zhǔn)偏差、實(shí)驗(yàn)室間方法確認(rèn)的再現(xiàn)性標(biāo)準(zhǔn)偏差和基于能力驗(yàn)證結(jié)果的再現(xiàn)性標(biāo)準(zhǔn)偏差進(jìn)行評(píng)估。考慮到我國(guó)大部分食品微生物實(shí)驗(yàn)室的實(shí)際工作情況，修訂版RB/T 151僅規(guī)定了基于實(shí)驗(yàn)室內(nèi)再現(xiàn)性標(biāo)準(zhǔn)偏差的技術(shù)不確定度評(píng)估方法，實(shí)驗(yàn)流程見(jiàn)圖1，其中方案（1）適用于基質(zhì)均勻性較好的樣品（如果汁、牛奶、可可奶、奶粉等），方案（2）適用于基質(zhì)均勻性欠佳的樣品（如肉塊、魚肉、奶酪、面點(diǎn)、酸奶等）。

選定待評(píng)估的檢驗(yàn)方法，從至少10個(gè)實(shí)驗(yàn)室樣品中分別取2個(gè)測(cè)試部分，在盡可能不同的條件下（如：不同人員、不同品牌培養(yǎng)基、不同培養(yǎng)設(shè)備、不同培養(yǎng)時(shí)間等）進(jìn)行檢驗(yàn)，每個(gè)實(shí)驗(yàn)室樣品至少得到2個(gè)可接受的結(jié)果A、B，再將所有結(jié)果進(jìn)行常用對(duì)數(shù)轉(zhuǎn)換后按照公式（1）計(jì)算實(shí)驗(yàn)室內(nèi)再現(xiàn)性標(biāo)準(zhǔn)偏差，即得到該方法的技術(shù)不確定度。

式中：

SIR——實(shí)驗(yàn)室內(nèi)再現(xiàn)性標(biāo)準(zhǔn)偏差；

n —— 實(shí)驗(yàn)室樣品的數(shù)量；

i ——樣品序號(hào)，i =1～n （n≥10）；

y i A——在條件A下得出的數(shù)值，單位為lo g10（CFU/g、CFU/mL、MPN/g或MPN/mL）；

y i B——在條件B下得出的數(shù)值，單位為lo g10（CFU/g、CFU/mL、MPN/g或MPN/mL）。

3.3 基質(zhì)不確定度（umatrix）的評(píng)估

3.3.1 概述

基質(zhì)不確定度的產(chǎn)生是由于微生物在食品基質(zhì)中的分布存在不均勻性和隨機(jī)性，導(dǎo)致同一實(shí)驗(yàn)室樣品按標(biāo)準(zhǔn)方法取樣時(shí)檢驗(yàn)結(jié)果之間存在差異，反映了單個(gè)測(cè)試部分不能代表整個(gè)實(shí)驗(yàn)室樣品的微生物污染程度。

依據(jù)食品基質(zhì)的物理性狀，可分為四類，第一類為均勻性良好的基質(zhì)（如非粘性液體和粉末），其不確定度較小；第二類至第四類為均勻性不佳的基質(zhì)（如顆粒狀或塊狀固體），其不確定度較大[2 2 -2 3]。在實(shí)驗(yàn)室資源受控的情況下，基質(zhì)不確定度不受檢測(cè)方法的影響，同一種基質(zhì)的不確定度評(píng)估適用于該基質(zhì)的所有定量檢測(cè)?；|(zhì)不確定度的評(píng)估有三種方式，實(shí)驗(yàn)室可根據(jù)樣品基質(zhì)的實(shí)際情況選擇。

3.3.2 均勻性良好的實(shí)驗(yàn)室樣品的基質(zhì)不確定度評(píng)估

均勻性良好的實(shí)驗(yàn)室樣品具有相對(duì)低的基質(zhì)不確定度，在稱取或吸取測(cè)試部分后充分均質(zhì)，基質(zhì)不確定度可以使用定值，即為umatrix = 0.1 log10（CFU/g、CFU/mL、MPN/g或MPN/mL）。實(shí)驗(yàn)室采用圖1方案（2）時(shí)評(píng)估測(cè)量不確定度時(shí)，可直接使用該定值。

3.3.3 基于重復(fù)性標(biāo)準(zhǔn)偏差的基質(zhì)不確定度評(píng)估

對(duì)于均勻性不佳的實(shí)驗(yàn)室樣品，可以在重復(fù)性條件下對(duì)單個(gè)實(shí)驗(yàn)室樣品中多個(gè)測(cè)試部分進(jìn)行分析，通過(guò)計(jì)算重復(fù)性標(biāo)準(zhǔn)偏差來(lái)得到基質(zhì)不確定度，實(shí)驗(yàn)方案見(jiàn)圖2。

在本方案中，需要保證從每個(gè)實(shí)驗(yàn)室樣品中所稱取或吸取測(cè)試部分總數(shù)比實(shí)驗(yàn)室樣品總數(shù)至少多10個(gè)，即對(duì)于同一個(gè)實(shí)驗(yàn)室樣品至少取11個(gè)測(cè)試部分；如果測(cè)試部分來(lái)自多個(gè)同類實(shí)驗(yàn)室樣品，如實(shí)驗(yàn)室樣品數(shù)為10個(gè)，則每個(gè)樣品至少取2個(gè)測(cè)試部分。將得到的可接受結(jié)果（見(jiàn)3.2.3.3）進(jìn)行常用對(duì)數(shù)轉(zhuǎn)換后，選擇合適的方法評(píng)估基質(zhì)不確定度：由單個(gè)實(shí)驗(yàn)室樣品得到的數(shù)據(jù)，按照公式（2）和公式（3）計(jì)算重復(fù)性標(biāo)準(zhǔn)偏差得到基質(zhì)不確定度；由多個(gè)實(shí)驗(yàn)室樣品得到的數(shù)據(jù)，標(biāo)準(zhǔn)偏差是組內(nèi)均方差的平方根時(shí)，可使用Excel軟件計(jì)算單因素方差分析（ANOVA）快速得到基質(zhì)不確定度。

式中：

Sr——重復(fù)性標(biāo)準(zhǔn)偏差；

i ——實(shí)驗(yàn)室樣品編號(hào)（i =1，2，……，n）；

j ——從實(shí)驗(yàn)室樣品i中取的測(cè)試部分的份數(shù)（j =1，2，……，pi）；

xij ——樣品i的測(cè)試部分j的結(jié)果，單位是CFU/g、CFU/mL、MPN/g或MPN/mL；

y ij ——x ij 的常用對(duì)數(shù)，即y ij =log10x ij ，單位是CFU/g、CFU/mL、MPN/g或MPN/mL。

3.3.4 基質(zhì)特征已知時(shí)的基質(zhì)不確定度評(píng)估

實(shí)驗(yàn)室可以根據(jù)之前對(duì)某種基質(zhì)評(píng)估得到的基質(zhì)不確定度，作為相似基質(zhì)不確定度的近似值。評(píng)價(jià)基質(zhì)之間是否相似，可參考S N / T32 6 6—2 012《食品微生物檢驗(yàn)方法確認(rèn)技術(shù)規(guī)范》的附錄A。

實(shí)驗(yàn)室也可引用來(lái)源于其他權(quán)威實(shí)驗(yàn)室測(cè)得的基質(zhì)不確定度。歐盟提供了來(lái)自參考實(shí)驗(yàn)室的基質(zhì)不確定度數(shù)據(jù)庫(kù)[24]，方便使用者查詢。

3.4 分布不確定度（udistrib）的評(píng)估

3.4.1 概述

即使是均勻性好的樣品，由于微生物分布的隨機(jī)性，也會(huì)存在分布不確定度。分布不確定度類型取決于所使用的檢測(cè)方法的技術(shù)特性：

（1）對(duì)于平板計(jì)數(shù)法，為泊松不確定度或/和確證不確定度。

（2）對(duì)于最可能數(shù)法，為MPN不確定度。

3.4.2 平板計(jì)數(shù)法—泊松不確定度（uPoisson）的評(píng)估

分布不確定度取決于計(jì)算結(jié)果時(shí)所使用的菌落總數(shù)ΣC ，對(duì)于某一結(jié)果的泊松不確定度，可使用公式（4）計(jì)算得出：

3.4.3 平板計(jì)數(shù)法—確證不確定度（uconf）的評(píng)估

部分平板計(jì)數(shù)法（如大腸菌群、金黃色葡萄球菌等）需要對(duì)疑似菌落進(jìn)行確證，并根據(jù)確證結(jié)果對(duì)目標(biāo)菌落總數(shù)進(jìn)行修正，此時(shí)需要使用二項(xiàng)分布來(lái)計(jì)算某一特定結(jié)果的分布不確定度。假設(shè)對(duì)np個(gè)疑似菌落進(jìn)行了確證試驗(yàn)，nc個(gè)菌落被確證為目標(biāo)菌，確證不確定度可使用表1中的數(shù)值，或通過(guò)公式（5）計(jì)算得出。

3.4.4 最可能數(shù)法—MPN不確定度（uMPN）的評(píng)估

MPN不確定度以log10MPN的標(biāo)準(zhǔn)偏差表示，其數(shù)值僅與總管數(shù)和陽(yáng)性管數(shù)相關(guān)，與所選擇的樣品稀釋梯度無(wú)關(guān)。由于MPN標(biāo)準(zhǔn)偏差的計(jì)算公式過(guò)于復(fù)雜[25]，沒(méi)有統(tǒng)計(jì)學(xué)背景的實(shí)驗(yàn)室難以應(yīng)用，因此修訂版RB/T 151制作了相應(yīng)的9管法和15管法的MPN不確定度檢索表供查詢。我國(guó)常用標(biāo)準(zhǔn)大部分為9管法，表2是9管法的最可能數(shù)（MPN）不確定度檢索表。

3.5 合成不確定度（uc （y））和擴(kuò)展不確定度（U）的評(píng)估

3.5.1 合成不確定度的評(píng)估

計(jì)算合成標(biāo)準(zhǔn)不確定度時(shí)，先計(jì)算技術(shù)不確定度的平方、基質(zhì)不確定度的平方以及相關(guān)分布不確定度的平方，將這些平方相加后開(kāi)平方得到對(duì)應(yīng)的合成標(biāo)準(zhǔn)不確定度，計(jì)算方法見(jiàn)公式（7）：

需要注意的是，不是所有的分布不確定度分量都納入合成不確定度的計(jì)算，根據(jù)方法的特性選擇涉及的一種或兩種分布不確定度即可。當(dāng)某個(gè)分量的不確定度小于最大不確定度分量五分之一時(shí)，該分量的影響可忽略，不列入合成標(biāo)準(zhǔn)不確定度的計(jì)算，而最大不確定度分量通常為技術(shù)不確定度。

如果有實(shí)驗(yàn)室規(guī)定和客戶要求，可僅使用實(shí)驗(yàn)室內(nèi)再現(xiàn)性標(biāo)準(zhǔn)偏差（即技術(shù)不確定度）計(jì)算合成標(biāo)準(zhǔn)不確定度，計(jì)算方法見(jiàn)公式（8）：

uc（y）=SIR=utech（8）

3.5.2 擴(kuò)展不確定度的評(píng)估

通過(guò)合成標(biāo)準(zhǔn)不確定度和選定的包含因子（k）來(lái)計(jì)算擴(kuò)展不確定度。k 值等于2（相當(dāng)于95 %的置信水平）時(shí)，擴(kuò)展不確定度的計(jì)算見(jiàn)公式（9）：

U=2×uc（y）（9）

3.6 結(jié)果的表示方法

測(cè)量不確定度可以按以下兩種方式報(bào)告：

（1）技術(shù)不確定度、基質(zhì)不確定度以及相關(guān)的分布不確定度進(jìn)行綜合評(píng)估；

（2）根據(jù)實(shí)驗(yàn)室規(guī)定以及客戶要求，可僅使用技術(shù)不確定度代替合成標(biāo)準(zhǔn)不確定度報(bào)告結(jié)果。

當(dāng)檢測(cè)報(bào)告中需要體現(xiàn)測(cè)量不確定度時(shí)，需明確地表述測(cè)量不確定度是擴(kuò)展不確定度，同時(shí)還需包括置信水平以及測(cè)量不確定度按本標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行評(píng)估的聲明，如果僅基于技術(shù)不確定度，則檢測(cè)報(bào)告中要對(duì)此進(jìn)行額外的聲明。

測(cè)量不確定度的單位應(yīng)與檢測(cè)結(jié)果的單位一致，報(bào)告時(shí)保留兩位有效數(shù)字。修約在最后進(jìn)行，以避免修約誤差累計(jì)造成的影響。在報(bào)告中擴(kuò)展不確定度與檢測(cè)結(jié)果一起體現(xiàn)，以log10對(duì)數(shù)值或自然值表示如下：

（1）log10結(jié)果±U：y±U log10（CFU/g、CFU/mL、MPN/g或MPN/mL）；

（2）log10結(jié)果加限值：y log10（CFU/g、CFU/mL、MPN/g或MPN/mL）[y-U；y+U ]；

（3）自然值加限值：x（CFU/g、CFU/mL、MPN/g或MPN/mL）[10y -U；10y +U]。

4 修訂版RB/T 151與RB/T 151—2016和ISO 19036-2019的差異比較

4.1 修訂版 RB/T 151與RB/T 151—2016間的主要差異

修訂版 RB/T 151與RB/T 151—2016間的主要技術(shù)差異在于修改了測(cè)量不確定度的評(píng)估思路。

RB/T 151—2016基于整體法，將實(shí)驗(yàn)過(guò)程中所有不確定度來(lái)源視為一個(gè)“黑匣子”，通過(guò)最終結(jié)果的再現(xiàn)性標(biāo)準(zhǔn)偏差來(lái)評(píng)估測(cè)量不確定度。這種方法看似簡(jiǎn)單，實(shí)際上未闡明方法之間、基質(zhì)之間的關(guān)聯(lián)性，使用同類方法檢測(cè)不同基質(zhì)所得到的測(cè)量不確定度差異非常大[26-28]，實(shí)驗(yàn)室需要開(kāi)展多次評(píng)估才能體現(xiàn)這些差異，這無(wú)疑增加了實(shí)驗(yàn)室的工作量。

修訂版 RB/T 151是對(duì)舊版標(biāo)準(zhǔn)的部分延承和優(yōu)化，采取“自上而下”的評(píng)估思路，使用“整體法”評(píng)估技術(shù)不確定度，將基質(zhì)不確定度單列，并充分考慮因微生物隨機(jī)分布差異造成的分布不確定度。同時(shí)，新標(biāo)準(zhǔn)明確了技術(shù)不確定度是某一方法的固有屬性，同類方法的技術(shù)不確定度相同；明確了基質(zhì)不確定度不受檢測(cè)方法的影響，相同基質(zhì)的不確定度值適用于該基質(zhì)針對(duì)目標(biāo)微生物的所有定量檢測(cè)，減少了大量重復(fù)工作；而分布不確定度通過(guò)簡(jiǎn)單計(jì)算或查詢檢索表得出。將三個(gè)分量“模塊化”，并規(guī)定可重復(fù)利用歷史數(shù)據(jù)，實(shí)驗(yàn)室根據(jù)實(shí)際需求，補(bǔ)充少量實(shí)驗(yàn)即可得到相應(yīng)數(shù)值，結(jié)合四個(gè)不同場(chǎng)景下的計(jì)算示例，實(shí)驗(yàn)室可快速上手評(píng)估測(cè)量不確定度。

4.2 修訂版 RB/T 151與ISO 19036-2019間的主要差異

修訂版 RB/T 151參考ISO 19036—2019測(cè)量不確定度的評(píng)估思路，對(duì)ISO 19036—2019內(nèi)容進(jìn)行了簡(jiǎn)化和優(yōu)化，具體差異體現(xiàn)在以下四個(gè)方面：第一，針對(duì)國(guó)內(nèi)大部分實(shí)驗(yàn)室實(shí)際工作情況，刪除了基于實(shí)驗(yàn)室間方法確認(rèn)結(jié)果再現(xiàn)性和實(shí)驗(yàn)室間能力驗(yàn)證結(jié)果再現(xiàn)性的技術(shù)不確定度評(píng)估方案；第二，為了使不確定度評(píng)估方案更能被基層實(shí)驗(yàn)室和企業(yè)實(shí)驗(yàn)室理解應(yīng)用，刪除了對(duì)非預(yù)期不確定度分量的修正步驟；第三，出于實(shí)用性的考慮，刪除了菌落計(jì)數(shù)為0、確證陽(yáng)性菌落數(shù)為0以及MPN法陽(yáng)性管數(shù)為0時(shí)不確定度的評(píng)估和表示；最后，按照國(guó)內(nèi)標(biāo)準(zhǔn)操作技術(shù)要求增加了計(jì)算的示例表格，增加了歐盟參考實(shí)驗(yàn)室測(cè)得的基質(zhì)不確定度參考數(shù)據(jù)表、9管法和15管法MPN不確定度數(shù)值檢索表，便于實(shí)驗(yàn)室快速查詢數(shù)據(jù)。

5 結(jié) 論

修訂版 RB/T 151設(shè)計(jì)的測(cè)量不確定度評(píng)估方案充分梳理了ISO 19036—2019的實(shí)驗(yàn)思路，結(jié)合國(guó)內(nèi)實(shí)驗(yàn)室的工作現(xiàn)狀和實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)提出優(yōu)化方案，將技術(shù)不確定度、基質(zhì)不確定度和分布不確定度視為三個(gè)分量獨(dú)立評(píng)估，允許在實(shí)驗(yàn)條件未發(fā)生重大改變的前提下，使用歷史數(shù)據(jù)“合成”得到測(cè)量不確定度，將極大減輕實(shí)驗(yàn)室的工作量。在編寫修訂版RB/T 151時(shí)，增加了表格示例、計(jì)算示例以及便捷的數(shù)據(jù)檢索表，使食品中微生物定量檢測(cè)的測(cè)量不確定度評(píng)估思路更加清晰。根據(jù)實(shí)驗(yàn)原理，其他領(lǐng)域（如：環(huán)境微生物、醫(yī)學(xué)微生物）的測(cè)量不確定度評(píng)估也可參照本方案執(zhí)行[29-30]，這也拓展了修訂版RB/T 151的應(yīng)用面，標(biāo)準(zhǔn)實(shí)施后將為國(guó)內(nèi)相關(guān)機(jī)構(gòu)開(kāi)展微生物測(cè)量不確定度評(píng)估工作提供范例和依據(jù)。

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作者簡(jiǎn)介

鐘文濤，博士，高級(jí)工程師，研究方向?yàn)槭称肺⑸餀z測(cè)和質(zhì)量控制。

雷質(zhì)文，通信作者，碩士，研究員，研究方向?yàn)槭称肺⑸餀z測(cè)和質(zhì)量控制。

（責(zé)任編輯：張佩玉）

基金項(xiàng)目：本文受湖南省市場(chǎng)監(jiān)督管理局科技計(jì)劃項(xiàng)目“新疆葡萄干制品中霉菌污染狀況調(diào)查與風(fēng)險(xiǎn)分析”（項(xiàng)目編號(hào)：2024KJJH05）、國(guó)家認(rèn)監(jiān)委認(rèn)證認(rèn)可行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)制修訂計(jì)劃項(xiàng)目“食品微生物定量檢測(cè)的測(cè)量不確定度評(píng)估指南”（項(xiàng)目編號(hào)：2022RB027）資助。