[摘要]目的了解懷化市2020—2022年新生兒地中海貧血基因分型。方法對(duì)2020年1月至2022年12月懷化市進(jìn)行地中海貧血篩查的46931名新生兒進(jìn)行回顧性分析。結(jié)果初篩陽(yáng)性4443例，召回2153例，地中海貧血基因確診1536例?；虼_診α地中海貧血1077例（70.12%），β地中海貧血431例（28.06%），中間型α地中海貧血4例；臨床表型以靜止型α地中海貧血、輕型α地中海貧血和輕型β地中海貧血為主。結(jié)論懷化市新生兒地中海貧血以α地中海貧血為主，其中又以靜止型、輕型多見(jiàn)。懷化市新生兒地中海貧血基因攜帶率高于全國(guó)平均水平，地區(qū)分布不均，地中海貧血防治工作形勢(shì)較嚴(yán)峻。

[關(guān)鍵詞]地中海貧血；篩查；基因；新生兒

[中圖分類(lèi)號(hào)]R725.5[文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼]A[DOI]10.3969/j.issn.1673-9701.2024.18.015

GeneticcharacteristicsofnewbornthalassemiainHuaihua

GUZhenxiang，F(xiàn)ENGZonghui，XIAOGang

DepartmentofMedicalGenetics，HuaihuaMaternalandChildHealthHospital，Huaihua418000，Hunan，China

[Abstract]ObjectiveTounderstandthegenotypesofneonatalthalassemiainHuaihua Cityfrom2020to2022.MethodsAretrospectiveanalysiswasperformedon46931newbornsscreenedforthalassemiafromJanuary2020toDecember2022inHuaihuaCity.Results4443caseswerepositiveinpreliminaryscreening，2153caseswererecalled，and1536caseswereconfirmedwiththalassemiagene.Therewere1077cases（70.12%）ofα-thalassemiadiagnosedbygene.431（28.06%）casesofβ-thalassemia;Intermediateα-thalassemia（4cases）;Theclinicalphenotypesweremainlystaticα-thalassemia，mildα-thalassemiaandmildβ-thalassemia.ConclusionTheneonatalthalassemiinhuaihuacityismainlyα-thalassemia，andtheresttypeandmildtypearemorecommon.ThegenecarryingrateofnewbornthalassemiainHuaihuaCityishigherthanthenationalaveragelevel，theregionaldistributionisuneven，andthesituationofthalassemiapreventionandcontrolisserious.

[Keywords]Thalassemia;Screening;Gene;Newborn

地中海貧血又稱(chēng)海洋性貧血，是最常見(jiàn)的單基因遺傳病，主要由珠蛋白基因的缺陷使一種或幾種珠蛋白肽鏈合成不足或不能合成，導(dǎo)致血紅蛋白（hemoglobin，Hb）的組成成分改變，紅細(xì)胞穩(wěn)定性變差、壽命縮短，出現(xiàn)不同程度的貧血[1]。地中海貧血是中國(guó)南方地區(qū)常見(jiàn)的遺傳性血液病，具有明顯的人群和地區(qū)分布差異，主要包括α地中海貧血和β地中海貧血[2]。地中海貧血目前無(wú)確切有效的治療方法，干細(xì)胞移植需花費(fèi)巨大的人力、財(cái)力，基因治療目前處于臨床研究階段。出生前積極干預(yù)可降低重型地中海貧血的發(fā)生；對(duì)新生兒進(jìn)行地中海貧血篩查并定期進(jìn)行追蹤和發(fā)育評(píng)估，可提高地中海貧血患兒智力和生長(zhǎng)發(fā)育水平，此外還可指導(dǎo)婚配。懷化市地處湖南省西南部，與地中海貧血高發(fā)地區(qū)廣西壯族自治區(qū)接壤，且為多民族聚居區(qū)，地中海貧血發(fā)生率位居湖南省前列。本研究對(duì)懷化市婦幼保健院新生兒疾病篩查中心2020—2022年新生兒地中海貧血篩查情況進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，以了解懷化市新生兒地中海貧血基因分布特征及臨床表型。

1資料與方法

1.1研究對(duì)象

對(duì)懷化市婦幼保健院新生兒疾病篩查中心2020—2022年新生兒地中海貧血篩查情況進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。在新生兒家屬知情同意下，對(duì)新生兒足底末梢血標(biāo)本采用毛細(xì)管電泳法進(jìn)行初篩檢測(cè)。召回初篩陽(yáng)性新生兒，家屬知情同意下，采集血斑或靜脈血進(jìn)行基因確診。本研究經(jīng)懷化市婦幼保健院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)審批通過(guò)（倫理審批號(hào)：202323）。

1.2標(biāo)本的采集和保存

初篩標(biāo)本采集時(shí)間為新生兒出生后48～72h。采集足底末梢血，血斑直徑>8mm，無(wú)污染、無(wú)滲透環(huán)，室溫下自然晾干制成干血片密閉保存在2～8℃冰箱中。初篩陽(yáng)性者召回進(jìn)行基因檢測(cè)，同樣以血斑或抽靜脈血2ml置于乙二胺四乙酸（ethylenediaminetetraaceticacid，EDTA）抗凝管中，2～8℃冰箱中保存。

1.3主要實(shí)驗(yàn)儀器及試劑

CAPILAYS2全自動(dòng)毛細(xì)管電泳儀購(gòu)自法國(guó)Sebia公司；緩沖液、溶血素、沖洗液、正常HbA2質(zhì)控品等購(gòu)自法國(guó)Sebia公司；聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（polymerasechainreaction，PCR）擴(kuò)增儀購(gòu)自賽默飛世爾科技公司；α地中海貧血和β地中海貧血基因檢測(cè)試劑盒購(gòu)自深圳亞能生物技術(shù)有限公司；DNA快速提取試劑盒購(gòu)自西安天隆科技有限公司。

1.4篩查結(jié)果判讀

α地中海貧血陽(yáng)性：Hb電泳中出現(xiàn)HbBarts帶。β地中海貧血陽(yáng)性：依據(jù)HbA值結(jié)合HbA2/HbA比值的綜合分析法進(jìn)行判讀[當(dāng)8.0＜HbA≤9.5時(shí)，HbA2>0（早產(chǎn)兒：當(dāng)7.3＜HbA≤9.5時(shí)，HbA2>0）；當(dāng)9.5＜HbA≤11.5時(shí)，HbA2/HbA≥0.008；當(dāng)11.5＜HbA≤15.0時(shí)，HbA2/HbA≥0.015；當(dāng)15.0＜HbA≤20.0時(shí)，HbA2/HbA≥0.02；當(dāng)HbA>20時(shí)，HbA2/HbA≥0.025]。

1.5基因診斷

采用DNA快速提取試劑盒提取血斑或全血DNA，在PCR擴(kuò)增儀上擴(kuò)增。缺失型α地中海貧血基因用單管多重跨越斷裂點(diǎn)聚合酶鏈擴(kuò)增技術(shù)法檢測(cè)（--SEA，- α3.7，- α4.2），采用聚合酶鏈擴(kuò)增-反向斑點(diǎn)雜交技術(shù)檢測(cè)非缺失型α地中海貧血基因（ αCSα， αQSα， αWSα）和β地中海貧血基因（CD17、CD31、CD43、CD41-42、CD27-28、CD14-15、CD71-72、IVS-Ⅱ-654、IVS-Ⅰ-1、IVS-Ⅰ-5、-28、-29、-30、-32、Int、βE、CAP）。

2結(jié)果

2.1一般資料

懷化市2020—2022年新生兒活產(chǎn)99864人，地中海貧血篩查46931人，篩查率46.99%；篩查陽(yáng)性4443人，篩查陽(yáng)性率9.47%；召回2153人，基因確診1536人，確診陽(yáng)性率3.27%；確診α地中海貧血1077例（占70.12%），β地中海貧血431例（占28.06%），α合并β地中海貧血28例（占1.82%），見(jiàn)表1。

2.2α地中海貧血臨床表型及基因型

確診α地中海貧血1077例，包括基因突變攜帶者1073例（占99.63%），HbH病4例（占0.37%），分布在通道侗族自治縣2例，麻陽(yáng)苗族自治縣和靖州苗族侗族自治縣各1例；基因突變攜帶者包括靜止型α地中海貧血686例（63.69%），輕型α地中海貧血385例（35.75%），其他型α地中海貧血2例（0.19%）。共檢出14種α地中海貧血基因型，主要是-α3.7/αα（44.75%）、-- SEA/αα（35.00%）、- α4.2/αα（11.14%），見(jiàn)表2。

2.3β地中海貧血臨床表型及基因型

確診β地中海貧血431例，占28.06%，均為地中海貧血基因突變攜帶者，臨床表型為輕型。檢出10種β地中海貧血基因型，主要為CD41-42/βN（47.80%）、CD17/βN（25.06%）、IVS-Ⅱ-654/βN（12.30%），見(jiàn)表3。

2.4α合并β地中海貧血臨床表型及基因型

確診α合并β地中海貧血患兒28例，臨床表型均為輕型地中海貧血。共檢出10種基因型，主要為- α3.7/αα合并CD41-42/βN（28.57%），-- SEA/αα合并CD41-42/βN（25%），- α3.7/αα合并CD17/βN（14.29%），-- SEA/αα合并CD17/βN（10.71%），見(jiàn)表4。

3討論

地中海貧血在我國(guó)主要以廣西壯族自治區(qū)、廣東省及海南省高發(fā)，北方地區(qū)少見(jiàn)。懷化市在湖南省屬相對(duì)高發(fā)地區(qū)，3年新生兒地中海貧血基因確診異常1536例，因只召回2153例，相較于4443例篩查陽(yáng)性數(shù)，理論基因確診陽(yáng)性率約6.75%。2020—2021年湖南省出生缺陷協(xié)同防治重大科技項(xiàng)目地中海貧血專(zhuān)項(xiàng)調(diào)查顯示懷化市地中海貧血基因攜帶率約為7.22%，與新生兒地中海貧血基因攜帶率大致相符[3]。通過(guò)制定出臺(tái)地中海貧血防控實(shí)施方案，開(kāi)展孕產(chǎn)婦及新生兒地中海貧血篩查，將防控關(guān)口前移。

懷化市確診的新生兒地中海貧血以α地中海貧血（70.12%）為主，檢出α地中海貧血基因型14種，主要為-α3.7/αα（44.75%）、--SEA/αα（35.00%），與以往國(guó)內(nèi)多數(shù)報(bào)道相似[4-7]。其次為β地中海貧血（28.06%），檢出β地中海貧血基因型10種，主要為CD41-42/βN（47.80%）、CD17/βN（25.06%）；廣西壯族自治區(qū)報(bào)道以CD41和CD42為主[5]；云南省以CD17為主[8]；福建省以IVS-Ⅱ-654為主[9]。α合并β地中海貧血（1.82%）主要以-α3.7/αα合并CD41-42/βN（占28.57%）、--SEA/αα合并CD41-42/βN（25.00%）為主。另確診中間型地中海貧血（HbH?。?例（0.26%），4例HbH病患者至2022年11月生長(zhǎng)發(fā)育尚可，Hb維持在60～100g/L，尚未進(jìn)行輸血治療。通過(guò)定期隨訪，指導(dǎo)家長(zhǎng)做好患兒Hb及生長(zhǎng)發(fā)育相關(guān)指標(biāo)監(jiān)測(cè)。根據(jù)需要開(kāi)展輸血和除鐵治療，積極提升患兒的生存質(zhì)量。新生兒地中海貧血篩查對(duì)中間型地中海貧血可做到早篩查、早診斷、早治療，以便讓患兒的生活質(zhì)量得到進(jìn)一步提高[10-11]。

本研究未發(fā)現(xiàn)重型地中海貧血新生兒，防控成效的取得可能與加強(qiáng)婚檢、孕檢進(jìn)行地中海貧血篩查，同型地中海貧血夫婦的產(chǎn)前診斷等防控措施有關(guān)。

本研究通過(guò)分析掌握懷化市地中海貧血的發(fā)生率、基因型，對(duì)制定出臺(tái)相關(guān)防控方案具有指導(dǎo)作用。懷化市作為地中海貧血相對(duì)高發(fā)地區(qū)，做好新生兒地中海貧血篩查、建立地中海貧血防控長(zhǎng)效機(jī)制、落實(shí)三級(jí)預(yù)防措施非常必要。通過(guò)宣傳和普及地中海貧血防控知識(shí)、健全以新生兒家庭為主要對(duì)象的健康教育網(wǎng)絡(luò)、強(qiáng)化重點(diǎn)地區(qū)的經(jīng)費(fèi)保障、強(qiáng)化篩查質(zhì)量，對(duì)降低重型地中海貧血患兒出生率、提升中間型地中海貧血患兒生活質(zhì)量、提高人口素質(zhì)具有重要意義。

利益沖突：所有作者均聲明不存在利益沖突。

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（收稿日期：2023–11–26）

（修回日期：2024–06–18）