曾玉祥 沈海軍 曹仲文
摘要:針對地方特色美食揚州鹽水鵝易腐性高、不耐保藏的現(xiàn)狀,研究復(fù)合生物保鮮劑對氣調(diào)包裝鹽水鵝制品品質(zhì)的影響。在4 ℃的條件下對N2氣調(diào)包裝鹽水鵝做破壞性試驗,分離鑒定其殘存的微生物菌群,檢測出的代表性菌株有熒光假單胞菌、產(chǎn)氣腸桿菌、消化乳桿菌、熱殺索絲菌和腐生葡萄球菌。以Nisin(乳酸鏈球菌素)、殼聚糖(chitosan)、丁香提取物(clove extract)3種生物保鮮劑為指標(biāo)進行單因素抑菌試驗,根據(jù)單因素試驗結(jié)果,對3種保鮮劑進行復(fù)配試驗,經(jīng)Box-Behnken design(BBD)與響應(yīng)面優(yōu)化,測其TVB-N值。結(jié)果表明,最優(yōu)復(fù)合保鮮劑組合為Nisin 0.03%+殼聚糖0.42%+丁香提取物2.40%,曲面極值點TVB-N最小值為12.47 mg/100 g。該試驗為氣調(diào)包裝鹽水鵝制品保鮮技術(shù)的應(yīng)用研究提供了理論基礎(chǔ)。
關(guān)鍵詞:鹽水鵝;氣調(diào)包裝;腐敗菌;復(fù)合保鮮劑
中圖分類號:TS206.1 ?????文獻標(biāo)志碼:A ????文章編號:1000-9973(2024)04-0186-06
Stndy on the Effect of Biological Preservatives on the Quality of
Modified Atmosphere Packaged Salted Goose Products
ZENG Yu-xiang1, SHEN Hai-jun1,2, CAO Zhong-wen2,3*
(1.School Point of Yangzhou Tourism and Business School, Jiangsu Union Technical Institute,
Yangzhou 225001, China; 2.Key Laboratory of Chinese Cuisine Intangible Cultural Heritage
Technology Inheritance, Ministry of Culture and Tourism, Yangzhou 225127, China;
3.School of Tourism and Cuisine, Yangzhou University, Yangzhou 225127, China)
Abstract: In response to the high perishability and poor storage resistance of Yangzhou salted goose, a local specialty food, the effect of composite biological preservatives on the quality of modified atmosphere packaged salted goose products is studied. Destructive test is conducted on N2 modified atmosphere packaged salted goose under 4 ℃ conditions, and residual microbial groups are isolated and identified. The representative strains are Pseudomonas fluorescens, Enterobacter aerogenes, Lactobacillus alimentarius, Brochothrix thermosphacta and Staphylococcus sarophyticus. With three preservatives, namely Nisin, chitosan and clove extract, as the indexes, single factor antibacterial test is carried out. Based on the single factor test results, composite test is conducted on the three preservatives, and through Box-Behnken design (BBD) and response surface optimization, TVB-N values are measured. The results show that the optimal composite preservative combination is Nisin 0.03%+chitosan 0.42%+clove extract 2.40%, and the minimum TVB-N value of the surface extreme point is 12.47 mg/100 g. This test has provided a theoretical basis for the application and study of preservation techniques for modified atmosphere packaged salted goose products.
Key words: salted goose; modified atmosphere packaging; spoilage bacteria; composite preservatives
收稿日期:2023-11-26
基金項目:教育部人文社會科學(xué)研究一般項目(17YJAZH006);四川省高等學(xué)校重點實驗室開放基金項目(PRKX201911)
作者簡介:曾玉祥(1972—),男,高級講師,碩士,研究方向:食品開發(fā)、烹飪工藝標(biāo)準(zhǔn)化。
*通信作者:曹仲文(1973—),男,副教授,博士,研究方向:輕工技術(shù)與工程及傳統(tǒng)烹飪產(chǎn)業(yè)化。
鹽水鵝是經(jīng)各種香料鹵制而成的鵝肉制品,屬江蘇揚州與周邊地區(qū)的傳統(tǒng)特色風(fēng)味食品。其肉質(zhì)細嫩、口味鮮美、肥而不膩、營養(yǎng)豐富,深受消費者喜愛[1—2]。但由于鹽水鵝具有較高的含水量和豐富的營養(yǎng)物質(zhì),為微生物的生長繁殖提供了有利的條件,在銷售和運輸過程中易受雜菌污染,導(dǎo)致其品質(zhì)降低,嚴(yán)重制約了其銷售范圍[3—4]。研究其相關(guān)的保鮮技術(shù)對延長鹽水鵝的貨架期、保證其食品安全、減少營養(yǎng)損失等具有重要意義[5]。目前揚州市面上鹽水鵝包裝制品大多為真空包裝,已有學(xué)者對真空包裝的鹽水鵝進行研究,發(fā)現(xiàn)其制品中仍有一定的殘存菌群。董洋等[4]利用傳統(tǒng)平板培養(yǎng)結(jié)合聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)-變性梯度凝膠電泳技術(shù)對其加工過程中微生物菌群的多樣性進行了分析,研究得出真空包裝的鹽水鵝產(chǎn)品中的腐敗菌主要為莓實假單胞菌和魏斯氏菌。周濤等[6]根據(jù)染色鏡檢、生理生化試驗研究得出導(dǎo)致鹽水鵝腐敗變質(zhì)的主要微生物為熒光假單胞菌和成團泛菌。王虎虎等[7]研究發(fā)現(xiàn)在4 ℃的條件下,鹽水鵝包裝品的優(yōu)勢腐敗菌為銅綠假單胞菌。相較于傳統(tǒng)的普通包裝,雖然真空包裝具有進一步阻止細菌滋生、延長保質(zhì)期的優(yōu)點[8],但是真空包裝的鹽水鵝制品的肉質(zhì)過于緊密,使其失去原本細膩的口感。氣調(diào)包裝(modified atmosphere packaging,MAP)制品具有可以改變菌相構(gòu)成、抑制優(yōu)勢腐敗菌繁殖的優(yōu)點[9],且經(jīng)過氣調(diào)包裝的制品口感與新鮮制品相近,因此氣調(diào)包裝逐漸被看好,但尚未見鹽水鵝菌相構(gòu)成及配套保鮮技術(shù)方面的研究。
生物保鮮劑是天然物質(zhì),通常來源于動物、植物或微生物的新陳代謝產(chǎn)物,具有天然、安全、無毒的優(yōu)點,通過浸泡、噴淋或涂抹等方式應(yīng)用于食品中,從而達到防腐保鮮的效果[10]。常用的保鮮劑有乳酸鏈球菌素(Nisin)、殼聚糖、曲酸、納他霉素、茶多酚、丁香提取物等。篩選出適合的保鮮劑及最佳配比有望實現(xiàn)延長鹽水鵝貨架期的目的。
為了探究不同生物保鮮劑對鹽水鵝氣調(diào)包裝制品品質(zhì)的影響,本文以揚州市售鹽水鵝為研究對象,在貯藏溫度為4 ℃的條件下,對其N2氣調(diào)包裝鹽水鵝樣品做破壞性試驗,采用選擇性培養(yǎng)基進行菌相分析,保藏5 d后,對培養(yǎng)物中的代表性菌株進行分離純化和16S rDNA測序鑒定,確定菌種。依據(jù)《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)?食品添加劑使用標(biāo)準(zhǔn)》,以Nisin、殼聚糖、丁香提取物3種生物保鮮劑為考察因素進行單因素試驗,經(jīng)BBD(Box-Behnken design)與響應(yīng)面優(yōu)化,得出最佳配比,以期為氣調(diào)包裝鹽水鵝制品的保鮮技術(shù)提供理論依據(jù)。
1 材料與方法
1.1 材料與儀器
光鵝(當(dāng)天宰殺,約1 200 g)、生姜、香蔥、花椒、食鹽、黃酒、胡椒粉、味精、香油、香葉等:購于揚州大潤發(fā)超市;25 cm×35 cm PA/PE復(fù)合光面透明包裝袋:揚州南方儀器設(shè)備化工有限公司;純凈水:杭州娃哈哈集團有限公司。菌株鑒定試劑:Ezup柱式細菌基因組DNA抽提試劑盒、SanPrep 柱式DNA膠回收試劑盒、Taq DNA聚合酶、PCR產(chǎn)物純化試劑盒、細菌DNA提取試劑盒:均購自生工生物工程(上海)股份有限公司。Nisin(食品級)、殼聚糖(食品級):上海藍季生物科技有限公司;丁香提取物(食品級):西安瑞迪生物科技有限公司。
2720 Thermal Cycler型PCR儀 美國應(yīng)用生物系統(tǒng)公司;HC-2518R型高速冷凍離心機 安徽中科中佳科學(xué)儀器有限公司;QYC-200型全溫培養(yǎng)搖床 上海新苗醫(yī)療器械制造有限公司;YX280B型手提式壓力蒸汽滅菌器 上海三申醫(yī)療器械有限公司;SW-CJ-1F型單人雙面凈化工作臺 蘇州凈化設(shè)備有限公司;DT-200型電子天平 常熟市雙杰測試儀器廠;HH-8型數(shù)顯恒溫水浴鍋 杭州同華電器有限公司;HSX-250型恒溫恒濕培養(yǎng)箱 上海?,攲嶒炘O(shè)備有限公司。
1.2 試驗方法
1.2.1 樣品的制備
鹽水鵝樣品的制備:鵝用冷水浸泡30 min去血水→加入生姜8 g、香蔥10 g,煮制30 min→洗凈→加入香葉、食鹽腌制4 h→加入蔥段10 g、姜片7 g、黃酒適量、胡椒粉適量和腌制好的鵝于碗中→上屜蒸50 min→冷卻后加入味精、香油于鹵汁中→成品。
氣調(diào)包裝鹽水鵝樣品的制備:充入100% N2,充氣時間15 s,加熱時間5 s,加熱溫度60 ℃,總壓力5 MPa,于15 ℃放置,做破壞性試驗,分離菌群。將鹽水鵝以25 g為基本單元,用復(fù)合保鮮劑浸泡5 min,瀝干10 min,作N2氣調(diào)包裝,置于4 ℃條件下,保藏5 d,序時檢測,對鹽水鵝進行菌落總數(shù)的序時測定,并對各類菌作分類計數(shù),統(tǒng)計占比(%)。
1.2.2 培養(yǎng)基的制備
營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基、MSA培養(yǎng)基、MRS培養(yǎng)基、STAA培養(yǎng)基、VRBGA培養(yǎng)基、Pseudomonades培養(yǎng)基,按文獻[11]進行配制。
1.2.3 代表性菌株的鑒定
對培養(yǎng)物中的代表性菌株進行分離提純和16S rDNA測序鑒定,確定菌名?;蚪MDNA提?。翰捎眉毦鶧NA提取試劑盒提取基因組DNA。目標(biāo)片段PCR擴增:參考賴宏剛[12]的方法提取基因組DNA、PCR循環(huán)條件、凝膠電泳、純化回收。系統(tǒng)發(fā)育樹構(gòu)建:將所測序列在NCBI網(wǎng)站(https://www.ncbi.nlm.nih.gov)中使用BLAST程序在GenBank數(shù)據(jù)庫進行同源性比較,獲得最相似典型菌的DNA序列,構(gòu)建系統(tǒng)發(fā)育樹。
1.2.4 TVB-N值的測定
TVB-N值的測定及樣品的處理參照GB 5009.228—2016《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品中揮發(fā)性鹽基氮的測定》[13]。每個樣品測試3次,取其平均值為最終結(jié)果。
1.2.5 保鮮劑單因素試驗
參照GB 2760—2014《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品添加劑使用標(biāo)準(zhǔn)》[14],在肉類樣品中殼聚糖的最大用量為6 g/kg,Nisin的最大用量為0.5 g/kg,由于天然香辛料提取物安全性較高,標(biāo)準(zhǔn)中未規(guī)定其最大用量,依據(jù)聶相珍[15]的研究結(jié)果,確定丁香提取物最大濃度為6%。將Nisin、殼聚糖、丁香提取物按表1設(shè)置不同濃度,做單因素試驗。
1.2.6 響應(yīng)面優(yōu)化試驗設(shè)計
根據(jù)單因素試驗結(jié)果,運用Design Expert 13進行響應(yīng)面試驗,對Nisin、殼聚糖和丁香提取物進行復(fù)配設(shè)計,將復(fù)合保鮮劑添加到鹽水鵝中,測定TVB-N值,通過回歸方程的構(gòu)建擬合因素與響應(yīng)值之間的函數(shù)關(guān)系,得到保鮮效果最佳的變量組合。
1.3 數(shù)據(jù)分析
運用Mega 7.0軟件進行系統(tǒng)發(fā)育樹的構(gòu)建,BLAST軟件對基因序列進行比對分析,SPSS 24.0軟件進行數(shù)據(jù)處理,Origin軟件進行繪圖,Design Expert 13軟件進行響應(yīng)面優(yōu)化試驗設(shè)計。
2 結(jié)果與分析
2.1 鹽水鵝N2氣調(diào)包裝制品的菌相構(gòu)成
經(jīng)N2氣調(diào)包裝的鹽水鵝在4 ℃下保藏5 d后,從選擇性培養(yǎng)基上挑取典型生長菌落,在其相應(yīng)的平板上劃線分離,分離純化2~3次,得到純化的單菌落[16],通過觀察其菌落形態(tài)、生理生化試驗和16S rDNA鑒定,其菌相構(gòu)成見表2。
由表2可知,各菌株占比以假單胞菌(52.30%)和腸桿菌(31.09%)為主,占比達到菌落總數(shù)的83.39%,剩余腐敗菌分別為熱殺索絲菌(12.40%)、乳酸菌(2.69%)、球菌(1.50%)。以上結(jié)果表明,在貯藏條件下鹽水鵝的腐敗優(yōu)勢菌為假單胞菌和腸桿菌。代表性菌株系統(tǒng)發(fā)育樹見圖1,菌株分別標(biāo)記為J、C、S、R、P。
2.2 鹽水鵝N2氣調(diào)包裝制品的代表性菌株鑒定結(jié)果
根據(jù)《伯杰細菌鑒定手冊》[17]與《常見細菌系統(tǒng)鑒定手冊》[18],用BLAST軟件將5個菌株(假單胞菌、腸桿菌、熱殺索絲菌、乳酸菌、球菌)的16S rDNA序列與GenBank中已知序列進行比對分析,選取同源性較高的菌株序列構(gòu)建系統(tǒng)發(fā)育樹,結(jié)果見表3和圖1。
由表3和圖1可知,J與假單胞菌屬的熒光假單胞菌(Pseudomonas fluorescens)同源性最高,相似性為99%;C與腸桿菌科的產(chǎn)氣腸桿菌(Enterobacter aerogenes)同源性最高,相似性為97%;S與索絲菌屬的熱殺索絲菌(Brochothrix thermosphacta)同源性最高,相似性為99%;R與乳酸菌屬的消化乳桿菌(Lactobacillus alimentarius)同源性最高,相似性為92%;P與葡萄球菌屬的腐生葡萄球菌(Staphylococcus sarophyticus)同源性最高,相似性為98%。根據(jù)已知腐敗代表性菌株,進一步為鹽水鵝的保鮮技術(shù)提供了理論依據(jù)。
2.3 鹽水鵝N2氣調(diào)包裝制品保鮮劑單因素試驗結(jié)果
3種生物保鮮劑的單因素抑菌試驗結(jié)果見表4,空白組中各抑菌圈均為8.0 mm。
由表4可知,當(dāng)Nisin濃度范圍為0.03%~0.05%時,隨著乳酸鏈球菌素濃度的增加,其對R、P、S的抑制作用逐漸增強,J、C的抑菌圈無明顯變化,因此,可將此Nisin濃度范圍用于復(fù)配。當(dāng)殼聚糖濃度范圍為0.36%~0.60%時,隨著殼聚糖濃度的增加,其對J和C的抑制作用逐漸增強,同時R的抑菌圈逐漸擴大,但擴大速度較慢,而P和S的抑菌圈無明顯變化。因此,殼聚糖的濃度范圍為0.36%~0.60%時可用于復(fù)配。當(dāng)丁香提取物濃度范圍為3.6%~6.0%時,隨著丁香提取物濃度的增加,其對J、C、R、P、S 5種代表性菌株均有抑制作用,特別對J、R和P的抑制作用較強。因此,丁香提取物濃度范圍為3.6%~6.0%時抑制作用最強,可用于復(fù)配。
2.4 鹽水鵝保鮮劑BBD與響應(yīng)面優(yōu)化
根據(jù)單因素試驗結(jié)果,運用Design Expert 13對Nisin、殼聚糖和丁香提取物進行復(fù)配試驗,并將復(fù)合保鮮劑添加于鹽水鵝中,于4 ℃條件下保藏3 d,測其TVB-N值,結(jié)果見表5。
對表5中的數(shù)據(jù)進行回歸擬合,得到鹽水鵝的TVB-N值與Nisin、殼聚糖和丁香提取物3個因素之間的二次方程:TVB-N=11.28+0.67A+0.68B+0.15C-0.78AB-0.013AC-0.40BC+0.41A2+1.14B2+0.12C2,可知鹽水鵝復(fù)合保鮮劑的最佳添加量為Nisin 0.03%、殼聚糖0.42%、丁香提取物2.40%,在此復(fù)配組合下,鹽水鵝的TVB-N值較小,預(yù)測值為10.23 mg/100 g。實際測得TVB-N值為12.47 mg/100 g,與預(yù)測值基本相符,表明優(yōu)化后的回歸方程能較好地預(yù)測各因素與TVB-N值之間的關(guān)系,該復(fù)配工藝具有實際應(yīng)用價值。對該模型進行方差分析,結(jié)果見表6。
由表6可知,該模型具有極顯著性差異(P<0.01),且決定系數(shù)R2為0.986 1,說明該模型非常適合擬合試驗結(jié)果[19]。失擬項不顯著(P>0.05),表明模型誤差較小。校正決定系數(shù)RAdj2為0.968 1,表明模型在相關(guān)性和解釋能力方面表現(xiàn)出色,可用于理論分析和預(yù)測。
F值是評價各變量對響應(yīng)值影響程度的重要指標(biāo)。較大的F值表示模型分項對響應(yīng)值的貢獻度較高。當(dāng)顯著性檢驗概率P<0.05時,表明該變量對響應(yīng)值的影響顯著,并且具有統(tǒng)計學(xué)上的意義。分析各因素對TVB-N值的影響可知,一次項Nisin濃度(A)、殼聚糖濃度(B)對TVB-N值的影響極顯著(P<0.01),3個影響因素中,對TVB-N值的影響程度為B>A>C,即殼聚糖濃度>Nisin濃度>丁香提取物濃度。二次項A2、B2對TVB-N值的影響極顯著(P<0.01),說明這兩個因素對模糊數(shù)學(xué)感官評分具有非線性的影響。交互項AB、BC對TVB-N值的影響極顯著(P<0.01)。
2.5 響應(yīng)面交互作用分析
為研究各因素之間的交互作用,采用Design-Expert 13軟件繪制了響應(yīng)面圖包括3D圖形和等高線圖。圖形的坡度越大表示對試驗結(jié)果的影響越顯著。觀察3D響應(yīng)面圖能夠直觀地揭示各因素之間的交互作用對TVB-N值的影響,確定最佳工藝參數(shù)以及參數(shù)之間的相互作用。響應(yīng)面分析結(jié)果見圖2~圖4。
Nisin濃度和殼聚糖濃度對鹽水鵝樣品TVB-N值的交互作用見圖2。
由圖2可知,等高線呈橢圓形,表示兩因素的交互作用顯著,響應(yīng)面圖表示鹽水鵝的TVB-N值隨著Nisin濃度和殼聚糖濃度的增加呈先減少后緩慢增加的趨勢。
殼聚糖濃度和丁香提取物濃度對鹽水鵝樣品TVB-N值的交互作用見圖3。
由圖3可知,等高線呈橢圓形,表示兩因素的交互作用顯著,響應(yīng)面圖表示鹽水鵝的TVB-N值隨著殼聚糖濃度和丁香提取物濃度的增加呈先減少后緩慢增加的趨勢。
Nisin濃度和丁香提取物濃度對鹽水鵝樣品TVB-N值的交互作用見圖4。
由圖4可知,在試驗范圍內(nèi),響應(yīng)面圖表示鹽水鵝的TVB-N值隨著Nisin濃度和丁香提取物濃度的增加呈先減少后緩慢增加的趨勢。
2.6 最優(yōu)工藝及驗證試驗結(jié)果
以TVB-N最小值為優(yōu)化目標(biāo),用Design-Expert 13軟件對試驗進行優(yōu)化設(shè)計,得到的TVB-N值較小,預(yù)測值為10.23 mg/100 g。此時3個因素的預(yù)測值分別為Nisin濃度0.03%、殼聚糖濃度0.42%、丁香提取物濃度2.40%,為了確定該模型的準(zhǔn)確性,采用優(yōu)化后的參數(shù)進行驗證試驗,為方便操作,條件參數(shù)設(shè)為Nisin濃度0.03%、殼聚糖濃度0.42%、丁香提取物濃度2.40%,平行3次試驗取平均值,測得TVB-N值為12.47 mg/100 g,與試驗數(shù)據(jù)基本相符,與模型預(yù)測值12.08 mg/100 g在5%偏差范圍內(nèi),說明優(yōu)化后的回歸方程模型可以用于實踐。
3 結(jié)論
本研究以氣調(diào)包裝鹽水鵝制品為試驗對象,對其進行破壞性試驗,以被檢出的氣調(diào)包裝鹽水鵝制品中的代表性菌株為受試菌株,通過單因素試驗得出Nisin對R、S、P有較好的抑菌作用;殼聚糖對J、C有較好的抑菌作用;丁香提取物對J、R、P有較好的抑菌作用。利用MAP技術(shù)進行綜合保鮮,篩選出最佳復(fù)配保鮮劑,通過Design-Expert 13軟件對數(shù)據(jù)進行回歸擬合,得出鹽水鵝最優(yōu)復(fù)合保鮮劑組合為Nisin 0.03%+殼聚糖0.42%+丁香提取物2.40%,鹽水鵝樣品的曲面極值點TVB-N值的最小值為12.47 mg/100 g。本研究為該保鮮技術(shù)的研究應(yīng)用提供了基礎(chǔ),同時為提高鹽水鵝的品質(zhì)、擴大鹽水鵝的銷售市場、推進鹽水鵝產(chǎn)業(yè)化提供了一定的指導(dǎo)意義。
參考文獻:
[1]沈暉.揚州鵝煲湯過程中固形物含量的變化分析[J].美食研究,2018,34(4):49-52.
[2]錢翔羽,于海,葛慶豐,等.揚州市售鹽水鵝品質(zhì)分析[J].中國調(diào)味品,2018,43(7):126-130.
[3]要志宏.揚州鹽水鵝危害因子識別及風(fēng)險評估[D].揚州:揚州大學(xué),2018.
[4]董洋,王虎虎,閆振國,等.真空包裝鹽水鵝加工過程中微生物污染狀況與菌群多樣性研究[J].南京農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報,2012,35(3):121-126.
[5]張元嵩,蔣云升,崔楊晨,等.氣調(diào)包裝鹽水鵝優(yōu)勢菌的初步研究[J].現(xiàn)代食品,2018(21):192-197.
[6]周濤,余娟,毛楊敏.真空包裝鹽水鵝中腐敗細菌的分離鑒定[J].食品工業(yè)科技,2016,37(14):219-222.
[7]王虎虎,董洋,李諾,等.真空包裝鹽水鵝貯藏期菌群多樣性動態(tài)分析[J].中國食品學(xué)報,2017,17(4):258-264.
[8]劉少偉.真空包裝食品≠絕對安全[J].大眾健康,2020(6):84-85.
[9]姚堯,畢曉彤,白鴿,等.包裝方式對冷鮮雞肉貯藏品質(zhì)的影響[J].食品科技,2018,43(9):152-157.
[10]楊煥彬,曾慶培,林光明,等.生物保鮮劑在禽肉保鮮中的應(yīng)用研究進展[J].輕工學(xué)報,2021,36(6):38-46.
[11]劉慧.現(xiàn)代食品微生物學(xué)實驗技術(shù)[M].北京:中國輕工業(yè)出版社,2017:260-268.
[12]賴宏剛.真空包裝冷鮮雞中代表株微生物的分離鑒定[J].江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué),2018,46(17):198-201.
[13]國家衛(wèi)生和計劃生育委員會.食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品中揮發(fā)性鹽基氮的測定:GB 5009.228—2016[S].北京:中國標(biāo)準(zhǔn)出版社,2016.
[14]國家衛(wèi)生和計劃生育委員會.食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品添加劑使用標(biāo)準(zhǔn):GB 2760—2014[S].北京:中國標(biāo)準(zhǔn)出版社,2014.
[15]聶相珍.雪菜肉絲蓋澆方便面澆頭的研制與營養(yǎng)衛(wèi)生學(xué)評價[D].揚州:揚州大學(xué),2017.
[16]要志宏,聶相珍,皇甫秋霞,等.真空包裝雪菜肉絲的初始菌相分析與代表株的鑒定[J].中國調(diào)味品,2017,42(4):1-3.
[17]R·E·布坎南,N·E·吉本斯.伯杰細菌鑒定手冊(第八版)[M].北京:科學(xué)出版社,1995:591-611.
[18]東秀珠,蔡妙英.常見細菌系統(tǒng)鑒定手冊[M].北京:科學(xué)出版社,2001:364-370.
[19]盧珍蘭,龐永慧,龐情,等.響應(yīng)面法優(yōu)化百香果果醋澄清的酶解工藝[J].中國調(diào)味品,2023,48(4):137-142.