王子楊,劉美志,胡曉貞,周苗,翁嘉灝,賴志昆,孫永寧

(上海中醫(yī)藥大學(xué)附屬市中醫(yī)醫(yī)院,上海 200071)

冠狀動脈粥樣硬化性心臟病(簡稱冠心病,Coronary heart disease, CHD)是全球發(fā)病率和死亡率最高的心血管疾病之一[1],在中國,冠心病的發(fā)病率與死亡率也呈上升態(tài)勢[2],嚴(yán)重危害人類生命健康,給患者和社會造成沉重的經(jīng)濟負(fù)擔(dān)。心絞痛是由于暫時性心肌缺血引起的以胸痛為主要特征的臨床綜合征,是冠心病的最常見表現(xiàn)。目前對于冠心病的治療手段主要包括以抗血小板、調(diào)脂穩(wěn)斑等為主的藥物保守治療和以經(jīng)皮冠狀動脈支架植入術(shù)(Percutaneous coronary intervention, PCI)為主的介入治療。冠心病心絞痛屬于中醫(yī)學(xué)“胸痹”“心痛”等范疇,中醫(yī)藥在對該病的治療中積累了大量經(jīng)驗,能夠一定程度上改善冠心病患者的臨床癥狀及長期預(yù)后,但具體作用靶點或干預(yù)途徑尚不明確。轉(zhuǎn)錄組學(xué)能夠從整體水平上研究細(xì)胞中基因轉(zhuǎn)錄的情況及轉(zhuǎn)錄調(diào)控規(guī)律,目前已在中醫(yī)藥對疾病相關(guān)基因表達的影響、中醫(yī)證候、中藥有效成分的生物合成機制等現(xiàn)代中醫(yī)藥研究領(lǐng)域中被廣泛應(yīng)用[3]。

脈通君安湯是孫永寧教授的經(jīng)驗方,由經(jīng)典名方補陽還五湯加瓜蔞子、瓜蔞皮、黨參、白術(shù)組成,具有補氣活血、化瘀通絡(luò)之功效,對氣虛血瘀型冠心病心絞痛患者療效確切,但尚未被臨床隨機對照研究所證實。故本研究通過觀察脈通君安湯治療氣虛血瘀型冠心病心絞痛的療效,并對患者治療前后的外周血樣本進行轉(zhuǎn)錄組測序,旨在初步探索脈通君安湯潛在的作用靶點,為其臨床應(yīng)用提供科學(xué)依據(jù)。

1 臨床資料

1.1 一般資料

選取2023年2—12月在上海市中醫(yī)醫(yī)院心病科就診的140例氣虛血瘀型冠心病心絞痛患者,按照隨機數(shù)字表法分為治療組和對照組各70例,其中對照組脫落3例。2組患者性別、年齡、病程、合并癥及加拿大心血管學(xué)會(Canadian cardiovascular society, CCS)心絞痛分級等一般資料比較無統(tǒng)計學(xué)差異(P>0.05),具有可比性,見表1。本研究通過上海市中醫(yī)醫(yī)院倫理委員會審核通過(倫理批號:2023SHL-KY-23-01)。

表1 2組患者基線資料比較Table 1 Comparison of baseline information between 2 groups of

1.2 診斷標(biāo)準(zhǔn)

1.2.1 西醫(yī)診斷標(biāo)準(zhǔn) 參照2018年中華醫(yī)學(xué)會《穩(wěn)定性冠心病診斷與治療指南》[5]及2007年《慢性穩(wěn)定性心絞痛診斷與治療指南》[6]中冠心病心絞痛診斷標(biāo)準(zhǔn)制定:有明確的陳舊性心肌梗死病史;冠脈造影提示至少1支冠脈狹窄,且管腔狹窄≥50%;冠狀動脈CT血管成像提示主要血管管腔狹窄≥50%(或中度以上狹窄);心絞痛發(fā)作的程度、頻度、性質(zhì)及誘發(fā)因素在數(shù)周內(nèi)無明顯變化。

1.2.2 中醫(yī)辨證標(biāo)準(zhǔn) 參照 2002 年《中藥新藥臨床研究指導(dǎo)原則》[7]中冠心病證候診斷標(biāo)準(zhǔn),并通過2名高級職稱的中醫(yī)醫(yī)師聯(lián)合判定。主癥:胸痛,胸悶;次癥:心悸,氣短,神疲乏力,面色紫暗;舌脈:舌淡紫,脈弱而澀。符合主癥1項加次癥2項,結(jié)合舌脈即可辨證為氣虛血瘀型。

1.3 納入、排除及脫落標(biāo)準(zhǔn)

1.3.1 納入標(biāo)準(zhǔn) ①年齡在40～75歲;②符合冠心病心絞痛診斷標(biāo)準(zhǔn)及中醫(yī)氣虛血瘀證辨證標(biāo)準(zhǔn);③CCS心絞痛分級Ⅱ～Ⅳ級;④自愿簽署知情同意書。

1.3.2 排除標(biāo)準(zhǔn) ①左冠狀動脈主干狹窄;②未控制的高血壓或經(jīng)降壓藥物控制后收縮壓≥160 mmHg和/或舒張壓≥100 mmHg(1 mmHg=0.133 kPa) ;③未控制的快速型心律失常、高度或完全房室傳導(dǎo)阻滯或有癥狀的重度主動脈瓣狹窄、失代償心力衰竭、急性肺栓塞、深靜脈血栓、急性心包炎或心肌炎、急性主動脈夾層;④慢性肺病伴有呼吸困難癥狀;⑤近期卒中或短暫性缺血發(fā)作,有認(rèn)知功能障礙;⑥尚未糾正的臨床問題,如感染、嚴(yán)重貧血、電解質(zhì)紊亂、甲狀腺功能亢進等;⑦肝腎功能異常者(谷丙轉(zhuǎn)氨酶或肌酐>2倍正常參考值上限);⑧過敏體質(zhì)及對多種藥物過敏者。

1.3.3 脫落標(biāo)準(zhǔn) ①納入后資料不完善者;②主動退出試驗及失訪者。

2 方法

2.1 治療方法

對照組:予CHD二級預(yù)防西醫(yī)基礎(chǔ)治療[8],包括抗血小板藥:阿司匹林腸溶片(Bayer Vital GmbH,批號:BJ77230)100 mg·d-1;硫酸氫氯吡格雷片(深圳信立泰藥業(yè)股份有限公司,批號:B230910)75 mg·d-1;調(diào)脂藥:阿托伐他汀鈣片(Godecke GmbH,批號:KC1H4012)20 mg·d-1、瑞舒伐他汀鈣片(浙江京新藥業(yè)股份有限公司,批號:505779)5 mg·d-1;血管緊張素轉(zhuǎn)化酶抑制劑:馬來酸依那普利片(河南靈廣制藥有限公司,批號:23112512)5 mg·d-1;血管緊張素Ⅱ受體拮抗劑:厄貝沙坦片(浙江華海藥業(yè)股份有限公司,批號:0000074129)150 mg·d-1、β受體阻滯劑:琥珀酸美托洛爾緩釋片(阿斯利康制藥有限公司,批號:2308127)47.5 mg·d-1,口服。

治療組:在對照組治療基礎(chǔ)上加服脈通君安湯,組成:黃芪60 g(批號:20231008-2),當(dāng)歸6 g(批號:20230819-1),黨參12 g(批號:20230907-1),炒白術(shù)9 g(批號:20230920-1),炒瓜蔞子6 g(批號:20230823-1),炒瓜蔞皮6 g(批號:20230830-1),桃仁6 g(批號:20230913-1),紅花3 g(批號:20230728-1),川芎6 g(批號:20230810-1),赤芍6 g(批號:20230908-1),地龍6 g(批號:20230901-2),甘草3 g(批號:20230729-2)。飲片均購自上海萬仕誠藥業(yè)有限公司,由上海市中醫(yī)醫(yī)院中藥房統(tǒng)一提供并煎煮,每日1劑,每袋100 mL,早晚各口服1袋。

2組療程均為8周。

2.2 觀察指標(biāo)及方法

2.2.1 中醫(yī)證候積分 治療前后評估2組患者中醫(yī)證候積分,主癥按輕、中、重分別計2、4、6分,次癥按輕、中、重分別計1、2、3分。積分越高,表示患者癥狀越嚴(yán)重。

2.2.2 臨床療效評價 參照CCS心絞痛分級標(biāo)準(zhǔn)進行判定,顯效:心絞痛的癥狀得到有效緩解或者心絞痛評級提高至少2級;有效:心絞痛評級改善了1級,但未達到2級;無效:心絞痛分級沒有好轉(zhuǎn);加重:心絞痛分級惡化 1 級或 1 級以上?？偢纳坡?(顯效例數(shù)+有效例數(shù))/總例數(shù)×100%。

2.2.3 西雅圖心絞痛量表(Seattle angina questionnaire, SAQ)評分 治療前后比較2組患者SAQ量表各維度積分變化[8],該量表有19個條目共5個維度,包括軀體活動受限程度(Physical limitation, PL)、心絞痛發(fā)作情況(Anginal frequency, AF)、心絞痛穩(wěn)定狀態(tài)(Angina stability, AS)、治療滿意程度(Treatment satisfaction, TS)、疾病認(rèn)知程度(Disease perception, DP)。每個條目按嚴(yán)重程度分別計1～6分,然后分別對5個維度中的條目得分相加,并對評分進行正向化處理,標(biāo)準(zhǔn)評分=(實際得分-維度最低分)/(維度最高分-維度最低分)×100%。每個維度滿分均為100分,評分越高,表示患者生活質(zhì)量及機體功能狀態(tài)越好。

2.2.4 焦慮自評量表(Self-rating anxiety scale, SAS)、抑郁自評量表(Self-rating depression scale,SDS) 治療前后比較2組患者SAS、SDS評分變化。SAS共20條目,每個條目按癥狀出現(xiàn)的頻度評分,以“沒有或很少時間、小部分時間、相當(dāng)多時間、絕大部分或全部時間”分別計1～4分;SDS共20條目,以“沒有或偶爾、有時、經(jīng)常、總是如此”分別計1～4分。標(biāo)準(zhǔn)評分=各項評分之和×1.25。評分越高,表示患者癥狀越嚴(yán)重。

2.2.5 安全性指標(biāo) 治療前后檢測患者血常規(guī)、尿常規(guī)、糞便常規(guī)及肝腎功能,監(jiān)測心電圖,觀察不良反應(yīng)的發(fā)生情況。

2.2.6 轉(zhuǎn)錄組測序及數(shù)據(jù)分析

2.2.6.1 外周血樣本采集 治療前后采用規(guī)范的靜脈穿刺技術(shù)收集患者空腹外周靜脈血2.5 mL至BD PAXgene全血RNA采集管(PAXgene采血管)中,采血結(jié)束后輕輕上下顛倒8～10次,以確保靜脈血與PAXgene采血管內(nèi)RNA穩(wěn)定劑充分混勻,采取梯度降溫方式保存,將PAXgene采血管靜置于18～25 °C環(huán)境中保存4 h后置于-20°C的冰箱保存24 h以上,最后保存于-80°C冰箱中備用。

2.2.6.2 總RNA抽提與純度檢測 采用RNeasy mini kit RNA試劑盒(德國Qiagen公司,貨號:74104)純化自動化分離提取臨床樣本外周血總RNA。外周血RNA提取和純化的具體步驟按照標(biāo)準(zhǔn)化流程進行。使用Qubit?3.0熒光計和Nanodrop One分光光度計測定RNA濃度和質(zhì)量。使用Agilent Technogies 2100生物分析儀評估總RNA的完整性,并采用RNA完整性數(shù)(RIN)值>7.0的樣品進行測序。

2.2.6.3 轉(zhuǎn)錄組測序及數(shù)據(jù)分析 使用illumina的ABclonal Whole RNA-seq Lib Prep kit構(gòu)建RNA-seq鏈特異性文庫。去除rRNA后,通過磁珠純化RNA。然后在94 ℃下使用二價陽離子將RNA片段化為小塊10 min。使用逆轉(zhuǎn)錄酶和隨機引物將切割的RNA片段復(fù)制到第一鏈cDNA中。隨后使用DNA聚合酶Ⅰ和核糖核酸酶 H(RNase H)進行第二鏈cDNA合成。然后,這些cDNA片段經(jīng)歷末端修復(fù)過程,添加單個“a”堿基和連接銜接子。通過PCR純化并富集產(chǎn)物以產(chǎn)生最終的cDNA文庫。通過Qubit?3.0熒光計和Agilent 2100生物分析儀對純化的文庫進行定量和驗證,以確認(rèn)插入物的大小并計算摩爾濃度。將文庫稀釋至10 pM后,由cBot生成簇,然后在Illumina NovaSeq 6000平臺上測序。采用Qubit3.0對文庫進行初步定量后采用Agilent 2100 生物分析儀檢測文庫大小范圍,確認(rèn)目的片段大小符合預(yù)期后,采用qPCR 法確定文庫的有效濃度和定量。選用paired-end程序,進行雙端(PE)測序。測序的過程完全由 Illumina提供的data collection software 進行控制,并實時對測序結(jié)果數(shù)據(jù)進行分析。使用fastp軟件對序列進行過濾,得到clean reads后,再使用HISAT2軟件(http://daehwankimlab.github.io/hisat2/)將clean reads與參考基因組進行比對。以上測序工作由上海鯨舟基因科技有限公司專業(yè)技術(shù)人員完成。

2.3 統(tǒng)計學(xué)方法

3 結(jié)果

3.1 2組患者治療前后中醫(yī)證候積分比較

結(jié)果見表2。

表2 2組患者治療前后中醫(yī)證候積分比較[M(P25,P75)]Table 2 Comparison of TCM syndrome points before and after treatment in 2 groups [M(P25,P75)]

3.2 2組患者治療后CCS心絞痛分級比較

結(jié)果見表3。

表3 2組患者治療后CCS心絞痛分級比較Table 3 Comparison of CCS angina grading between 2 groups of patients after treatment

3.3 2組患者治療前后SAQ量表評分比較

結(jié)果見表4。

表4 2組患者治療前后SAQ量表評分比較[M(P25,P75)]Table 4 Comparison of SAQ scale scores before and after treatment between 2 groups [M(P25,P75)]

3.4 2組患者治療前后SAS、SDS評分比較

結(jié)果見表5。

表5 2組患者治療前后SAS、SDS評分比較[M(P25,P75)]Table 5 Comparison of SAS and SDS scores between 2 groups before and after treatment [M(P25,P75)]

3.5 安全性指標(biāo)

2組患者治療后血常規(guī)、尿常規(guī)、糞便常規(guī)、肝腎功能等均未見明顯異常改變。

3.6 轉(zhuǎn)錄組學(xué)結(jié)果

隨機選取9例患者包括7名男性和2名女性,平均年齡(60.9±8.7)歲,平均病程(3.5±1.4)a,與治療組患者總體情況基本匹配,治療前后對其外周血樣本進行轉(zhuǎn)錄組測序。結(jié)果表明脈通君安湯治療前后有顯著差異表達的mRNA共計862個,包括509個顯著上調(diào),353個顯著下調(diào)(圖1)。

圖1 治療前后差異表達的mRNA火山圖Fig.1 Differential mRNA volcano plot before and after treatment

通過微生信平臺(https://www.bioinformatics.com.cn/)對差異mRNA進行GO和KEGG富集分析,GO分析結(jié)果顯示:差異表達mRNA的生物學(xué)過程(Biological process,BP)有666條,主要包括病毒基因表達、翻譯啟動、RNA分解代謝過程等(圖2),細(xì)胞組分(Cell component,CC)112條,主要包括黏著斑、核糖體亞基、核斑點等(圖3),分子功能(Molecular function,MF)有94條,主要包括雙鏈RNA結(jié)合、鈣黏蛋白結(jié)合、轉(zhuǎn)錄共調(diào)節(jié)因子活性等(圖4)。KEGG分析結(jié)果顯示:差異表達的mRNA富集信號通路包括20條,主要包括甘油磷脂代謝通路、單磷酸腺苷激活的蛋白激酶(AMP-activated protein kinase,AMPK)信號通路、核糖體通路等(圖5)。

圖2 差異表達排名前10的mRNA BP弦圖Fig. 2 Chord diagram of top ten BP in differential mRNA ranking

圖3 差異表達排名前10的mRNA CC弦圖Fig.3 Chord chart of top ten cellular components CC in differential mRNA ranking

圖4 差異表達排名前10的mRNA MF弦圖Fig.4 Chord diagram of top ten MF in differential mRNA ranking

圖5 KEGG富集分析結(jié)果弦圖Fig.5 Chord plot of KEGG enrichment analysis results

4 討論

冠心病是最常見的心血管疾病之一,雖然現(xiàn)代醫(yī)學(xué)有多種治療手段,但冠心病的發(fā)病率和因病致死人數(shù)仍處在高水平[9]。冠心病常伴發(fā)焦慮、抑郁等心理疾患,在一定程度上影響疾病的治療效果和康復(fù)進展。如何提高冠心病患者的生活質(zhì)量和降低死亡率,改善遠期預(yù)后一直是臨床關(guān)注的熱點?，F(xiàn)代研究證實,中醫(yī)藥治療在緩解心絞痛、預(yù)防PCI術(shù)后再狹窄、改善心力衰竭等許多方面有獨到的臨床優(yōu)勢[10]。轉(zhuǎn)錄組學(xué)是在整體水平上研究特定階段或生理狀態(tài)下某一細(xì)胞或組織所有基因轉(zhuǎn)錄情況及轉(zhuǎn)錄調(diào)控規(guī)律的一門學(xué)科[11],在一定程度上與中醫(yī)的“證”的內(nèi)涵相對應(yīng),近年來被廣泛應(yīng)用在中醫(yī)藥治療疾病的機理探索方面[12]。

孫永寧教授師承首屆國醫(yī)大師張學(xué)文教授,認(rèn)為冠心病的病因病機為外感風(fēng)寒邪氣,加之素體稟賦不足,或勞倦內(nèi)傷,或飲食失節(jié),而致心痹,心痹日久,氣血虛耗,瘀血內(nèi)阻,頑者夾雜痰濕內(nèi)毒,而使心痹愈難治也,其發(fā)病以虛、瘀、痰、毒為主要病理因素,以補虛、活血、化痰、解毒為主要治法[13]。有研究納入232篇文獻共計29 257例冠心病患者發(fā)現(xiàn),我國冠心病最常見的中醫(yī)證型為氣虛血瘀證[14]。另有1項檢索1999—2013年冠心病中醫(yī)辨證相關(guān)文獻的研究,納入87篇文獻,涉及6 155名患者,結(jié)果顯示排名前3位的證型為氣虛血瘀證、心血瘀阻證和痰阻心脈證[15]。故而孫教授根據(jù)冠心病氣虛血瘀證的核心病機,認(rèn)為治療當(dāng)以補氣活血為主,尤其重在補氣,氣足則血脈通暢。并自擬脈通君安湯,方中重用黃芪補益元氣,意在使氣旺則血行,瘀去則絡(luò)通,當(dāng)歸活血通絡(luò)而不傷血,與黃芪相配,共為君藥;黨參善補中焦之氣,養(yǎng)血生津,瓜蔞子、瓜蔞皮理氣寬胸,通陽泄?jié)?補氣兼行氣,川芎為“血中氣藥”,可行氣活血解郁,赤芍涼血散瘀,共為臣藥;白術(shù)健脾燥濕,加強益氣助運之力,桃仁、紅花、地龍通經(jīng)活絡(luò),力專善走,周行全身以行藥力,共為佐助;甘草調(diào)和諸藥,為使藥?，F(xiàn)代藥理學(xué)研究表明脈通君安湯中多種藥物成分具有改善心肌缺血、降低細(xì)胞損傷等作用,其中黃芪多糖可以通過調(diào)節(jié)AMPK/mTOR通路來改善阿霉素誘導(dǎo)的心臟毒性[16],黃芪甲苷可以通過調(diào)節(jié)磷脂代謝和清除ROS來減輕氧化應(yīng)激引起的心肌缺血再灌注損傷[17]。當(dāng)歸具有抗氧化、抗炎和抑制血小板聚集等作用[18],可以通過磷酸化p38 MAPK和90 kDa核糖體S6激酶(p-p90RSK)等減少海馬缺血再灌注損傷[19]。川芎內(nèi)酯可以通過LKB12-AMPK-mTOR信號通路保護PC1細(xì)胞免受氧-葡萄糖剝奪/再氧誘導(dǎo)的細(xì)胞凋亡[20]。瓜蔞皮具有保護缺血心肌、抗動脈粥樣硬化、抗血小板聚集等作用[21]。桃仁-紅花是常用活血化瘀藥對,其治療冠心病機制可能與包括腫瘤壞死因子信號通路在內(nèi)的多條炎癥通路相關(guān)[22]。本研究結(jié)果表明,脈通君安湯聯(lián)合CHD二級預(yù)防西醫(yī)基礎(chǔ)治療能夠改善冠心病心絞痛患者癥狀,降低CCS心絞痛分級及SAS、SDS評分,提高SAQ評分,具有較好的臨床療效,能顯著提高患者的生活質(zhì)量及機體功能,改善焦慮、抑郁等負(fù)性心理情緒。

本研究轉(zhuǎn)錄組學(xué)結(jié)果表明,脈通君安湯治療冠心病的藥理學(xué)機制是多靶點多通路的聯(lián)合作用,主要涉及甘油磷脂代謝通路、AMPK信號通路、核糖體通路等,這些信號通路與動脈粥樣硬化的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)。

由甘油構(gòu)成的磷脂稱為甘油磷脂,是生物膜的主要構(gòu)成成分,也是膽汁和膜表面活性物質(zhì)的主要成分,參與細(xì)胞膜對蛋白質(zhì)的識別和信號傳導(dǎo),其主要包括磷脂酰膽堿、磷脂酰絲氨酸、磷脂酰甘油等。膳食磷脂酰膽堿中膽堿部分的腸道微生物代謝與冠狀動脈疾病之間存在機制聯(lián)系,并通過產(chǎn)生三甲胺-N-氧化物導(dǎo)致動脈粥樣硬化,從而提高患者的心血管風(fēng)險[23]。磷脂酰絲氨酸介導(dǎo)的凋亡小體識別可激活特定的膜啟動信號,進一步將磷脂酰絲氨酸與膽固醇代謝和脂質(zhì)穩(wěn)態(tài)聯(lián)系起來[24-25]。磷脂酰絲氨酸膜受體、腦特異性血管生成抑制劑1(Brain-specific angiogenesis inhibitor 1,BAI1)對凋亡細(xì)胞的磷脂酰絲氨酸依賴性識別,開啟膜啟動途徑,使ATP結(jié)合盒轉(zhuǎn)運蛋白A1(Recombinant ATP binding cassette transporter A1, ABCA1)快速上調(diào),將多余的膽固醇排出細(xì)胞外,從而產(chǎn)生抗炎作用,減輕動脈粥樣硬化。此外,磷脂酰絲氨酸富含小而致密的高密度脂蛋白顆粒,也具有抗動脈粥樣硬化作用[26]。核糖體是在各類細(xì)胞中普遍存在的顆粒狀結(jié)構(gòu),是一種非常重要的細(xì)胞器,其功能是合成蛋白質(zhì)[27]。核糖體合成蛋白1(Ribosome biogenesis protein 1,BOP1)和Pescadillo同源物1(Pescadillo homolog 1,PES1)在動脈粥樣硬化患者中表達增加,并且二者均能夠通過促進rRNA前體的剪接和核糖體生物合成來促進rRNA成熟,從而導(dǎo)致核糖體生物發(fā)生的過度激活,并最終導(dǎo)致人主動脈平滑肌細(xì)胞異常增殖和動脈粥樣硬化[28-29]。核糖體生物發(fā)生始于核仁,受到包括核仁素(Nucleolin,Ncl)在內(nèi)的300多種非核糖體因子調(diào)節(jié)rRNA前體轉(zhuǎn)錄和核糖體組裝[30]。Ncl的異常定位參與多種病理過程,有研究表明,Ncl 表達異常與多種心血管疾病的發(fā)生有關(guān),包括心肌梗死[31]、心力衰竭[32]和動脈粥樣硬化[33]等。AMPK是一種廣泛表達于多種組織和器官的代謝和氧化還原狀態(tài)傳感器。AMPK的細(xì)胞信號通路參與多種生理過程,如代謝、細(xì)胞骨架構(gòu)建、轉(zhuǎn)錄控制、細(xì)胞凋亡和自噬[34],AMPK激活減少巨噬細(xì)胞中促炎細(xì)胞因子的釋放,包括白細(xì)胞介素1β(Interleukin 1β, IL-1β)、IL-6和腫瘤壞死因子α(Tumor necrosis factor α,TNF-α)等,同時增加巨噬細(xì)胞中抗炎細(xì)胞因子IL-10的表達[35]。激活的AMPK主要通過自噬調(diào)節(jié)平滑肌收縮和遷移,從而發(fā)揮抗動脈粥樣硬化作用[36]。脈通君安湯可能主要通過調(diào)節(jié)上述信號通路,從甘油磷脂代謝、核糖體代謝及AMPK相關(guān)炎癥信號途徑方面對冠心病起到治療作用。

綜上所述,通過臨床及轉(zhuǎn)錄組學(xué)研究發(fā)現(xiàn),脈通君安湯對氣虛血瘀型冠心病心絞痛具有較好的臨床療效和安全性,并通過多成分、多靶點、多途徑來協(xié)同發(fā)揮防治冠心病的作用。但是本研究同時存在樣本量較少、對轉(zhuǎn)錄組學(xué)的關(guān)鍵基因未進行驗證等不足,后續(xù)將繼續(xù)開展多中心、大樣本量隨機對照臨床研究,對關(guān)鍵mRNA表達水平進行qPCR檢測,并在動物與細(xì)胞實驗中對此次篩選出的關(guān)鍵靶點及信號通路進一步驗證,為脈通君安湯治療氣虛血瘀型冠心病心絞痛的藥理學(xué)研究和臨床應(yīng)用提供依據(jù)。