夏清瑤 魏新堯 張愛(ài)民 劉成琳

【摘 要】 目的：優(yōu)化白芍總苷脂質(zhì)體凝膠的制備工藝。方法：以卡波姆用量、甘油用量、三乙醇胺用量為考察因素，均勻度、透明度、流動(dòng)性為質(zhì)量評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)，采用Box-Behnken響應(yīng)面法優(yōu)化白芍總苷脂質(zhì)體凝膠的制備工藝。結(jié)果：白芍總苷脂質(zhì)體凝膠最佳制備工藝的卡波姆用量為2 g，甘油用量為90 g，三乙醇胺用量為30 g。結(jié)論：優(yōu)化后的白芍總苷脂質(zhì)體凝膠制備工藝制備出的白芍總苷脂質(zhì)體凝膠外觀均勻、透明度高、流動(dòng)性好。優(yōu)化后的白芍總苷脂質(zhì)體凝膠制備工藝穩(wěn)定可行，可以代替現(xiàn)有的傳統(tǒng)制備工藝，應(yīng)用于臨床治療。

【關(guān)鍵詞】 白芍總苷（TGP）；脂質(zhì)體凝膠；Box-Behnken響應(yīng)面法；制備技術(shù)

【中圖分類號(hào)】R282.6?? 【文獻(xiàn)標(biāo)志碼】 A??? 【文章編號(hào)】1007-8517（2024）02-0041-05

DOI：10.3969/j.issn.1007-8517.2024.02.zgmzmjyyzz202402009

Optimization of the Process for Preparing Liposome Gel of TGP Based on the Box-Behnken Response Surface Method

XIA Qingyao WEI Xinyao ZHANG Aimin LIU Chenglin*

Tonghua Normal University，Tonghua 134002，China

Abstract：Objective? Optimize the process for preparing liposome gel of TGP.Methods? With the dosage of carbomer，glycerol and triethanolamine as the investigation factors，and the evenness，transparency and fluidity as the quality evaluation criteria，the Box-Behnken response surface method was used to optimize the process for preparing liposome gel of TGP.Results? The dosage of carbomer was 2g，glycerol was 90g and triethanolamine was 30 g. Conclusion? Liposome gel of TGP prepared by the optimized liposome gel of TGP preparation process has uniform appearance，high transparency and good fluidity.Therefore，the optimized process of liposome gel of TGP preparation is stable and feasible，and can replace the existing traditional preparation process for clinical treatment.

Keywords：Total Glucosides of Paeony（TGP）;Liposome Gel;The Box-Behnken Response Surface Method;PreparationTechnique

白芍為毛茛科植物芍藥（Paeonia lactiflora Pall）的干燥根，味苦、酸，性微寒，歸肝、脾經(jīng)；具有養(yǎng)血調(diào)經(jīng)、斂陰止汗、柔肝止痛、平抑肝陽(yáng)之效［1］。白芍總苷（total glucosides of paeony，TGP）是白芍干燥根部的提取有效部位［2］。現(xiàn)代研究［3］表明其具有調(diào)節(jié)免疫功能、對(duì)抗炎癥、修復(fù)皮膚屏障等藥理作用；白芍總苷水溶性較差，所以其傳統(tǒng)劑型膠囊劑、片劑等起效慢、生物利用度低。前期查閱文獻(xiàn)［4-5］發(fā)現(xiàn)白芍總苷具有修復(fù)皮膚屏障作用，可治療皮膚方面的疾病，考慮到白芍總苷水溶性較差，無(wú)法達(dá)到治療的效果，所以開(kāi)發(fā)新型白芍總苷外用制劑尤為重要。

脂質(zhì)體凝膠劑由脂質(zhì)體混懸液分散在高分子凝膠基質(zhì)中制備得到，是較理想的皮膚局部給藥載體［6］。具有生物相容性好、易涂抹、易清除等優(yōu)點(diǎn)，臨床中常用于局部經(jīng)皮給藥［7-8］。脂質(zhì)體凝膠劑不僅能夠長(zhǎng)時(shí)間駐留于皮膚，可以在接觸皮膚時(shí)快速潤(rùn)濕皮膚表層，有效提高藥物的透皮吸收率和延長(zhǎng)藥物在皮膚表面的滯留時(shí)間，更為其藥物貯庫(kù)效應(yīng)增強(qiáng)了藥物的緩釋性及穩(wěn)定性［9］。因此，本文通過(guò)Box-Behnken響應(yīng)面法優(yōu)化白芍總苷脂質(zhì)體凝膠的制備工藝，為今后白芍總苷脂質(zhì)體凝膠地應(yīng)用提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料、儀器與試劑

1.1.1 材料 白芍（吉林大藥房）；D101大孔吸附樹(shù)脂（天津光復(fù)精細(xì)化學(xué)研究所）。

1.1.2 試劑 甲醇（色譜純）；乙腈（色譜純 德國(guó)Merck公司）；磷酸（天津大茂化學(xué)試劑廠）；水為娃哈哈純凈水。

1.1.3 儀器 賽默飛高效液相色譜儀（包括自動(dòng)取樣器、四元泵系統(tǒng)、紫外檢測(cè)器、工作站）； 精密電子分析天平（天津天馬恒基儀器有限公司）。

1.2 方法

1.2.1 樣品溶液的制備

1.2.1.1 TGP提取物的制備 精密稱取白芍100 g，置1000 mL圓底燒瓶中，加70%乙醇提取3次，加醇量依次為10倍、8倍、6倍，提取時(shí)間分別為2 h、1.5 h、1 h，合并3次提取液，回收至無(wú)醇味，減壓濃縮至2 g/mL即得白芍總苷溶液。通過(guò)預(yù)處理的D101大孔吸附樹(shù)脂，首先用8倍樹(shù)脂體積量的水洗脫，棄去洗脫液，接著用5倍樹(shù)脂體積量的60%乙醇洗脫，最后收取洗脫液，減壓濃縮至干燥，既得TGP提取物。

1.2.1.2 TGP脂質(zhì)體的制備 采用薄膜分散法制備TGP脂質(zhì)體，分別取TGP提取物0.07 g和大豆卵磷脂0.8 g、膽固醇0.8 g，置燒杯中加20 mL甲醇，超聲溶解后，置梨形瓶中，40 ℃旋蒸揮去溶劑，直到梨形瓶中形成均勻的薄膜，加入適量pH7.4的PBS溶液，在50 ℃水浴中水化一段時(shí)間，取出在冷卻至室溫既得TGP脂質(zhì)體。

1.3 TGP脂質(zhì)體凝膠的制備及質(zhì)量評(píng)價(jià)

1.3.1 響應(yīng)面法優(yōu)化凝膠處方 根據(jù)2020版《中國(guó)藥典》規(guī)定，制備的凝膠劑外觀應(yīng)均勻、細(xì)膩并且在室溫下不液化或干涸。采用綜合加權(quán)評(píng)定的方法計(jì)算OD值，OD=均勻度×0.4+透明度×0.3+流動(dòng)性×0.3。

采用Box-Behnken響應(yīng)面設(shè)計(jì)對(duì)凝膠處方進(jìn)行優(yōu)化，將卡波姆用量設(shè)為（A），甘油用量設(shè)為（B）、三乙醇胺用量設(shè)為（C）。首先取適量卡波姆940，用適量水浸泡過(guò)夜，攪拌使溶脹，加入適量甘油制成凝膠基質(zhì)，另取1g TGP脂質(zhì)體凍干粉加水溶解，攪拌下加入凝膠基質(zhì)中，加水10 mL攪勻。凝膠處方篩選綜合評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)見(jiàn)表1，Box-Behnken Design試驗(yàn)設(shè)計(jì)因素水平表見(jiàn)表2、試驗(yàn)設(shè)計(jì)與計(jì)算結(jié)果見(jiàn)表3、回歸模型方差分析見(jiàn)表4，效應(yīng)曲面圖如圖5所示。

影響TGP脂質(zhì)體凝膠的制備工藝因素卡波姆用量設(shè)為（A），甘油用量設(shè)為（B）、三乙醇胺用量設(shè)為（C）經(jīng)回歸擬合，得到回歸方程：Y（OD）=1.9A+0.450B+2.10C+0.900AB+0.0625AC+0.0400BC+4.62A2 +3.58B2+0.5084C2，R2=0.9982，P<0.0001，表明模型的差異性顯著；失擬項(xiàng)P>0.05失擬項(xiàng)不顯著，說(shuō)明該模型擬合度和可信度均有效，試驗(yàn)誤差小，因此，可用此模型對(duì)影響卡波姆用量，甘油用量、三乙醇胺用量進(jìn)行分析和預(yù)測(cè)。

1.3.2 驗(yàn)證性實(shí)驗(yàn) 按照上述各因素最佳水平進(jìn)行驗(yàn)證性實(shí)驗(yàn)，最優(yōu)處方為卡波姆用量為2 g，甘油用量為90 g，三乙醇胺用量為30 g，制備三批樣品，經(jīng)檢測(cè)均勻度（均勻細(xì)膩）；透明度（表面光滑，有光澤）；流動(dòng)性（適中），OD值分別為8.3、8.7、8.7，RSD值為2.7%，上述結(jié)果說(shuō)明，所得實(shí)驗(yàn)結(jié)果重現(xiàn)性好，制備工藝穩(wěn)定。結(jié)果見(jiàn)表5。

2 討論

皮膚科疾病主要與免疫、細(xì)胞因子相關(guān)。TGP可以通過(guò)調(diào)節(jié)免疫功能、改善細(xì)胞因子水平達(dá)到治療皮膚類疾病的目的，并廣泛應(yīng)用于臨床治療［10］。脂質(zhì)體凝膠兼具脂質(zhì)體劑型和凝膠劑型的優(yōu)點(diǎn)，如：無(wú)刺激性、易涂抹、易清、生物相容性良好等，是近年來(lái)關(guān)注度高、快速發(fā)展的一種新興劑型，為局部用藥劑型提供了一個(gè)新的發(fā)展方向［8］。

現(xiàn)有文獻(xiàn)對(duì)白芍總苷脂質(zhì)體進(jìn)行了制備工藝優(yōu)化，但并無(wú)對(duì)白芍總苷脂質(zhì)體凝膠進(jìn)行制備工藝優(yōu)化的相關(guān)文獻(xiàn)［4］。因此，本試驗(yàn)在查閱相關(guān)資料后決定采用Box-Behnken響應(yīng)面分析法對(duì)試驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行處理，響應(yīng)面法是一種將試驗(yàn)設(shè)計(jì)與數(shù)學(xué)建模相整合的優(yōu)化試驗(yàn)的方法［11］。現(xiàn)廣泛應(yīng)用于中藥的提取工藝、炮制工藝以及制劑工藝等工藝的優(yōu)化方案之中［12］。以卡波姆用量、甘油用量、三乙醇胺用量為考察因素，均勻度、透明度、流動(dòng)性為質(zhì)量評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)，通過(guò)計(jì)算多元二次回歸方程來(lái)擬合因素和響應(yīng)值之間的函數(shù)關(guān)系，得出最佳白芍總苷脂質(zhì)體凝膠制備工藝的卡波姆用量，甘油用量和三乙醇胺用量。

試驗(yàn)結(jié)果和驗(yàn)證性表明，優(yōu)化后的白芍總苷脂質(zhì)體凝膠制備工藝制備出的白芍總苷脂質(zhì)體凝膠，外觀均勻、透明度高、流動(dòng)性好。本文為白芍總苷新劑型的制備提供了理論依據(jù)，可以此為基礎(chǔ)進(jìn)一步研究白芍總苷脂質(zhì)體凝膠的透皮吸收效果和藥物代謝動(dòng)力學(xué)等，進(jìn)一步完善白芍總苷脂質(zhì)體凝膠的用藥依據(jù)，為今后白芍總苷脂質(zhì)體凝膠的開(kāi)發(fā)以及臨床應(yīng)用提供參考。

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（收稿日期：2023-04-17 編輯：陶希睿）